Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Зональные методы разделения

    Хроматография — метод разделения и анализа смеси веществ, основанный на различной сорбции компонентов анализируемой смеси определенным сорбентом. Впервые X. предложена в 1903 г. русским ученым М. Цветом. Разделение ведут в колонках, наполненных силикагелем, оксидом алюминия, ионообменными смолами (ионитами) и др., или же на специальной бумаге. Вследствие различной сорби-руемости компонентов смеси (подвижная фаза) происходит их зональное распределение по слою сорбента (неподвижная фаза) — возникает хроматограмма, позволяющая выделить и проанализировать отдельные вещества (процесс подобен многоступенчатой ректификации). В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают газовую и жидкостную X. по механизмам разделения — ионообменную, осадочную, распределительную и молекулярную (адсорбционную) X. в зависимости от техники проведения разделения в X. различают колоночную (колонки сорбентов), бумажную (специальная фильтровальная бумага), капиллярную (используют узкие капилляры), тонкослойную X. (применяют тонкие слои сорбентов). Методами X. анализируют смеси неорганических и органических соединений, концентрируют следы элементов. В химической технологии X. применяют для очистки, разделения веществ. X. позволяет разделять и анализировать смеси веществ, очень близких по свойствам (напр,, лантаноиды, актиноиды, изотопы, аминокислоты, углеводороды и др.). [c.151]


    Все описанные выше методы грубого фракционирования, широко используемые на начальных этапах выделения биополимеров из биомассы, чаще всего не приводят к желаемому конечному результату, т.е. к получению индивидуального вещества. Последнее, как правило, достигается при использовании группы методов, которые можно квалифицировать как зональные методы разделения. Общая идеология этих методов состоит в том, что создается некоторая система, в которой компоненты смеси перемещаются с различными скоростями. Если в такую систему ввести разделяемую смесь в виде некоторой зоны, то по мере ее перемещения компоненты смеси, движущиеся в разными скоростями, будут формировать отдельные зовы, которые в конце процедуры разделения можно механически разнести в различные приемники, т.е. получить целую серию фракций. [c.237]

    Электрофорез в градиенте плотности сочетает в себе многие преимущества как фронтального метода, так и зонального электрофореза на инертном носителе, и в то же время не имеет некоторых их недостатков. В градиенте плотности можно разделять как крайне малые, так и значительные количества вещества. В первом случае особенно важно отсутствие опасности адсорбции, которой невозможно избежать, если применяется твердый носитель. Применяя для анализа радиоактивную метку или измерения биологической активности, можно работать с субмикрограммовыми количествами вещества. Метод вполне пригоден для разделения низкомолекулярных веществ. [c.66]

    Вторым широко используемым в биохимии зональным методом разделения смесей является электрофорез. В этом случае зоны создаются в результате того, что разные компоненты смеси с различной скоростью перемещаются в электрическом поле. Скорость перемещения к определяется основным уравнением [c.241]

    При зональном электрофорезе разделение белковых фракций происходит очень быстро. Некоторые методы позволяют закончить всю процедуру, включая окрашивание, за 1—2 ч [7]. [c.11]

    Разработан ряд электрофоретических методов для анализа белков и их смесей. В методе движущейся границы, или фронтального электрофореза, определяется скорость перемещения в электрическом поле резкой границы между раствором исследуемого вещества и растворителем. Для препаративного разделения смесей более удобен метод зонального электрофореза, в котором раствор исследуемого вещества помещают вначале в виде узкого слоя между двумя слоями растворителя. За достаточно большой промежуток времени вещества с различной подвижностью расходятся на значительное расстояние, их зоны перестают перекрываться и продукты разделения могут быть [c.172]


    Важнейшим зональным методом является хроматография. Как известно, хроматография бывает газовой, газожидкостной и жидкостной. По очевидным причинам при разделении биополимеров и их анализе используется только жидкостная хроматография. В жидкостной хроматографии зона разделяемых веществ в помощью тока элюирующей жидкости перемещается относительно неподвижной фазы, которая обладает разным сродством к разделяемым компонентам. При перемещении зоны с помощью тока элюента каждый из разделяемых компонентов проводит некоторую часть времени на неподвижной фазе, причем тем большую, чем выше его сродство к этой фазе. Чем больше это время, тем медленнее перемещается зона, содержащая выделяемое или анализируемое вещество, относительно неподвижной фазы. [c.237]

    Для определения коэффициента захвата испарительных геттерных насосов требуется знать распределение молекулярных потоков по всей поверхности насоса. Одним из методов решения этой задачи может служить зональный метод [14, 33], широко используемый для расчета лучистого теплообмена. Сущность этого метода заключается в разделении всей поглощающей поверхности насоса на ряд зон, в каждой из которых коэффициент прилипания и поток молекул считают неизменными, и в последующем составлении конечных систем алгебраических уравнений для локальных разрешающих угловых коэффициентов испускания молекул. [c.57]

    Н. М. Туркельтауб предложили новый метод хроматографического анализа газов, основанный на сочетании термической десорбции и проявительного хроматографического анализа. Классический хроматографический метод не может быть применен для разделения смесей, содержащих одновременно плохо и хорошо сорбируемые компоненты, как, например, смесь легких и тяжелых углеводородов. Предлагаемый метод разделения состоит в одновременном передвижении электрической печи и пропускании тока растворителя вдоль слоя, на передней части которого находится разделяемая смесь. Так, например, на силикагель наносят некоторое количество смеси и проявляют отдельные компоненты, просасывая через колонку воздух, при одновременном зональном обогреве силикагеля путем опускания печи вдоль слоя с определенной скоростью. Газовый поток направляют в регистрирующий прибор (интерферометр), фиксирующий прохождение отдельных компонентов. [c.59]

    Зональный электрофорез применим для разделения любых ионов как сложных органических, так и неорганических, если только можно подобрать условия, когда подвижности этих ионов (в первую очередь величины заряда) отличаются друг от друга. Этим методом, например, успешно разделяются пуриновые и пиримидиновые основания благодаря различиям в константах ионизации их аминогрупп. Дополнительные возможности появляются при разделении нуклеозидов, если проводить электрофорез в бо-ратном буфере, так как боратный ион по-разному связывается с гидроксильными группами пентоз, сообщая всему иону дополнительный отрицательный заряд. Наконец, нуклеотиды имеют еще две ионогенные группы фосфата, и различия в константах диссо-циации вторичных гидроксильных групп (первичные гидроксилы фосфата диссоциированы во всем интервале pH, в котором нуклеотиды стабильны) можно использовать для разделения сложных [c.105]

    Назначение и область применения. Зональный электрофорез наряду с хроматографией является наиболее точным и доступным методом разделения макромолекул в биологических исследованиях. Широкое распространение получили многочисленные варианты зонального электрофореза, характер которых определяется применением различных гомогенных и инертных носителей. [c.75]

    Сравнительно новой разновидностью зонального электрофореза является электрофорез на ацетат-целлюлозной мембране [6]. Ацетат-целлюлозная мембрана, по-видимому,— очень хорошая поддерживающая среда, уже нашедшая благодаря ряду достоинств широкое применение. Выше мы отмечали, что приготовление крахмального и агарового гелей—довольно трудоемкая операция, осложняющая метод. В то же время способы предварительной обработки ацетат-целлюлозной мембраны почти так же просты, как и в случае с фильтровальной бумагой. При этом разделение белков происходит лучше и быстрее, а для анализа достаточно 5—1000 мкг белка, растворенного в объеме 0,1—10 мкл. Как белки, так и гликопротеиды очень хорошо окрашиваются на ацетат-целлюлозной мембране, поэтому она является прекрасной поддерживающей средой с точки зрения количественной оценки этих соединений. Электрофорез на ацетат-целлюлозной мембране позволяет получить больше белковых фракций сыворотки крови, чем электрофорез на бумаге, но меньше, чем электрофорез в крахмальном геле. С помощью электрофореза на ацетат-целлюлозной мембране можно определять весьма малые количества индивидуальных белков, благодаря чему он очень подходит для анализа гомогенности выделенного нативного белка. Ацетат-целлюлозные мембраны могут быть использованы также в опытах по иммунодиффузии, что является еще одним достоинством этого метода электрофореза. [c.14]


    Метод движущейся границы (фронтальный электрофорез) неудобен для препаративного разделения. Для этой цели более удобным оказался так называемый зональный электрофорез, различные модификации которого появились позднее. При зональном электрофорезе раствор исследуемых веществ помещают вначале в виде более или менее узкого слоя (зоны) между двумя слоями растворителя. За достаточно большое время вещества с различной подвижностью расходятся на такое расстояние, что занимаемые ими зоны не перекрываются и могут быть извлечены по-отдельности. [c.41]

    Сущность метода газовой хроматографии заключается в разделении веществ при их пропускании через слои пористых сорбирующих материалов. Чем меньше сорбируемость компонента смеси, тем с большей скоростью он перемещается вдоль колонки сорбента в направлении потока газа. В результате возникает зональное распределение компонентов — хроматограмма, позволяющая выделить и проанализировать отдельные вещества. [c.185]

    На фиг. 80 приведено интересное сопоставление результатов разделения методами электрофореза на бумаге 11 зонального электрофореза фракций, полученных в результате хроматографического [c.239]

    Литературу по электрофорезу на бумаге несколько осложняет разнообразие терминологии, используемой различными исследователями. Михаэлис [1] в 1909 г. применил термин электрофорез при описании движения коллоидных ионов в электрическом поле в обзоре, изданном в 1945 г., Мартин и Синге [2] называют электромиграцию ионов с низким молекулярным весом в опорной среде ионофорезом. Разделения как маленьких, так и больших молекул, основанные на различиях в заряде, проводятся в одинаковых или сходных аппаратах, и по этой причине большинство исследователей склонны применять термин электрофорез с соответствующим прилагательным, указывающим на характер используемой опорной среды. Тизелиус и др. предложили удачное выражение зональный электрофорез для разграничения этих методов от метода подвижной границы. По-видимому, нет надобности вводить специальные термины для обозначения побочных эффектов, обусловленных хроматографией, адсорбцией или испарением. [c.244]

    Новыми методами исследования и расчета лучистого теплообмена являются зональные. Их использование связано с разделением излучающей системы на конечное число п граничных зон (а при наличии промежуточной ослабляющей среды и на конечное число т объемных [c.216]

    Чаще всего для разделения мембран применяют метод центрифугирования. Мембранные частицы разделяют по скорости их седиментации (зональное центрифугирование) или по плавучей [c.217]

    Этот метод зонального электрофореза был впервые предложен в 1952 г. Кункелем и Слейтером [727] и впоследствии успешно применялся во многих областях, таких, как разделение ли- [c.47]

    Вирионы рабдовирусов имеют весьма характерную структуру в препаратах, окрашенных методом негативного контрастирования, обнаруживаются частицы вариабельной длины, имеющие закругленный и уплощенный концы (так называемые пулевидные частицы). Нормальные инфекционные вирионы имеют длину 170—180 нм и диаметр 70 нм. Дефектные интерферирующие частицы (ДИЧ) сохраняют характерную для инфекционных частиц пулевидную форму, но имеют меньшую длину. Они неинфекционны и накапливаются в возрастающем количестве при пассировании большинства типичных рабдовирусов без разведения благодаря их способности успешно конкурировать (интерферировать) с нормальными инфекционными частицами. ДИЧ имеют такой же химический состав, как и стандартные вирионы, но их геномная РНК имеет меньший размер. ДИЧ и стандартные вирионы данного вируса существенно различаются по коэффициентам седиментации, что используется для их разделения методом зонального центрифугирования. Метод, описанный ниже, эффективен для очистки вируса из культуральной среды. Хотя рабдовирусы высвобождаются из зара- [c.123]

    Следует отметить, что скорость перемещения каждого компонента в опреде-лстной системе разделения и при заданных внешних условиях является его фи-зико-химической константой и может быть использована для идентификации вещества или регистрации его присутствия в некоторой системе. Поэтому зональные методы наряду с их огромным препаративным значением имеют и важное аналитическое применение. [c.237]

    Описанные выше методы по своей сути динамические, разделение происходит по мере перемещения веществ вдоль системы. Наряду с ними применение нашли равновесные зональные методы, в которых систёма приводится в равновесие с некоторым приложенным внешним полем — электрическим или центробежным — и зоны, соответствующие разным веществам, останавливаются в разных участках системы. [c.243]

    Как уже отмечалось, М. С. Цвет разработал хроматографический метод разделения смесей веществ, исходя из наблюдения различной адсорбируемости растительных пигментов. Исследование этого явления позволило ему сформулировать следующий закон, названный им законом адсорбционного замещения [159, 160] Вещества, растворенные в определенной жидкости, образуют определенный адсорбционный ряд А, В, С,. .., выражаюнщй относительное адсорбционное сродство его членов к адсорбенту. Каждый из членов адсорбционного ряда, обладая большим адсорбционным сродством, чем последующий, вытесняет его из соединения и в свою очередь вытесняется предыдущим . М. С. Цвет сформулировал также и основное необходимое условие разделения веществ при помощи адсорбционных методов. Он писал Для того чтобы два находящихся в растворе вещества могли быть разъединены по адсорбционным методам, необходимо чтобы они занимали неодинаковый ранг в адсорбционном ряду . При описании физической сущности хроматографического процесса ]И. С. Цвет на основании закона адсорбционного замещения заключает Зональное распределение составных раствора (в хроматографической колонке.— Прим. авт.) выражает относительное положение последних в адсорбционном ряду . [c.16]

    Недостаток метода - в наличии ошибки в результате разделения камеры на зоны, которая, тем не менее, может быть сколь угодно уменьшена с помощью увеличения числа зон и разумной эффективной температуры излучения зоны. Сложность метода ограничивает его применение специальными исследованиями тепловой работы печей и корректировкой других, более простых методов расчета. К то.му же трудности, возникающие при согласовании зонального подхода к лучистол1у переносу тепла с конечно-разностной методикой реще-ния уравнений газовой динамики, существенно ограничивают область применения зонатьных методов расчета. [c.131]

    Пря улыпрацентрифугировании для разделения используется седиментация, зависящая от размера, плотности и формы молекулы белка. Центрифугирование в градиенте плотности (зональное центрифугирование) часто применяется для разделения белков, а также для разделения органелл и вирусов. Одной из характеристик белка служат данные седиментационного анализа в ультрацентрифуге (разд. 3.5.4). Положение возникающих белковых зон можно наблюдать с помощью оптических методов. [c.349]

    Существуют два различных метода электрофореза фронтальный электрофорез, который проводят в свободной незакрепленной среде, и зональный электрофорез — в закрепленной среде (стабилизированная жидкость или носители). Они имеют единую аппаратурную схему источник тока, камеру для электрофореза, два электрода, соединяющих камеру с источником тока, и аппаратуру для сбора и идентификации разделенных веществ. Для электрофореза используют как готовые наборы аппаратуры (универсальный прибор для иммуноэлектрофореза и электрофореза белков на бумаге и крахмале, набор для электрофореза в полиакриламидном геле венгерской фирмы Реанал ), так и наборы, составляемые экспериментатором из отдельных приборов (универсальный источник питания УИП-1, двухлучевой регистрирующий микрофотометр ИФО-451 и др.). [c.144]

    Число фракций, на которые разделяется исходный белок при зональном электрофорезе, можно увеличить не только с помощью специальных методов окрашивания. Простая замена буферного раствора или поддерживающей среды дает тот же эффект. Например, при электрофорезе сыворотки на бумаге в буферном растворе трис-ЭДТА получается не пять, а девять белковых фракций [1 ]. Еще лучшее разделение можно получить в поддерживающей среде, которая обладает эффектом молекулярного сита, например в крахмальном или полиакриламидном гелях. Малые размеры пор этих гелей задерживают миграцию высокомолекулярных белков, так как трение при этом увеличивается настолько, что даже большой электростатический заряд их молекул не может компенсировать замедляющего действия поддерживающей среды. Однако в других поддерживающих средах величина белковой молекулы мало влияет на скорость миграции, поскольку эффект увеличения трения обычно компенсируется ее большим электростатическим зарядом. [c.11]

    Для определения молекулярного веса ДНК (обзоры — см. наиболее широко используются методы, основанные на определении скорости седиментации макромолекул. Это определение может быть выполнено по различным методикам наиболее широкое распространение в последнее время приобрела методика, основанная на зональном центрифугировании в градиенте плотности сахарозы в препаративной ультрацентрифуге В данном случае распределение веществ по скорости осаждения можно контролировать по радиоактивной метке, что обеспечивает высокую чувствительность с другой стороны, методика практически без изменений может быть применена и для препаративного разделения нуклеиновых кислот. Предложен ряд эмпирических уравнений, связывающих скорость седиментации двухцепочечного комплекса ДНК со значением молекулярного веса определенным независимыми методами. Последнее из этих уравнений охватывает пределы мол. веса 0,2— 130 108. [c.30]

    В литературе появилось несколько сообщений об использовании ТСРХ в качестве метода анализа при биохимических исследованиях липидов [62, 63]. Вопросы количественного определения меченых липидов затронуты в обзоре Прайветта и др. [64], в который включены статьи, опубликованные до 1966 г. Несколько позже Снайдер [65] предложил использовать зональный анализ для определения липидов в ТСХ и подробно рассмотрел вопрос о детектировании меченых соединений, для которых не существует соответствующих эталонных веществ. После разделения смеси трех липидных соединений, меченных С и Н, проводилось сравнение результатов, полученных при анализе зон щириной 10, 5 и 2 мм. На рис. 4.26, где представлены полученные результаты, ясно видно преимущество анализа зон щириной 2 мм. Аналогичные результаты были получены для смесей веществ, меченных С и Н. В следующей работе [66] с участием того же автора описано разделение образцов липидов, меченных обоими [c.123]

    Первое применение) адсорбции для разделения и очистки ферментов было осуществлено русским биохимиком А. Я. Данилевским в 1862 г. С помощью свежеосажденного коллодия, использованного в качестве адсорбента, он отделил в панкреатическом соке амилазу от трипсина. Однако эта работа не давала общего метода анализа, который можно было бы применять для тонкого разделения сложных смесей. Такой общий адсорбционный метод анализа бьш впервые разработан М. С. Цветом. В основу метода М. С. Цвет положил избирательность адсорбции, т. е. способность разных веществ удерживаться на поверхности адсорбента при одинаковых условиях с разной интенсивностью. Он писал Для того, чтобы два находящихся в растворе вещества могли быть разъединены адсорбционным методом, необходимо, чтобы они занимали неодинаковый ранг в адсорбционном ряду , иначе говоря, имели бы разные коэффициенты адсорбции. М. С. Цвет обнаружил, что при фильтрации раствора растительк-ых пигментов через колонку с адсорбентом пигменты располагаются по длине колонки в виде отдельных зон. Исходя из этого, он сделал вывод, что зональное распределение составных частей раствора выражает относительное положение последних в адсорбционном ряду . Даже разница в таких свойствах двух веществ, как, например, молекулярная масса. [c.5]

    В большинстве случаев результаты анализа количественно оценивают путем визуального сравнения с известными, стандартами. Соответственно погрещность такой оценки составляет 10%. Имеется несколько удовлетворительных более точных вариантов проявления хроматограмм и определения разделенных веществ. Отдельные зоны пробы лучше всего анализировать обычными влажными химическими методами. Снидер и Смит [17] автоматизировали один из таких методов, используя автоматический зональный скребок и систему сбора [18], соединенную с автоматическим сцинтилляционным счетчиком, данные которого выдаются непосредственно на цифропечать. [c.279]

    Разработан ряд радиоактивных методов количественного определения соединений, разделенных ТСХ. Пробы можно пометить прямой реакцией с компонентами, например путем этерификации кислот радиоактивным диазометаном [309], или методом изотопного разбавления, добавляя известное количество радиоактивного компонента к разделяемой смеси [186, 310]. Шульце и Венцель [311] пользовались методикой Вильц-баха [311, 312] и метили соединения тритием. Эти соединения, разделенные на слоях, можно определить методами 1) авторадиографии 2) автосцинтиллографии 3) элюированием с последующим анализом радиоактивности 4) сканированием полос детекторами Гейгера — Мюллера 5) сканированием полос детекторами на фотоэлементах 6) двумерного сканирования с использованием детектора нового типа на электронных умножителях, 7) двумерного сканирования с -камерой 8) сжигания 9) зонального профильного сканирования с использованием жидкостного сцинтилляционного детектирования и 10) сублимационной автографии. Радиоактивным методам и применению их в ТСХ посвящен ряд обзоров и статей [313—316]. [c.353]

    Шнайдер [359] сравнил сканирование полос, при котором радиоактивный материал применяют непосредственно на тонком слое, с зональным сканированием, при котором адсорбционный материал соскребают последовательно слой за слоем и анализируют методом жидкостной сцинтилляции. Чувствитель-ность и степень разделения были больше при зональном сканировании. Разработаны ручные [360] и автоматические [361] (Analabs) устройства для соскребания вся система автомати зирована, в том числе и последовательное подключение компьютеров [362]. Фослиен и др. [363] разработали регулируемый компьютером скребок для удаления отдельных пятен в опреде- [c.358]

    Из предыдущего очевидно, что оптические методы адсорбционного анализа не так пригодны для метода вымывания, как для фронтального и для метода вы-теснени я. Изменение растворителя, часто необходимое при проявлении вымыванием, также неудобно для интер-ферометрического метода, так как измеряемый интервал узО К и должен быть смещен специальным приспособлением, если показатель преломления нового растворителя заметно отличается от предыдущего. При анализе вымыванием можно часто с успехом применять чувствительные специфические реактивы для контроля разделения R фильтрате (например, нингидриновую реакцию на аминокислоты), если различные компоненты не могут наблюдаться в колонке. Если такой контроль возможен — прямыми или косвенными методами, то это большое преимущество метода. Зональная концентрация адсорбированного вещества, естественно, выше в колонке, чем в фильтрате, и поэтому вообще легче сделать прямые наблюдения вымывания в колонке, если можно применить подходящие методы. Имеется, конечно, ряд других возможностей для непрерывного анализа фильтрата абсорбция света, электропроводность, потенциометрические измерения и пр. Насколько известно автору, эти методы не применялись. Метод проводимости может иметь значение при ионообменной адсорбции. [c.155]

    Существуют три основных типа электрофоретических систем — электрофорез с подвижной границей (метод подвижной границы), зональный электрофорез и стационарный (или вытесняющий) электрофорез. В системах первого типа электрическое поле прикладывается к исходно резкой границе между раствором макромолекул и буфером. Скорость миграции заряженных частиц определяется путем наблюдения за перемещением этой границы. Если раствор содержит гетерогенную смесь ионизированных макромолекул, то можно увидеть множество движущихся границ. В такой системе индивидуальные компоненты нельзя разделить на отдельные зоиы, так как наслоенный сверху буферный раствор имеет более низкую плотность по сравнению с находящимся под ним раствором макромолекул. Если бы и удалось достигнуть разделения зон, то все равно произошло бы их перемешивание, так как плотность раствора внутри этих зон была бы выше, чем между ними. [c.14]

    Необходимым условием для электрофоретического разделения компонентов на отдельные зоны является предотвращение конвекции. йертен [565, 567] для стабилизации разделенных зон в растворе применил вращение электрофоретической трубки. Его метод получил название зонального электрофореза в свободной среде. В процессе электрофореза горизонтальная трубка с внутренним диаметром 3 мм вращается вокруг своей продольной оси со скоростью 40 об/мин. Такое вращение предотвращает конвекционные возмущения, что можно объяснить следующим образом. Рассмотрим некоторую часть образца, помещенную во вращающуюся трубку в положении I, как показано на рис. 6. Если эта часть, представляющая собой жидкость, имеет более высокую плотность, чем окружающая среда, то она будет перемещаться вниз, а не по направлению к стенке. При вращении трубки образец станет синхронно колебаться относительно ее поперечного сечения, и в результате будет достигнута стабилизация. [c.22]

    Как уже отмечалось, качество разделения при проведении электрофореза в градиенте плотности сахарозы зависит от толщины стартовой зоны, которая в свою очередь определяется конструкцией аппарата и способом введения пробы. Однако даже в идеальных условиях стартовая зона, как правило, составляет несколько миллиметров, и в целях повышения разрешающей силы электрофореза ее желательно уменьшить. Принцип диск-электрофореза в полиакриламидном геле позволяет создавать очень тонкие стартовые зоны путем концентрирования белков, находящихся в исследуемом растворе. Именно поэтому он дает более эффективное разделение по сравнению с зональным электрофорезом в градиенте плотности. С другой стороны, извлечение белков из узких зон в полиакриламидном геле сложнее, чем из растворов с градиентом плотности. Процедура, сочетающая преимущества обоих методов, позволяет получать узкие стартовые зоны и легко выделять разделившиеся вещества из градиента плотности. Шастер и Шрир [1150] описали очень простой прибор для практического воплощения этой идеи. Электрофорез проводили в U-образной трубке. В обоих ее коленах над колонкой с градиентом плотности помещали слой полиакриламидного геля. Зоны, разделенные в геле, мигрировали затем в градиент плотности, где расширялись не более чем в 2—3 раза по сравнению с их толщиной в геле. Эта установка отличается довольно большой емкостью за один прием авторам удалось разделить 50 мг бычьего сывороточного альбумина, и, по их мнению, емкость должна быть еще больше при разделении более сложной смеси белков. [c.32]

    Самый простой способ обеспечения стабильности электрофоретических зон заключается в том, что в среду для электрофореза вводят вещества, образующие капиллярную структуру. Ан-тиконвекционные свойства такой системы весьма высоки, если площадь поперечного сечения капилляров достаточно мала, так как в канале круглого сечения скорость потока снижается пропорционально четвертой степени радиуса. В качестве поддерживающей среды чаще всего используются фильтровальная бумага, пленки из ацетата целлюлозы, колонки или блоки целлюлозного порошка, гранулированный крахмал или гранулы поливиниловых полимеров, а также агаровый, агарозный, крахмальный или полиакриламидный гели. Зональный электрофорез в поддерживающей среде имеет ряд важных преимуществ. При его проведении можно использовать какой-либо простой и сравнительно недорогой прибор и анализировать одновременно несколько различных препаратов. Процедуры визуализации зон и выделения фракций осуществляются довольно легко. Вещества, обладающие биологической активностью, можно выявить непосредственно на электрофореграммах. Метод легко приспособить как для крупномасштабного разделения веществ, так и для микроразделения. Удается достигнуть очень высокой разрешающей силы, особенно в среде, характеризующейся одновременно антикон векционными свойствами и эффектом молекулярного сита. [c.34]

    В 1950 г. сообщения об успеш1ном использовании зонального электрофореза на фильтровальной бумаге для разделения смесей макромолекулярных веществ поступили сразу из шести лабораторий [256, 326, 467, 714, 848, 1313]. Этот метод нашел чрезвычайно широкое применение и фактичесни открыл путь для обширных аналитических исследований во многих областях. К настоящему времени З начение его снизилось в связи с использованием других сред, более подходящих для зонального электрофореза. [c.36]


Смотреть страницы где упоминается термин Зональные методы разделения: [c.6]    [c.453]    [c.155]    [c.246]    [c.180]    [c.36]    [c.145]    [c.348]   
Биологическая химия (2002) -- [ c.237 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Зональные методы

Методы разделения



© 2024 chem21.info Реклама на сайте