Ксантин спектры

Все изученные к настоящему времени субстраты ксантиноксидазы индуцируют появление быстрого сигнала, который представляет собой сложную суперпозицию по крайней мере четырех индивидуальных спектров ЭПР. Интенсивность быстрого сигнала коррелирует с активностью фермента, как это следует из сопоставления активности, спектров ЭПР и оптического поглощения [51], и, следовательно, этот сигнал обусловлен активным ферментом. Восстановление ксантиноксидазы дитионитом, формальдегидом или салициловым альдегидом приводит к появлению идентичных быстрых сигналов, состоящих из двух компонент, указывающих на наличие двух неэквивалентных молибден (У)содержащих центров. Поскольку маловероятно, чтобы дитионит или продукт его окисления связывался с ферментом, было высказано предположение, что эти сигналы обусловлены незакомплексованным активным ферментом и что если фермент содержит два независимых каталитических центра, то химическое окружение атома молибдена в этих центрах неодинаково. В присутствии ксантина в качестве субстрата появляются два сигнала, соответствующие восстановленному активному ферменту при [c.278]

Реакция окисления гипоксантина в ксантин, а последнего—в мочевую кислоту ускоряется ксантиноксидазой—оксидоредуктазой с широким спектром действия, представляющей собой молибденсодержащий флавопротеин. [c.233]

Исследование лигандного окружения атомов металла в ксантин-оксидазе затрудняется тем, что ни Мо, ни Fe не удается обратимо заменить на другие атомы металлов, которые могли бы служить спектроскопическими зондами [9, 33, 34]. Однако нативный фермент поглощает в видимой области. В литературе имеются некоторые разногласия относительно природы хромофорной группы, определяющей это поглощение, но, по-видимому, все исследователи согласны в том, что поглощение определяется не молибденсодержащим компонентом. Имеется сообщение о том, что ксантиноксидаза, в значительной мере очищенная от железа (до 0,3 г-атом Fe на 1 моль белка), характеризуется спектром поглощения, почти совпадающим с таковым для исходного фермента [35]. Сходство в спектрах поглощения, кругового дихроизма и дисперсии оптического вращения ксантиноксидазы и ферредоксина шпината (рис. 36) привело к заключению, что оба фермента содержат одинаковые хромофоры, а именно серусодержащие комплексы железа. Более высокая интенсивность поглощения ксантиноксидазы может рассматриваться как следствие того, что в ее молекуле содержится восемь атомов железа, тогда как в молекуле ферредоксина шпината имеются только два атома железа. Методом ЭПР показано, что в ксантиноксидазе, инактивированной метанолом, молибден находится в состоянии Mo(V). Окисленный фермент в активном состоянии, вероятно, содержит Mo(VI). Можно было бы ожидать различий в оптических спектрах активного и неактивного фермента, определяемых перехо- [c.274]

Рис. 38. Спектры ЭПР Мо(У) восстановленной ксантиноксидазы. а —сочень быстрый сигнал (в ранних источниках обозначался также как сигнал -(5 фермент, обогащенный Мо и восстановленный ксантином, при pH 10 в течение 10 мс) б —сочень быстрый сигнал (нативный фермент условия восстановления, как в случае а) в — быстрый сигнал (в ранних источниках обозначался также как сигнал оср нативный фермент, восстановленный дитионитом, при рн 8,2 в течение 1 с) г—смед-ленный сигнал (фермент, восстановленный дитионитом, при pH 8.2 в течение 30 мин или неактивный фермент) а — подавленный сигнал (фермент диализовали против аэрированного 1 М метанола, содержащего салициловый альдегид, в течениеиескольких дней при 5 С).

Ультрафиолетовые спектры поглощения ксантозина отличны от спектров 7-метилксантина (а также от спектров 1- или З-метил-ксантина) и они довольно близки к спектрам 9-метилзамещенных ксантина. Аналогично ультрафиолетовые спектры поглощения аденозина, инозина и гуанозина очень близки к спектрам 9-метил-аденина, 9-метилгипоксантина и 9-метилгуанина соответственно, но не похожи на спектры 7-метилпроизводных [30—32]. Эти результаты ясно показывают, что пуриновые нуклеозиды представляют собой 9-рибозилпурины это справедливо также для дезоксиаденозина и дезоксигуанозина, так как ультрафиолетовые спектры этих веществ почти идентичны со спектрами аденозина и гуанозина. Подтверждением того, что в пуриновых нуклеозидах сахар находится в положении 9, служит однозначный синтез 9-0-манно-пиранозиладенина, проведенный Тоддом с сотрудниками [33]. При периодатном окислении этого нуклеозида образуется диальдегид, идентичный диальдегиду, полученному из аденозина. [c.18]

Более широкий спектр транзиций, по сравнению с рассмотренными вьыпе мутагенами, дает азотистая кислота. Она дезаминирует цитозин до урацила, аденин до гипоксантина и гуанин до ксантина (см. рис. 6.7). В ДНК спаривание урацила с аденином приводит к тран-зиции G -> ТА. Особенности спаривания гипоксантина таковы, что он может вызывать тран-зицию АТ -> ОС. Ксантин не обусловливает мутаций. Он является бессмысленным основанием, которое не комплементарно обоим пири-мидинам, и, следовательно, его появление в молекуле ДНК должно оказывать летальное, а не мутагенное действие. [c.180]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология