Цитотоксичность методы анализа

Метод выращивания клеток в монослое наиболее часто используется при анализе цитотоксичности в клеточных линиях, но иногда он используется при анализе чувствительности биопсий целого ряда опухолей разных типов. Главная проблема, возникающая при работе с биопсийным материалом, заключается Б том, что не всегда удается достигнуть адгезии и пролиферации опухолевых клеток, а кроме того, слишком часто наблюдается зарастание опухолевых культур клетками стромы (фибробласты и мезотелий). Важность этих проблем различна для разных типов опухолей (высока для карцином молочной железы, умеренна для опухолей яичников и малосущественна для глиом). [c.261]

Аналитическое и препаративное фракционирование клеток рассмотрено в двух главах, посвященных проточной цитометрии н элютриационному центрифугированию. Методы анализа на клеточном и субклеточном уровнях приведены в главе, посвященной гибридизации in situ. В главе, посвященной органной культуре, подчеркнуто значение клеточных взаимодействий и сохранения гистологической структуры ткани и приведены стандартные методы ведения органной культуры. Наконец, в главе, посвященной определению жизнеспособности клеток и оценке цитотоксичности, рассматриваются проблемы токсикологии и скрининга противоопухолевых препаратов, а также стандартные методы оценки выживаемости клеток в культуре. [c.7]

I. Кратковременные культуры (4—24 ч). Кратковременное поддержание клеток в суспензии для анализа чувствительности к препаратам возможно для клеток из любого источника. Если клетки получены из биопсийного материала опухоли человека, то тест-система имеет ряд теоретических преимуществ способность к росту не является лимитирующим фактором, поскольку рост в этой системе не требуется разрастание клеток стромы и клональный отбор сведены к минимуму, так что результаты могут быть получены быстро, что особенно важно, если испытание проводится с клиническими целями. Метод получил широкое использование в ФРГ при изучении чувствительности к ряду химиотерапевтических препаратов различных типов опухолей [13, 14]. Модифицированный метод с использованием либо клеток, либо фрагментов тканей был применен Силвестрини с сотрудниками [10] также для различных типов опухолей. В обоих вариантах исследовали включение нуклеотидов, меченных тритием, в ДНК или РНК. Ограничения этого метода заключаются главным образом в короткой продолжительности опыта это исключает возможность длительного воздействия лекарственных средств в течение одного или нескольких клеточных циклов. Следовательно, этим методом нельзя исследовать обратимость действия лекарства и остаточную цитотоксичность, что существенно ограничивает круг исследуемых препаратов. Было показано, что при использовании этой тест-системы получаются ложно-отрицательные результаты действия адриамици-на [14], хотя имелись сообщения об успешном применении системы при анализе действия других лекарств с иными механизмами действия [10]. [c.260]

Несмотря на различие методов, используемых для определения цитотоксичности и жизнеспособности, при их применении к биопсийному материалу опухолей человека, были получены одни и те же уровни корреляции между чувствительностью in vitro и ответами in vivo. Было проведено немало сравнительных анализов, при которых в качестве стандарта для сравнения выбирался процесс образования клонов. В табл. 8.3 обобщены результаты этих исследований. Оказалось, что при адекватном определении цитотоксичности результаты совпадают с данными теста на клоногенность. [c.276]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология