Электрофорез зональный, конвекция

При использовании градиента плотности для стабилизации зон против конвекция общие условия, необходимые для создания стабильности, можно сформулировать следующим образом плотность раствора в колонке на всем ее протяжении и в любой момент должна возрастать сверху вниз или градиент по всей длине колонки и в любой момент должен быть положительным [1259]. Условия получения градиентов плотности, удовлетворяющих требованиям проведения зонального электрофореза, были подробно исследованы Свенссоном и др. [1265]. [c.26]

В зональном электрофорезе пятно или тонкий слой раствора, нанесенного на полутвердый или гелеобразный материал, помещают в электрическое поле, в результате чего молекулы перемещаются по или через материал носителя. Поскольку образец наносится в виде зоны, для полноты разделения приходится использовать небольшие количества вещества. В первую очередь функцией носителя является предотвращение механических воздействий и конвекции, которая происходит в результате как температурных изменений, так и высокой плотности концентрированных растворов макромолекул. Однако носитель иногда может адсорбировать молекулы различного типа или действовать в качестве молекулярного сита, приводя тем самым к хроматографическим эффектам (гл. 8), что может или помогать разделению или ухудшать его. Методы использования различных материалов в качестве носителей описаны в следующих разделах. [c.225]

Необходимым условием для электрофоретического разделения компонентов на отдельные зоны является предотвращение конвекции. йертен [565, 567] для стабилизации разделенных зон в растворе применил вращение электрофоретической трубки. Его метод получил название зонального электрофореза в свободной среде. В процессе электрофореза горизонтальная трубка с внутренним диаметром 3 мм вращается вокруг своей продольной оси со скоростью 40 об/мин. Такое вращение предотвращает конвекционные возмущения, что можно объяснить следующим образом. Рассмотрим некоторую часть образца, помещенную во вращающуюся трубку в положении I, как показано на рис. 6. Если эта часть, представляющая собой жидкость, имеет более высокую плотность, чем окружающая среда, то она будет перемещаться вниз, а не по направлению к стенке. При вращении трубки образец станет синхронно колебаться относительно ее поперечного сечения, и в результате будет достигнута стабилизация. [c.22]

Эти проблемы можно свести к минимуму при зональном электрофорезе, где (как и в методе зонального центрифугирования) макромолекулы присутствуют вначале лищь в очень тонком слое. Конвекцию можно подавить с помощью градиента плотности, но гораздо большее распространение получил электрофорез в твердотельном носителе, насыщенном буфером. Некоторые носители лишь слабо или неспецифически реагируют с ма-кромолекулярными компонентами раствора к ним относятся бумага, целлюлоза для тонкослойной хроматографии и ацетат целлюлозы. В других материалах при движении молекул происходит отставание молекул одних типов от молекул других типов к ним относятся полиакриламидные и агарозные гели (в которых происходит сортировка молекул по размерам) и бумажные ионообменники (в которых осуществляется избирательная задержка заряженных молекул). [c.302]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология