Ионообменник на основе агарозы

ИОНООБМЕННИКИ НА ОСНОВЕ АГАРОЗЫ [c.275]

Фирма Bio-Rad тоже выпускает два слабых ионообменника на основе агарозы DEAE Bio-Gel А и СМ Bio-Gel А . Их главное отличие от агарозных ионообменников фирмы Pharma ia — значительно меньшая емкость 0,02 мэкв/мл по низкомолекулярным ионам и 45 мг/мл по гемоглобину (для обоих типов). Для крупных белков уменьшенная емкость может оказаться предпочтительной. [c.275]

Новый метод разделения белков в соответствии со значениями их изоэлектрических точек (р/) называется хроматофо-кусированием. Белок наносят на колонку с ионообменником на основе агарозы и элюируют буферным раствором сложного состава (полибуфером), pH которого меньше р/ белка. При этом в колонке автоматически формируется линейный градиент pH, и белок концентрируется в той области, где pH. буфера равен р/ белка, т. е. процесс аналогичен изоэлектриче-скому фокусированию (см. разд. 1.5). Компоненты смеси бел-жов элюируется с колонки в порядке уменьшения их р/. [c.20]

Эти ионообменники получают на основе носителей для гель-фильтрации - поперечно-сшитых декстранов (сефадекс) или агароз (сефароза СЬ, биогель А). Они обладают свойствами ионообменников и гель-фильтрующих материалов и гораздо меньшей обменной емкостью к молекулам, превышающим по своим размерам предел эксклюзии ионообменника в условиях эксперимента. Из-за наличия заряженных групп степень набухания таких смол и, следовательно, предел эксклюзии варьируют в зависимости от pH и ионной силы (нехарактерным для гель-фильтрующих материалов образом). [c.437]

Для фракционирования белков используют ионообменники на основе целлюлозы, сшитого декстрана, агарозы с полиакрилатом, реже на основе полиакриламидных гелей. В отдельных случаях хорошие результаты дает хроматография на гидроксиа-патите тонкого зернения, а также в меньшей степени на силикате магния (флорисиле). [c.431]

Ионообменники на модифицированном пористом стекле Gly ophase G заменяют аналогичные ионообменники на основе органических гелей — сефадексов, агароз и т. п. (см. разд. 86, 87). Преимущества таких ионитов обусловлены жесткостью структуры пористого стекла. [c.214]

В соответствии с природой соединений ионообменники делят на две группы неорганические, например разнообразные минералы, и органические, например синтетические смолы причем и те и другие могут быть или природными, или синтетическими. В настоящее время часто пользуются ионообменниками, приготовленными в результате той или иной модификации определенных природных материалов, в частности целлюлозы, полидекстрана. В качестве хроматографического материала наиболее важны органические синтетические ионообменники и ионообменники на основе целлюлозы, полидекстрана и агарозы. [c.223]

Описанный метод получил дальнейшее развитие, и на его основе был разработан прием аффинной хроматографии [122], который сводится к тому, что в буферный раствор добавляют лиганд, изменяющий адсорбционные характеристики. Будь то гидрофобные адсорбенты или агароза, принципы аффинной хроматографии остаются теми же, что и в случае использования более специфических адсорбентов (разд. 4.5) или ионообменников (разд. 4.4). Сначала в отсутствие лиганда находят условия, которых еще не вполне достаточно, чтобы вызвать нужный эффект (в данном случае элюцию). Затем добавляют лиганд, что слегка нарушает установившееся равновесие и приводит к ожидаемому эффекту. Важно, чтобы при добавлении лиганда происходило заметное изменение существенного для очистки свойства, в данном случае — гидрофобного взаимодействия. Лиганд должен сохранять способность связываться с ферментом в условиях, существующих в колонке, т. е. при высокой концентрации соли. Примером аффинного осаждения может служить очистка некоторых тРНК-аминотрансфераз [122] связывание крупной молекулы тРНК приводит к заметному снижению адсорбционной способности колонки, что позволяет осуществлять элюирование. [c.187]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология