Промотор мутации, влияющие на его сил

Мутации в промоторах, влияя на уровень экспрессии контролируемого гена (генов), который находится под их контролем, не изменяют кодируемых генами продуктов. Большинство таких мутаций было обнаружено в результате выделения бактериальных мутантов, у которых способность к транскрипции смежных с промотором генов была либо совсем утрачена, либо находилась на очень низком уровне. Такие мутации называют ослабляющими. Реже обнаруживаются мутации, способствующие транскрипции, инициируемой с промотора. Это так называемые усиливающие мутации. [c.144]

После того как границы промотора уже определены, можно исследовать значение конкретных оснований, вводя точковые мутации или используя другие способы изменения последовательности ДНК. Как и в случае бактериальной РНК-полимеразы, такие мутации можно охарактеризовать как усиливающие или ослабляющие транскрипцию. Некоторые из этих изменений могут сказываться только на скорости инициирования транскрипции, другие могут влиять на ее специфичность, так как приводят к изменению местоположения стартовой точки. Для уверенности в том, что мы имеем дело с молекулами, ко- [c.150]

Влияние мутаций в положении — 35 трудно интерпретировать, поскольку большинство из них возникает в промоторах, для связывания с которыми необходим дополнительный регуляторный фактор. Поэтому вполне возможно, что данная мутация влияет на взаимодействие этого фактора с ДНК, а не на саму РНК-полимеразу (см. далее). Более равномерное распределение мутаций в этой области говорит о том, что существует меньшая концентрация определенных позиций внутри положения — 35 или в ближайшем его окружении, любая из которых более или менее одинаково встречается в других промоторах. [c.146]

Показано, что Ест не требует строгого сохранения последовательностей районов -35 и -10, и поэтому данный основной вариант РНК-полимеразы Е. соН взаимодействует с большим количеством различных промоторов и промотороподобных участков на молекулах ДНК. Разные промоторы функционируют с различной эффективностью. Так называемые сильные (эффективные) промоторы инициируют транскрипцию с высокой частотой. Именно такими промоторами обычно предпочитают манипулировать при проведении генно-инженерных экспериментов. На силу промотора существенно влияют последовательности областей -35 и -10, а также расстояние между ними. Например, выявлена мутация UV5, которая усиливает транскрипцию с промотора лактозного оперона. Секвенирование показало, что мутация затрагивает область -10 промотора и эта область, имеющая в промоторе дикого типа р/дс структуру TATGTT, в pia uvs изменена так, что соответствует наиболее часто встречающейся последовательности ТАТААТ (рис. 3.2). [c.143]

Во многих случаях замечено, что очередность, с которой отдельные промоторы наносятся на основной катализатор или носитель на его поверхности, сильно влияет на каталитическую активность. Количественный состав их один и тот же, но вследствие структурных различий ( изомерные комплексные соединения ) качество таких изо.мерных катализаторов оказывается разным. Это явление так называемой каталитической мутации [22] было впервые обнаружено на нашей кафедре. При.мером может служить каталитическое окисление AsjO кислородом воздуха [23] в присутствии катализатора Си(OH)2/Mn++/Fe +/[Fe( N)6] (табл. 1). [c.386]

Инфекция клеток ретровирусами хотя и не вызывает их гибель, но и не безразлична для них. Провирус инактивирует ген, в который он интегрировался, и может активировать соседний с ним клеточный ген с помощью своего энхансера или транскрипции с промотора, находящегося в правом LTR. Подобная незапрограмми-рованная конститутивная экспрессия клеточного гена может привести к неконтролируемому делению клеток, если продукт гена каким-то образом влияет на их размножение. К такому же эффекту могут привести и мутации в некоторых генах. Подобные измененные гены называют клеточными онкогенами с-опс), а их исходные аллели — протоонкогенами. Онкоген может оказаться и в составе вирусного генома. Вирусные онкогены v-on ) имеют своих гомологов среди клеточных генов, но в отличие от них не содержат интроны. Очевидно, что они произошли от мРНК клеточных (прото)он-когенов, а онкогенные вирусы выступают в этом случае как природные векторы-переносчики генов. У разных вирусов гены v-on внедряются в различные участки вирусного генома (рис. 2.7,г) и часто вызывают их дефектность. Такие вирусы могут размножаться только в присутствии родственных недефектных вирусов. [c.54]

Пока мало изучен вопрос о том, как эффективное выражение генов вектора, не участвующих в его репликации, влияет на уровень экспрессии клонированного чужеродного гена. По крайней мере, в одной из первых работ в этом направлении Н. Панаётатосом (1988 г) было показано, что снижение уровня экспрессии гена устойчивости к антибиотику (kanR) многоко-пийной векторной плазмиды (за счет введения мутаций по промотору этого гена) приводит к двукратному увеличению продукции в Е. соН фактора некроза опухоли человека, ген которого клонирован в этой плазмиде. [c.148]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология