Точки начала репликации Точки окончания репликации

Причинные зависимости между тремя факторами (а возможно, и другими, еще не известными) гарантируют, что события хромосомного цикла всегда будут проходить в определенной последовательности, предотвращая такие гибельные неувязки, как конденсацию хромосом посреди фазы синтеза ДНК. Каждый последующий шаг зависит от предыдущего. Поэтому клетка не может вступить в митоз, пока не появится М-стимулирующий фактор а он не может появиться, пока не исчезнет М-задерживающий фактор М-задерживающий фактор и активатор S-фазы не смогут исчезнуть до окончания синтеза ДНК синтез ДНК не прекратится до репликации всей ДНК следующая репликация ДНК не может начаться до снятия блокады повторной репликации при переходе в Gi. Позже мы встретим еще один пример клетка не может перейти из митоза в Gi, пока хромосомы не распределятся с помощью митотического веретена (разд. 13.5.7). Все эти наблюдения, атакже те, которые будут рассматриваться позже (разд. 18.2.1, 19.8.2), указывают на то, что большинство событий и процессов хромосомного цикла взаимосвязаны, образуя зависимую последовательность. [c.403]

Как отмечалось выше (см. разд. 9.2.3), в гаплоидном наборе митотических хромосом млекопитающих при окрашивании можно обнаружить приблизительно 2000 темных АТ-богатых сегментов (О-полосы), разделенных светлыми ОС-богатыми участками (К-полосы). Примечательно, что АТ-богатая и СС-богатая ДПК различаются по времени репликации в 8-фазе. Эксперименты, подобные приведенном на рис. 9-60, показали, что большая часть СС-богатых полос реплицируются в первой половине 8-фазы, а большинство АТ-богатых - во второй ее половине. Отсюда можно сделать вывод, что гены домашнего хозяйства (конститутивные) находятся главным образом в СС-богатых полосах, а гены, активность которых характерна для специализированных клеток, относятся к АТ-богатым сегментам. Остается загадкой, почему геном млекопитающих должен подразделяться на такие большие чередующиеся блоки хроматина, многие из которых по размеру приближаются к целому бактериальному геному. Пеизвестпо также, сколько точек начала репликации из каждой репликационной единицы активируется одновременно. Возможно, в поздно реплицирующихся репликонах хроматин остается в конденсированном состоянии даже после окончания М-фазы и деконденсируется лишь в середине 8-фазы, открывая в репликоне сразу все точки начала репликации. В таком случае координированная репликация ДПК в пределах одной репликационной единицы, проходящая по принципу все или ничего , может отражать кооперативную природ процесса деконденсации хроматина (см. разд. 9.1.21). [c.141]

Методы, используемые нами для синтеза равномерно меченных и меченных по концам одноцепочечных ДНК-зондов, очень похожи. Принцип их проиллюстрирован на рис. 10. Фрагмент ДНК, который предстоит исследовать, клонируется в репликативной форме бактериофага или в плазмидном векторе, продуцирующем одноцепочечные кольцевые молекулы только одной ориентации. Две наиболее распространенные системы такого типа — бактериофаг М13 и плазмиды, несущие точки начала репликации фага М13. Олигонуклеотидный праймер реассоциируют с одноцепочечной кольцевой молекулой так, чтобы он инициировал синтез ДНК на матрице тестируемой вставки в направлении от 5 - к З -концу. Для равномерно меченных зондов один из используемых при синтезе dNTP метится изотопами Р или в альфа-положении. Для зондов с концевой меткой олигонуклеотид метят по 5 -концу [y- PjATP, а для синтеза ДНК используют холодные dNTP. По окончании синтеза ДНК обрабатывается рестриктазой, расщепляющей кольцевую молекулу у конца вставки, противоположном сайту реассоциации с олигонуклеотидным праймером. В результате такой реакции получается линейный фрагмент ДНК, состоящий частично из двухцепочечного и частично из одноцепочечного участков. Денатурируя ДНК и проводя препаративный электрофорез в поли- [c.167]

Ферментные системы синтеза ДНК у про- и эукариот до конца не выяснены. По имеющимся данным, в репликации ДНК, включающей узнавание точки начала процесса, расплетение родительских цепей ДНК в репликационной вилке, инициацию биосинтеза дочерних цепей и дальнейшую их элонгацию и, наконец, окончание (терминация) процесса, участвует более 40 ферментов и белковых факторов, объединенных в единую ДИК-репликазиую систему, называемую реплисомой. [c.479]

Единица, с помощью которой клетка контролирует отдельные акты репликации, получила название реплико-на. Каждый репликон в каждом клеточном цикле возбуждается только один раз. В нем обязательно должны присутствовать необходимые для репликации контролирующие элементы точка начала (origin), в которой инициируется репликация, точка окончания (terminus), в которой репликация останавливается. Любая последовательность, присоединенная к точке начала (или, более точно, не отделенная от точки начала точкой окончания), реплицируется как часть этого репликона. Г оворя языком генетики, точка начала представляет собой t/u -действую-щий сайт, способный влиять только на ту молекулу ДНК, физической частью которой он является. [c.396]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология