Плазмиды семейства dUR

Векторы для клонирования ДНК в клетках дрожжей. Вышеперечисленные особенности биологии плазмид 2цт учитываются при конструировании соответствующих векторов и искусственных хромосом YA . Современные дрожжевые векторы представлены несколькими семействами. [c.87]

Репликация плазмид обоих классов осуществляется в основном бактериальными белками. Поскольку эти белки в клетках разных видов бактерий отличаются друг от друга, то плазмиды поддерживаются только в ограниченном числе близкородственных видов клеток. Известны, однако, примеры плазмид, имеющих щирокий круг клеток-хозяев. Такие плазмиды обладают гибкой системой белков, необходимых для их поддержания в различных семействах бактерий. [c.68]

Штамм Pseudomonas syringae pv. phaseoli ola обладает плазмидой длиной 150 тыс. п. н., которая может реплицироваться автономно, а может интегрироваться в бактериальную хромосому. Последующее неточное вырезание позволило получить семейство плазмид длиной от 35 до 270 тыс. п. п., некоторые из них содержали большие сегменты хромосомной ДНК [677]. [c.327]

Для введения чужеродной ДНК в интактные клетки растений используется вектор, полученный на основе Т-ДНК Agroba terium, о которой говорилось выше (см. разд. 20.3.3). Для этого гены, ответственные ш образование опухоли на растении, удаляются и замещаются желаемыми. Носле переноса модифицированной Т-ДНК в соответствующую Ti-плазмиду Agroba terium бактерии культивируют вместе с кусочками листа. Эта система позволяет Т-ДНК встроиться к хромосому растения, в результате чего новый ген стабильно включается в растительный геном (рис. 20-72). К сожалению, этот метод успешно используется лишь для некоторых семейств двудольных растений [c.438]

Недавно начали применять другие космидные или плазмид-ные векторы на базе репликонов, отличных от семейства olEl, которые также используют в рекомбинационных экспериментах в сочетании с подходящими векторами. В качестве примеров можно назвать селективные плазмиды, несущие область начала репликации R1 [11], космиды на основе pS lOl [17] и космидные векторы, использующие область начала репликации фага К [18]. [c.81]

Бактериальные экспрессирующие векторы, особенно удобные для проведения такой работы, включают семейство плазмид риН [1], несущих у З -конца гена la Z набор дискретных сай- [c.172]

Транспозоны ТпЗ-семейства встречаются в грамот-рицательных и грамположительных бактериях, но, очевидно, имеют общее происхождение. Все они ограничены высоко гомологичными инвертированными концевыми повторами, состоящими из 35—48 П.Н., и образуют повторы реципиентной ДНК из 5 п.н. Центральные области этих транспозонов, содержащие информацию об их транспозиции, в разной степени гомологичны друг другу. В большинстве из них локализованы также гены, придающие клеткам устойчивость к антибиотикам и (или) солям ртути. Только ген Hg содержит, например, транспозон Тп5041, найденный в клетках Pseudomoms (Kholodii et al., 1997). Некоторые из транспозонов являются криптическими, т. е. не сообщают клеткам дополнительный фенотипический признак. К ним, в частности, относится транспозон ТпЮОО, содержащийся в F-плазмиде. К ТпЗ-семейству [c.45]

Итак, основными биологическими свойствами плазмид являются их способность к репликации, конъюгативность, интегрируемость, несовместимость, стабильность и фенотипические признаки, которые они придают бактериям. Рассмотрим, как эти свойства обусловливаются генетическими особенностями плазмиды F, а также некоторых наиболее изученных представителей семейств R- и Со1-плазмид. [c.75]

Плазмиды — это внехромосомные генетические элементы, выявляемые в бактериях различных семейств. Они представляют собой двухцепочечные кольцевые молекулы ДНК размером от 2 тпн до более чем 300 тпн. Плазмиды могут нести гены, которые обусловливают фенотипическое отличие содержащих их клеток от бесплазмидных клеток. Культура, несущая плазмиду, обозначается следующим образом за наименованием бактериального штамма указывается в квадратных сшбках название плазмиды, например, Е. соИ НВ101[Со1Е1]. [c.85]

Было создано семейство плазмид pQE (рис. 2.42), в состав которых включены следующие элементы 1) репликон olEl 2) оптимизи-ронамиый промоторно-операторный элемент, состоящий из промотора фага Т5, узнаваемого РНК-полимеразой Е. соН, и двух /ас-операторов для эффективной репрессии сильного фагового промотора 3) два строгих терминатора транскрипции — I0 фага Я и Т1 оперона рибосомной РНК Е. соН для предотвращения транскрипции других последовательностей плазмиды и тем самым для стабилизации ее наследования при делении клеток 4) синтетический участок свя- [c.126]

Разные представители почвенных и водных грамотрицательных бактерий проявляют огромное многообразие метаболических активностей, которые не только представляют значительный научный интерес, но и потенциально важны для биотехнологии. Однако ряд этих активностей нельзя воспроизвести в клетках Е. соИ, несущих в составе гибридных молекул ДНК соответствующие генетические детерминанты, так как метаболические и физиологические возможности этой бактерии ограничены. Кроме того, исследования последних лет показали, что, несмотря на фундаментальную схожесть организации генетического аппарата прокариот и способа реализации генетической информации, существуют характерные для каждой таксономической группы особенности, отличающие ее от других групп по тонким механизмам регуляции экспрессии генов. Это может приводить к тому, что гены бактерий одного семейства (рода) не будут экспрессироваться в клетках бактерий дрзтого семейства (рода) или обусловят очень низкий уровень продукции соответствующего белка. Поэтому для изучения экспрессии генов, получения суперпродуцентов с определенными свойствами и т. п. необходимо либо создавать для каждой таксономической группы бактерий специализированную векторную систему на основе плазмид и фагов [c.211]

Уже первые генно-инженерные эксперименты показали, что один и тот же ген в грамотри-цательных бактериях, относящихся к разным семействам, родам и даже к разным видам одного рода, может обусловливать значительно различающийся уровень синтеза кодируемого им белка. Причины этого чаще всего не ясны. Учитывая эти результаты, В. Г. Дебабов с сотрудниками предложили следующую схему исследований целевой ген встраивается в экспрессирующий вектор с широким кругом хозяев и полученная гибридная плазмида затем конъюгационно переносится в большое число штаммов разных грамотрицательных бактерий. Созданные таким образом гибридные штаммы сравнивают по уровню продукции целевого белка и выбирают наилучший вариант. [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология