Элюирование контроль

Ацетонитрил имеет ряд преимуществ перед метанолом. При хорошей очистке он лучше пропускает в ближнем ультрафиолетовом диапазоне (ниже 210 нм) и позволяет работать в смеси вода — ацетонитрил при 200 и даже 190 нм. Он обычно обладает лучшими растворяющими свойствами для проб, чем метанол. При использовании смесей метанол — вода вязкость такой смеси не является аддитивной величиной (так же как и для смесей ацетонитрил — вода) и при 25 С меняется от 0,89 и 0,57 МПа с (для чистых воды и метанола соответственно) до 1,4 (цифры для смеси ацетонитрил — вода соответственно 0,89, 0,43 и 0,98). Большая вязкость смесей метанол — вода по сравнению со смесями ацетонитрил — вода (почти в 1,5 раза) затрудняет использование колонок, заполненных частицами сорбента размером 3 и 5 мкм, при использовании водно-метанольных смесей. Точно также при градиентном элюировании колонки, работающие с системой метанол — вода, подвергаются при равном расходе действию больших давлений и быстрее выходят из строя. Наконец, не малую роль играет и то обстоятельство, что метанол относится к группе особо опасных ядов, находящихся на строгом контроле и учете, тогда как ацетонитрил к этой группе не относится. [c.29]

По охлаждении желтый осадок обрабатывают эфиром (4 х 40 мл) при слабом нагревании (остается сера) объединенные декантаты концентрируют в вакууме, в результате чего получают 5,60 г желтоватого твердого продукта, который очищают хроматографированием на колонке (150 г силикагеля, элюирование эфиром). При этом отделяется незначительное количество серы. Из элюата получают 4,82 г (84%) продукта с т. пл. 56-57 °С (контроль по ТСХ силикагель, эфир). При перекристаллизации из н-гексана продукт выделяется в виде бесцветных игл с т. пл. 59-60 С. [c.204]

Если имеется необходимость предварительного кондиционирования слоя (т.е. контроля активности), приходится прибегнуть к непрерывному элюированию. Многократное кондиционирование между каждым из этапов привело бы к слишком большим затратам времени. Ни непрерывное элюирование, ни обычный метод многократного элюирования не пригодны [c.250]

Камеры для элюирования с контролем влажности [c.345]

На этой диаграмме А, В и С — три различных элюента. Их можно смешивать в любой пропорции, получая смесь, элюирующая способность которой меняется в результате изменения концентрации, ионной силы, pH, полярности и т. д. Это основной принцип градиентного элюирования. В смесительном узле осуществляется контроль за концентрацией (или другими перечисленными выше характеристиками) подвижной жидкой фазы, поступающей в колонку. Регулятор давления обеспечивает создание высокого давления на входе в колонку или снижение давления на выходе из нее. Благодаря контролю за температурой работа колонки ведется в изотермическом режиме или в режиме запрограммированного изменения температуры, предусматривающего изменение температуры колонки во времени или создание различного типа температурных градиентов вдоль колонки. [c.61]

ВЫСОКОЙ концентрацией аффинного лиганда является слишком сильное взаимодействие с выделяемым вешеством, что затрудняет его элюирование. Так, например, тщательный контроль концентрации лиганда имеет решающее значение для выделения глюкокиназы на агарозе со связанной N-(6-аминогексил)-2-амино-2-дез-оксн-D-глюкопиранозой [14] (рис. 5.6). [c.81]

Контроль за проскоком Ge из генератора, величина которого не превышала 10 -10 % в болюсе (объём элюента при однократном элюировании дочернего изотопа), показал, что при ежедневной работе, генератор может служить для получения качественного препарата Ga в течение года. [c.347]

При таком методе получения триэфиров в реакционной смеси всегда остается небольшое количество непрореагировавших исходных диэфиров, от которых обычной фракционированной разгонной в вакууме освободиться невозможно. Триэфиры очищали пропусканием через хроматографическую колонку с окисью алюминия, элюирование проводили петролейным эфиром. Контроль за разделением веществ осуществляли тонкослойной хроматографией на пластинках с закрепленной АГ Оз. Полученные триэфиры оказались [c.51]

Хотя селективность разделения зависит в основном от выбора неподвижной фазы, контроль и желательное изменение коэффициентов разделения достигается выбором рабочей температуры (см. рис. 24-4). При анализе проб, компоненты которых имеют широкий интервал температур кипения, применяют методику температурного программирования (см. разд. 24-7), которая играет такую же роль, как градиентное элюирование в жидкостной хромато-гра( )ии. [c.558]

Следует отметить, что способность к комплексообразованию трехвалентных актинидных элементов увеличивается с возрастанием атомного номера, что создает возмон<пость при тщательном контроле условий элюирования осуществить их разделение. [c.469]

Рефрактометрический контроль не сочетается с градиентным элюированием. [c.183]

Выбор методики анализа фракций определяется природой анализируемого материала причем выбрать методику анализа, а в некоторых случаях и испытать необходимо перед началом хроматографирования. Применяют физические, химические и биологические методики. Чаще всего измеряют показатель преломления. Пользуются также различными колориметрическими методами, а также тонкослойной или бумажной хроматографией и электрофорезом. Идеальным способом является детектирование радиоактивных изотопов. Измеряя pH и электропроводность отбираемых фракций, можно контролировать условия элюирования. Именно такой контроль позволяет воспроизводить условия градиентного элюирования. В ряде случаев очень полезно комбинировать несколько методов детектирования. Полезны также непрерывное автоматическое детектирование (с достаточно высокой чувствительностью) разделенных соединений и регистрация хроматограмм (см. разд. 8.6, 8.7). Результаты измерений записывают в виде кривой зависимости измеряемой величины от объема элюата или номера фракции. Исходя из распределения пиков на хроматограмме некоторые фракции можно объединить. При этом необходимо следить, чтобы объединялись совершенно чистые фракции, не содержащие примесей других компонентов, иначе потребуется повторное хроматографирование. Фракции, предназначенные для количественных анализов, хранят в темноте и на холоду с тем, чтобы не допустить нежелательных реакций. Фракции соединений, окисляющихся на воздухе или поглощающих диоксид углерода, следует хранить в герметически закрытых сосудах. [c.281]

Пятна вырезали и помещали на 24 ч в 0,1 н. раствор КаОН для элюирования соединений. После центрифугирования определяли величину переноса в процентах при 400 ммк по сравнению с контролем, приготовленным из фильтровальной бумаги и щелочи. Этот метод можно использовать при определении и идентификации паратиона, метилпаратиона и ЕРМ. [c.83]

Большую роль в повышении эффективности фракционирования слоншых смесей сыграло создание жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД). Высокая скорость разделения, возмож ность реализации любого из отмеченных выше механизмов сорбции, применимость для разделения любых растворимых в элюенте соединений, независимо от их молекулярной массы, возможность непрерывного контроля элюирования с помош ью высокочувствительных детекторов, управления процессом разделения путем программирования температуры, скорости потока и состава элю-ента, автоматическая регистрация результатов обеспетали широчайшее распространение ШХВД для решения препаративных задач, количественного анализа и идентификации компонентов анализируемых смесей [109, 111, 122 и др.]. [c.17]

Хроматограмму после высушиванкя просматривают в УФ свете, отмечают на хроматограмме зону, соответствующую берберину, и соскабливают этот участок сорбента скальпелем а колбу вместимостью 25 мл, Берберин 4 раза элюируют 0,1 рь при нагревании в течение 1 мин на водяной бане. Кислоту отмеряют с помощью бюретки первый раз 4 мл, а затем три раза по 2 мл. Полноту элюирования определяют по отсутствию флюоресценции силикагеля в УФ свете. Элюат каждый раз сливают декантацией в другую колбу вместимостью 25 мл. Для удаления следов силикагеля обт единенный элюат центрифугируют в течение 5 мин (1000 об/мин). Оптическою плотность элюата измеряют на спектрофотометре СФ-4А на фоне контроля при длине волны 345 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Контролем служит элюат чистого силикагеля с той же пластинки, снятый с площади, равной площади пятна берберина. Процентное содержание берберина в образце х рассчитывают на абсолютно сухую массу сырья в пересчете на бисульфат берберина [c.161]

Затем прикапывают 40 мл 20%-ного раствора Kj Oj, смесь фильтруют и экстрагируют фильтрат н-гексаном. Гексановый экстракт промывают водой, высушивают над N33804 и отгоняют растворитель в вакууме. Оставшееся желтое масло хроматографируют на силикагеле (150 г, фракция с размером зерен 0,06-0,2 мм). Элюирование н-гексаном дает 1,6 г (91%) углеводородного вещества (однородного по данным ТСХ), представляющего собой желтое масло, которое после растирания или выдерживания 14 ч при О С закристаллизовывается. Перекристаллизация из небольшого количества изопропанола дает 1,05 г (60%) продукта в виде бесцветных игл с т. пл. 87-91 С (контроль по ТСХ силикагель, н-гексан). [c.247]

Данный способ получения суммы гликозидов отличается сокращением времени экстракции, проведением её в более мягких условиях осуществлением процесса очистки хроматографическим методом, исключающим стадию осаждения смол с примепепием более эффективного сорбента и оптимально подобрапой системы для элюирования. Такие условия хроматографической очистки и использовапие удобного метода ТСХ-контроля позволили значительно сократить время элюирования. [c.172]

В области разделения малых молекул с помощью аналитической ЖХ градиентное элюирование стало ценным средством при исследовании сложных смесей или групп соединений с неизмеримой хроматографической полярностью. Успехи приборостроения, в частности создание систем подачи растворителя и систем смешения, совершенствование конструкции детекторов, а также контроль работы приборов на основе микропроцессоров сделали возможным высокий уровень воспроизводимости в схемах разделения с непрерывным градиентом. Микропрепаративное ЖХ-разделение, выполняемое на аналитическом оборудовании, может реализовать эти возможности. Однако при переходе в область препаративной и макропрепаративной хроматографии значительно уменьшаются возможности создания сложных градиентов и контрольных устройств, пригодных для работы с большими объемами и высокими скоростями подвижной фазы, которые бы воспроизводили точно градиенты, характерные при работе с аналитическими приборами. В таких ситуациях обычно рекомендуют использовать подходящую последовательность изокра-тического и ступенчатого градиентного элюирования, если оно вообще возможно (см. разд. 1.6.2.2.5). Выгоды такого подхода [c.67]

Относительная влажность как регулятор активности 331 Что такое "относительная влажность" 331 Изотермы адсорбции воды 332 Скорость трансактивации 336 Установление относительной влажности 342 Зависимость относительной влажности над водными растворами от температуры 345 Камеры для элюирования с контролем влажности 345 Практическое значение параметра активности слоя 348 [c.9]

Надежный контроль активности до элюирования и во время него, воспроизводение величин активности возможно только в камерах для [c.338]

Элюат упаривают до 30 см , вводят 30 см концентрированной HNO3 и выпаривают досуха. В остатке определяют Sr. Ошибка определения составляет 1% при соотношении Sr a около 200. Вместо смолы Dowex 50 можно использовать Amberlite 1R-120. При разделении необходим точный контроль концентрации ионов NH - и pH как на стадии сорбции, так и на стадии элюирования. [c.182]

Для устранения указанных недостатков нами сейчас проводится работа по применению метода к анализу всего битума с разделением ароматики на 3 группы и элюированием асфальтенов. Накопление же фракций может быть осуществлено препаративным вариантом метода. Следует отметить, что экспресс-ность метода позволит использовать его в будущем как средство оперативного контроля в процессе производства битума. [c.85]

Колонки и детекторы контроль потока подвижной фазы. Для гель-фильтрационной хроматографии с использованием декстрановых гелей обычно применяют простые стеклянные колонки диаметром 2,5 см и длиной 50 см. В таких колонках Уо равен от 50 до 100 мл, а (Уо Уг) —от 200 до 250 мл. Раствор пробы массой несколько миллиграммов вводят в колонку через ее верхнюю часть. Обнаружение зон растворенных веществ по мере их появления из колонки можно проводить посредством спектрофотометрического контроля элюата, измерением его показателя преломления или собирая аликвотные части для дальнейшего анализа. Подвижной фазе позволяют протекать через гeль-ф,ильтpaциoн yю колонну иод действием силы тяжести со скоростью около 3,5 мл/ч на каждый квадратный сантиметр сечения колонки. Так, для колонки диаметром 2,5 см скорость потока равна приблизительно 16 мл/ч, а время, необходимое для элюирования самых малых молекул, составляет около 16 ч. Большая скорость элюирования недопустима, так как мягкий гель деформируется потоком подвижной фазы и колонка выходит из строя (гель выдавливается или же спрессовывается и закупоривает колонку). [c.598]

В стеклянную ампулу (70 мл) с широким горлом загружают 0,01— 0,10 г катализатора и раствор 1,0—1,6 г I—III в 8—12 мл абсолютного этанола. Ампулу помещают во вращающийся автоклав (120 мл) из нержавеющей стали, снабженный термопарой, карман которой погружен в раствор. Автоклав заполняют водородом и в течение 30 мин при перемешивании нагревают до температуры опыта. Время реакции отсчитывают по достижении температуры опыта. После охлаждения катализатор отфильтровыгвают и промывают спиртом. Продукты реакции перегоняют в вакууме и хроматографируют на колонке (Н=1,2 м, (1 = = 1,8 см, АЬОз второй степени активности). Для элюирования вначале используют петролейный эфир, а затем петролейный эфир с добавкой на каждые 100 мл его соответственно 5, 10, 15, 20 и 25 мл диэтилового эфира. Контроль за отделением пиперидинов IV—VI от исходных I— III проводят с помощью тонкослойной хроматографии на той же окиси алюминия (эфир—петролейный эфир 1 2) для I—III 0,52— 0,55 для IV—VI Rf 0,26—0,28. [c.364]

Разделение многоатомных спиртав (ксилитов, глицерина и этиленгликоля) проводили методом колоночной хроматографии на катионообменной смоле (Ки-2) с применением воды для элюирования [22]. На колонке, наполненной дауэксом 50-Х 12 (200—400 меш) или КН-2 со степенью сшивки 12%, разделяли смесь многоатомных спиртов. В качестве подвижной фазы использовалась вода при температуре 60 °С. Компоненты элюировались в следующем порядке ксилит, эритрит, глицерин, этилен-гликоль и пропандиол-1,2. Разделение занимает 24—26 ч. Фракции анализировали на рефрактометре Аббе или колориметрически после окисления бихроматом. Наилучшие результаты разделения были получены в случае, если использовали ионооб-менники в Н+-форме. На ионообменниках в Са +-форме наблюдается изменение в последовательности элюирования. Так, ксилит сорбируется на таких обменниках селективно и, следовательно, элюируется последним. Было также предложено разделение малых количеств ксилита и этиленгликоля на катионооб-менниках со свободным Н+. Этот метод можно использовать для аналитического контроля при крупнотоннажном гидролизе сахаров и многоатомных спиртов. [c.31]

Обработку фракций проводят в штативах, рассчитанных на 50 пробирок. В каждый штатив помещают также пробирки со стандартными и контрольным растворами. К 2 мл анализируемого раствора автоматической пипеткой добавляют 1 мл нингидринового реагента и тщательно перемешивают. Затем штатив с пробирками помещают на 20 мин в кипящую водяную баню (100°С) и охлаждают в бане с проточной водой в течение 5 мий. Автоматической пипеткой в каждую пробирку вводят по 5 мл 60%-ного этанола и тщательно перемешивают пробирки выдерживают при комнатной температуре 1 ч, в течение которого в результате окисления кислородом воздуха исчезает красная окраска гидридантина. Наконец, определяют оптическую плотность при 570 нм, а фракции, содержащие пролин и оксипролин, анализируют при 440 нм. В качестве контроля (фона) используют среднюю величину оптической плотности, полученную при аналогичной обработке фракций, не содержащих аминокислот. Важно в процессе измерения проводить сравнение с контрольным раствором, содержащим буфер аналогичного состава. При градиентном элюировании наблюдается постепенное увеличение фона вследствие накопления в буфере нингидринположительных примесей. В этом случае в качестве контрольного раствора еле- [c.314]

Следующее важное условие состоит в том, что хелат должен быть термически устойчивым, особенно если он обладает низкой летучестью поэтому требует высокой рабочей температуры (колонки. Для достижения хорошей воспроизводимости значений времени удерживания, жоторое представляет собой период времени от. вюедения образца в колонку до появления максимума пика яа кривой элюирования, условия опыта должны быть подобраны таким образом, чтобы яе происходило разложения хелата. Одним из путей предотвращения этого является наблюдение за полостью ввода образца с целью обнаружения возможного нелетучего остатка. Другой способ контроля заключается в анализе элюируемых компонентов. Хелатирующий агент должен подбираться с учетом чувствительности применяемого детектора. Например, в случае использования электронозахватяого детектора его чувствительность значительно повышается, если в состав молекулы реагента входит по крайней мере один атом галогена. Применение детектора, снабженного счетчиком радиоактивности, позволяет использовать реагенты, меченные радиоактивными изотопами. [c.240]

Количественное определение аминокислот по интенсивности окраски медных производных аминокислот с нингидрином проводят следующим образом. Хроматограммы обрабатывают 0,5%-ным раствором нингидрина в 95%-ном ацетоне, содержащим 1% уксусной кислоты. Для хроматограмм, у которых растворителем служил фенол в фосфатном буфере, концентрацию уксусной кислоты повышают до 3%. Обработанные хроматограммы выдерживают над серной кислотой и глицерином в течение 16 часов при комнатной температуре. После этого окрашенные пятна аминокислот вырезают из хроматограмм и кладут в пробирки. В каждую пробирку наливают по 8 мл 75 /о-ного этилового спирта, насыщенного Си504 бИаО. Пробирки выдерживают в течение 1 часа в темноте и затем растворы колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЭК-М против контроля. При ко-лориметрировании растворов, элюированных из хроматограмм, у которых одним из растворителей служил бутиловый спирт, используют синий светофильтр, а при использовании в качестве растворителя фенола в фосфатном буфере (pH 12,0) более точные результаты получаются с зеленым светофильтром. Оптическую плотность растворов определяют по сравнению с контролем. [c.43]

Скорость элюирования полимера из фракционирующей колонки — важный фактор, обусловливающий высокое разрешение при фракционировании. Однако и в этом случае, как и для многих других аспектов фракционирования полимеров, можно сформулировать лишь общие положения, а не абсолютные правила. Концентрация полимера в выходящем из колонки растворе долн на быть далека от точки насыщения. Сделанное Флори [1] предположение о том, что максимальная концентрация должна быть пропорциональна степени полимеризации в степени — /2, нашло качественное подтверждение [3]. Гиллет с сотр. [38], используя метод хроматографии, нашел оптимальную скорость потока, причем, оказалось, что те же предположения Флори справедливы и для градиентного элюирования. При слишком высокой скорости потока фракционирование проходит недостаточно полно, вероятно, в результате низкой скорости диффузии. При слишком низкой скорости потока процесс фракционировапия может осложняться обратной диффузией. Оптимальную скорость потока следует определять для каждой системы полимер — растворитель, и в процессе фракционирования мончет оказаться, что для улучшения разделения следует изменять скорость потока через колонку. В колонках с обратным направлением потока легче осуществлять контроль за скоростью потока, чем в колонках, где поток жидкости обусловлен силой тяжести [4]. Гернерт с сотр. [39] описали регулятор скорости потока, который может изменять скорость в широком диапазоне и способен компенсировать через каждые 3 мин случайные изменения скорости потока, достигающие 10%. В принципе при аналитическом фракционировании (1—2 г) полимеров удовлетворительные результаты можно получить при скоростях элюирования 2—6 мл/мин [4, 37, 38, 41, 42]. Такие скорости элюирования можно, вероятно, принять в качестве исходных при работе с новой системой полимер — растворитель. При препаративном фракционировании скорости элюирования, очевидно, следует соответственно изменить. [c.79]

Выделяющийся азот определяли на колонке с молекулярными ситами NaX, чувствительность определения 5-10-5 г.. Метод с успехом использовали для контроля ряда технологических процессов производства азотных удобрений. Этим же методом Дженкинс и др. [181] определяли содержание NH3 в водных растворах, причем анализу не мешало присутствие метиламина, гидроксилами-на и ацетамида, а Дидрих [182] превращал NH3 в N2 в реакторе с нагретой до 700 °С платиной. Азот хроматографировали при 30 °С на колонке с ситами 5А. Для разделения смесей аммиака с алифатическими аминами Петров и Долгина [183] связывали NH3 в комплексное соединение состава (NH4)2Na[ 0(N02)6], пропуская аммиак через колонку с триэтаноламином и гексакобаль-тинитритом натрия, применяемыми в качестве неподвижной фазы. При щелочном характере насадки и достаточно высокой температуре (94 °С) образование этого непрочного комплекса задерживает элюирование NH3 и отделяет его от триэтиламина, от которого аммиак не отделяется на колонке с одним триэтаноламином. С помощью катарометра можно определить около Ю- % NH3 с ошибкой 9%, если в качестве газа-носителя применить аргон. [c.93]

Количественную хроматографию на бумаге проводят двумя способами с разрезанием хроматограмм на части и на целых хроматограммах. В первом случае возможны два варианта всю хроматограмму разрезают на небольшие прямоугольники стандартного размера, которые затем отдельно помещают на агаровую пластинку, засеянную тест-микробом. Одновременно на эту же пластинку помещают контрольные куски хроматографической бумаги такого же размера, на которые нанесен стандартный антибиотик в известных количествах. Сравнивая размер зон подавления в опыте и контроле, можно определить содержание антибиотика в различных участках хроматограммы. Такой метод применяли для пенициллинов [6], стрептомицииов [351], ан-тимицинов [314, 352], геликсинов и эндомицинов [284], т. е. тогда, когда, кроме биоавтографического метода, не было других способов выявления веществ на хроматограммах. Если расположение изучаемого вещества можно определить заранее, то при количественных определениях вырезают только зону расположения антибиотика, вещество затем элюируют подходящим растворителем. Для определения содержания антибиотика чаще всего используют спектрофотометрический метод. Таким образом проводили определение тетрациклинов антибиотики и продукты их деградации выявляли по свечению в УФ-свете, для элюирования использовали фосфатный буфер с pH 4,5 или растворы соляной и серной кислот количественные определения проводили микробиологическими или спектрофотометрическими методами [97, 99, 101, 258, 350—355]. Метимицин и близкие антибиотики обнаруживали на хроматограммах в виде коричневых пятен по- [c.36]

Анализируемый раствор пропускают через колонку со скоростью 2 мл/мин, собирая раствор в приемник № 1. Железо элюируют из колонки с помощью 15 мл 4M НС1 со скоростью 0,5 мл/мин в приемник № 2. Для контроля полноты элюирования после пропускания 15 мл НС1 следующую каплю наносят на часовое стекло с 0,5 М раствором NH4S N. Если раствор розовеет, в приемник № 2 собирают еще 1 мл элюата. Колонка после элюирования всего железа снова готова к работе. [c.215]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология