Сборники фракций элюата

Нативный раствор пропускают через первую колонну до момента, когда на выходе из нее концентрация стрептомицина достигнет 100 мкг/мл. Затем к первой колонне подключают последовательно вторую, затем третью и т. д. После насыщения катионита в первой колонне (когда концентрация стрептомицина на выходе достигает 90—95%) ее переключают на промывку умягченной водой и далее — щелочным раствором (pH 9,0) стрептомицина и трилона Б или триполифосфата для удаления ионов магния и дополнительного поглощения антибиотика из мелкоактивных головных фракций элюата (см. ниже). После этого антибиотик десорбируют 1 н. водным раствором серной кислоты из сборника 7. Головные фракции элюата с низкой концентрацией стрептомицина собирают в коробке 8, подщелачивают, добавляют комплексон (трилон Б или триполифосфат) и через сборник 9 подают на колонну для дополнительной сорбции стрептомицина. [c.310]

СБОРНИКИ ФРАКЦИЙ ЭЛЮАТА [c.196]

В детектор элюата составляло 6—7% от общего объема элюата при скорости истечения жидкости 1 мл/мин. Сборник фракций был отрегулирован для отбора фракций каждые 10 мин. [c.232]

На рис. 4.1 показан вращающийся распределительный кран, который часто используют для отбора фракций. Элюат из колонки входит в точке А в неподвижный корпус 3 этого крана и через один из вертикальных каналов, имеющихся в этом корпусе, его можно направить в любой из сосудов 4. Соединение между А и Б осуществляется через радиальный желоб в тефлоновом уплотнителе 2. Этот уплотнитель жестко прикреплен к телу /, которое может поворачиваться мотором. При использовании, например, восьми сосудов 4 минимальный угол поворота тела 1 для смены сосудов равен 45°. Между каждой парой сосудов для улавливания разделенных компонентов необходим еще один сборник для от- [c.154]

Начинать хроматографирование следует наименее полярным растворителем, обычно петролейным эфиром. Скорость отбора фракций зависит от типа и масштаба хроматографического процесса. Обычно скорость течения, измеренная в мл/ч, должна быть численно равна массе (г) использованного адсорбента. Большинство адсорбентов не затрудняет течение элюента по колонке. При применении некоторых особо тонкодисперсных адсорбентов, например оксида магния, может потребоваться введение вспомогательного фильтра, например кизельгурового. Для отбора элюата пригодны сборники фракций любого типа (см. гл. 8). Объем одной фракции устанавливают в соответствии с характером задачи и регулируют или с помощью переключателя с часовым механизмом при сборнике фракций, или путем изменения (притом только уменьшения) скорости потока элюента. Отобранные в течение определенных интервалов фракции анализируют методами ТСХ или ГЖХ, разработанными для данной методики разделения, и объединяют идентичные по составу фракции. Из объединенных фракций отгоняют растворитель посредством обычной или вакуумной перегонки в роторном испарителе при низкой температуре. Элюирование продолжают до тех пор, пока не перестанет элюироваться хроматографируемая проба. После этого элюирующую способность смеси увеличивают, повышая содержание более полярного компонента системы, который подают или в несколько порций, или постепенно (градиентное элюирование описание аппаратуры для градиентного элюирования см. в разд. 8.4 или в работе [45а]). Основное преимущество градиентного элюирования — это подавление образования хвостов сильно адсорбируемых [c.196]

НЫЙ объем отбираемых фракций может быть меньше, например 0,5—1 мл. Максимальный объем фракций определяется объемом фракций и обычно не превышает 0,25—1 л. Для разделения очень больших проб сборник фракций нужно специально переделывать (разд. 8.6). Чаще всего работают с фракциями объемом 5—20 мл, которые легко отбирать с помощью почти всех известных автоматических сборников фракций. Обычно элюент делят на 30—200 фракций в зависимости от сложности разделяемой смеси. Делить элюат на слишком большое число фракций не имеет смысла, однако при малом числе фракций хорошо разделенные компоненты могут перемешиваться. [c.281]

В современных лабораториях, собирая элюат, делят его на много маленьких порций. Этот процесс осуществляется автоматически с помощью специальных коллекторов, которые управляются либо по числу падающих в сборник капель (с помощью фотоэлемента), либо по объему собираемой фракции. [c.104]

Превышает 1%- Для полного фракционирования 100 г полимера требуется 10 л раствора. Система ввода образца автоматическая (используется таймер). Как правило, для введения образца используют систему петельного типа. Сбор фракций обычно осуществляется с помощью установленных электронных реле через клапан с рядом отверстий элюат отводится в отдельные сборники. Отделение полимера от большого количества растворителя осуществляют с помощью вакуумного роторного испарителя, сконструированного таким образом, что в атмосфере азота в него непрерывно поступают новые порции фракционированного раствора. Для регенерации растворителя испаритель соединяют с холодильником, [c.69]

В современных лабораториях элюат собирают в виде большого числа маленьких порций. Этот процесс осуществляют автоматически с помощью специальных коллекторов, в которых либо производится подсчет числа капающих в сборник капель (с помощью фотоэлемента), либо для управления аппаратом используется объем собираемой фракции. [c.83]

Сборники с постоянными интервалами времени просты по устройству, надежны в работе и вполне достаточны для вынолнения большинства аналитических разделений. Главное возражение, которое может быть выдвинуто против сборников этого типа, состоит в том, что объем фракций изменяется с изменением скорости протекания раствора. При разделениях, в которых трудно поддерживать постоянство скорости протекания, лучше пользоваться насосом, обеспечивающим постоянную скорость подачи элюента, чем применять сложные устройства, гарантирующие сбор равных фракций элюата независимо от изменения скорости протекания. В большинстве сборников с равными интервалами времени приемнпки помещаются в отверстиях или гнездах, расположенных по периферии поворотного столика, который через онределенные промежутки времени поворачивается таким образом, что каждый приемник но очереди оказывается под выпускным отверстием колонки. Повороты обычно осуществляются с помощью груза, висящего на нити, которая обвязана вокруг обода, жестко соединенного с поворотным столиком. Повороты регулируются электромагнитом, действующим от часового механизма или реле времени. Полное онисапие устройства этого тина приводят Шредер и Корей [103 ]. Другой простой сборник фракций описан Зандом и Ситроном [138] движущийся поворотный столик позволяет собирать большое число фракций элюата (рис. 10. И). [c.197]

При использовании для идентификации загрязняющих веществ таких комбинаций, как ТСХ/ГХ, ТСХ/ИК, ТСХ/МС и др., разделенные вещества извлекают из сорбента на пластинке (см. выше). Однако возможен и непрерывный отбор элюата из ТСХ-системы, его испарение и последующий анализ методом газовой хроматографии. Схема такой комбинации представлена на рис. П.45. Элюат, отобранный из центра ТСХ-пластинки (6), испаряется в сборник фракций (8) за счет разряжения, создаваемого водоструйным насосом (12), подключенным к коллектору фракций через моностат. При анализе в этой системе линдана (популярный пестицид) одновременно происходит его концентрирование в 50 раз. Далее собранный линдан поступает из коллектора (8) в колонку газового хроматографа с ЭЗД (см. главу I). Этим методом можно надежно идентифицировать и опре- [c.192]

Колонка из нержавеющей стали, диаметр (внутр.) 1,75 мм ионит — дуррум D -A4 (8 мкм) проба—10 нмоль смеси буферный раствор очищали, пропуская череа аммиачный фильтр, и пропускали через колонку равномерным потоком со скоростью 6—10 мл/ч давление 83,5 атм. Результаты измерения поглощения элюата обрабатывали на ЭВМ PDP/8 с выводом результатов в цифровой и графической форме. ЭВМ осуществляла также управление всей установкой. Анализатор был оборудован охлаждаемым сборником фракций, рассчитанным на 80 фракций, которые отбарались автоматически. Один анализ, представленный на рисунке, длился 42 мин. На оси абсцисс показано отношение поглощения при 570 нм (аналитическая величина) к поглощению при 690 нм (сравнительная [c.311]

Джонс [88] подробно описал установку для хроматографического анализа пептидов, пригодную как для препаративного (/ 100 мг), так и для аналитического (0,1—1 мг смеси пептидов) разделения. При работе на этой установке щелочной гидролиз не проводится. Эту методику называют прямым методом нингидриновой колориметрии , поскольку в ней используется модифицированный [67, 150] аминокислотный анализатор Спакмана с сотр. [186], который можно непосредственно применять для автоматической хроматографии пептидов [89]. В установке можно использовать блоки различных автоматических анализаторов заводского изготовления. Разделение ведется методом градиентного элюирования. Элюат делится на две части, большая часть направляется в сборник фракций, а [c.313]

Элюат, отобранный пз центра круговой ТСХ-пластинки, испаряли в сборник фракций за счет разрежения, создаваемого водоструйным насосом, подключенным к коллектору фракций через моностат (рис. VIII.1). Скорость движения элюата по пластинке составляла определенный период, примерно 1 см/мин, а объемная скорость отбора жидкой фазы из слоя сорбента равна 0,1 [c.150]

Далее собирают 4 фракции элюата в гуммированные стальные коробки, в каждой из которых находится змеевик для рассольного охлаждения. Первая фракция — элюат с активностью до 3000 MKzjMA. Активность определяют на выходе из колонны. Вторая фракция — элюат с активностью от 3000 до 4000 мкг/мл. При сборе второй фракции нужно внимательно следить за подачей буферного раствора, так как перерыв в подаче может вызвать выпадение осадка окситетрациклина на катионите, что затормозит прохождение буфера и вызовет потери продукта. Третья фракция — элюат с активностью на выходе яз колонны 4000—5000 мкг/мл, четвертая — с активностью 400—500 мкг/мл. Первую и четвертую фракции собирают в один сборник и передают на повторную сорбцию. Вторую и третью фракции передают на осаждение основания окситетрациклина. [c.107]

Разделение фосфорных эфиров тиамина. Эту операцию осуществляют при помощи катионитной хроматографии. Очищенный раствор фосфорных эс[)иров через мерник 16 пропускают через колонну 17, заполненную катионитом КБ-1 в Н-форме. Элюируют ТТФ и ТДФ водой, а ТМФ — 5%-ным раствором ортофосфорной кислоты. Элюаты направляют в сборники соответственно 18, 19 и 20. Состав фракций контролируют хроматографией на бумаге. [c.102]

Ионы NHJ в растворе аммиака не вытесняют катионы со смолы, поэтому элюаты содержат незначительные количества примесей минеральных солей При этом образуются 3 фракции, из которых первая с небольшим содержанием канамицина (8) поступает на очистку стоков, вторую фракцию — основную собирают в сборнике (9), третью фракцию из сборника (10) возвращают для десорбции канамицина с сорбента [c.340]

ХАвтоматизированную систему для серийных анализов ферментов можно применять и в колоночной хроматографии [47]. Схема прибора для обнаружения ферментов в элюатах приведена на рис. 36.2 [48, 49]. В этом приборе роль коллектора фракций выполняет сборник образцов. При помощи пробоотборников фермент и субстрат подаются в нужной пропорции в смеситель. На выходе из смесителя поток рассекается пузырьками воздуха на равные части и поступает в спираль, погруженную в реакционную баню. После смешивания с реагентом, останавливающим ферментативную реакцию, раствор поступает в деаэратор, а за- [c.12]

Первый автоматический сборник элюата, описанный Моором и Штейном [112], был основан на сборе фракций, состоящих из [c.198]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология