Аффинные меченые, определение по радиоактивности

Измерение радиоактивности. Радиоактивно меченные образцы могут быть определены с высокой чувствительностью. Так, когда контроль элюирования по другим характерным для данной молекулы активностям недостаточно чувствителен, введение радиоактивной метки (радиоактивного изотопа) дает возможность определения небольших количеств подвижного компонента, с которыми и имеют дело в аффинной хроматографии с зональным элюированием (см. разд. 2 или 3,1). Определение радиоактивности меченных образцов является прямым методом. При использовании углерода-14 и трития в качестве радиоактивных меток измерение радиоактивности проводят на сцинтилляционном счетчике измеряемые образцы готовят путем смешивания определенной аликвоты жидкого сцинтиллятора с соответствующим количеством (для достижения равного гашения компонентами буфера) каждой фракции элюата. Введение в хроматографическую систему сцинтилляционного счетчика дает возможность исключить необходимость отбора образцов, хотя по крайней мере для существующих приборов чувствительность детектирования при этом уменьшается. [c.232]

В этой работе интересно отметить подбор оптимального соотношения количества аффинного сорбента и белкового раствора. Недостаток сорбента, естественно, ведет к неполной экстракции рецептора, а избыток затрудняет конкурентную элюцию свободным гормоном и требует использования повышенной концентрации дорогостоящего препарата. Подбор вели титрованием к определенному количеству экстракта добавляли порциями сорбент, комплекс его с рецептором удаляли центрифугированием и следили за убылью рецептора в супернатанте по связыванию им радиоактивного гормона (детектирование на тех же фпльтрах). В результате такого подбора элюцию удавалось осуществлять меченым гормоном в указанной выше, очень малой концентрации. График элюции показан на рис. 147. [c.433]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология