Хлороформ, денатурация белков

Препараты природных макромолекулярных нуклеиновых кислот получают обычно из нуклеопротеидов, экстрагируемых из тканей солевыми растворами или водой. Если эти нуклеопротеиды осторожно диализовать или подвергнуть встряхиванию с хлороформом [259], то они расщепляются на белок и полимерную нуклеиновую кислоту. Белок может быть удален путем его денатурации или при помощи высаливания хлористым натрием [260]. Молекулярный вес макромолекулы нативной тимо-нуклеиновой кислоты, по данным различных исследователей [261—264], варьирует от 820 000 до 3 700 000. Длина нитевидной [c.260]

Деиротеинизацию осуществляют рядом способов. Наиболее рас-фостранено удаление белков с помощью довольно мягкого метода Севага, основанного на обработке раствора полисахаридов, содержащего белок, хлороформом с добавлением бутанола либо пен-ганола, что приводит к денатурации белка. Иногда примесь белка удаляют, растворяя полисахарид в 5—10%-ном растворе трихлор-уксусной кислоты и отделяя коагулирующий в этих условиях бе-ло к. В последнее время для этих целей применяют различные ферментативные препараты — протеазы. [c.46]

С печенью, в ряде случаев удоОно предварительно отделить цитоплазму от ядер и использовать только цитоплазму. Это можно осуществить путем экстрагирования гомогенизированной ткани 0,14 М раствором Na l, приводящего к отделению цитоплазматических рибонуклеопротендов от содержащего ДНК ядерного материала. Рибонуклеонротеид осаждают затем из экстракта при pH 4,5 и вновь растворяют его в растворе бикарбоната натрия. Продолжительное встряхивание с несколькими последовательно сменяемыми порциями хлороформа, содержащего небольшое количество октилового спирта, приводит к удалению белка нуклеиновую кислоту, остающуюся в водном растворе, осаждают в виде натриевой соли при добавлении спирта. Можно поступить и иначе вызвать спиртом денатурацию рибонуклеопротеида и экстрагировать нуклеиновую кислоту 10%-ным раствором хлористого натрия, из которого затем осадить ее добавлением двух объемов спирта [1—4]. Примерно аналогичный метод существует и для выделения РНК из животных тканей [5]. В этом случае нуклеиновую кислоту осаждают из раствора солянокислого гуанидина, в котором белок нерастворим для удаления белка можно использовать также додецилсульфат натрия [6, 7]. [c.40]

При осаждении белков упомянутыми выше способами очень трудно отделить осажденный денатурированный белок от вещества, примененного для осаждения. Этого затруднения можно избежать, если для денатурации и осаждения белков использовать их тепловую коагуляцию или метод Севага [31]. Метод Се-вага состоит в том, что белок денатурируется и переводится в нерастворимое состояние путем встряхивания с хлороформом. Избыток хлороформа удаляется выпариванием. [c.19]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология