Анализ фенилтиогидантоинов аминокислот

В сборнике отдельные главы посвящены анализу фенилтиогидантоинов аминокислот с помощью ГХ и жидкостной хроматографии.) [c.313]

АНАЛИЗ ФЕНИЛТИОГИДАНТОИНОВ АМИНОКИСЛОТ [c.405]

Другой метод определения Ы-концевых групп (разработанный в 1950 г. П. Эдманом в Университете Лунда, Швеция) основан на реакции между аминогруппой и фенилизотиоцианатом, приводящей к образованию замещенной мочевины (ср. разд. 29.14). Гидролиз соляной кислотой в мягких условиях селективно удаляет Ы-концевой остаток в виде фенилтиогидантоина, который затем идентифицируют. Большое преимущество этого метода состоит в том, что он не затрагивает остальной части пептида поэтому анализ можно вновь повторить и идентифицировать при этом следующую концевую группу в укороченном пептиде. В идеале этот метод можно использовать многократно до полного определения всей последовательности звеньев, аминокислота за аминокисло той однако на практике это оказывается неосуществимым. [c.1049]

Обработка продукта реакции кислотой приводит к циклизации и освобождению фенилтиогидантоина N-концевой аминокислоты, природу которого устанавливают хроматографически. Укороченный на одну аминокислоту полипептид подвергают дальнейшему анализу. [c.54]

При этом анализу подвергают отщепляющуюся аминокислоту или непосредственно ее фенилтиогидантоин. Указанный принцип положен в основу работы секвенсоров, автоматически определяюш их аминокислотную последовательность в пептидных фрагментах, получаемых ферментативным расщеплением исследуемых белков. По Сэнджеру концевую аминогруппу П. маркируют 1-фтор-2,4-динитробензолом, подвергают П. гидролизу и определяют динитрофенильные производные аминокислот. С-Концевую аминокислоту можно отщепить с помощью карбоксипептидазы. Используют также полный гидразиполиз пептида. При этом все аминокислоты, кроме С-концевой, выделяются в виде гидразидов. Применяют также масс-спектрометрич. определение аминокислотной последовательности в П. Сведения об оптич. чистоте П. могут быть получены исследованием их атакуемости природными ферментами. [c.15]

Другой подход к Ы-концевому анализу, развитый Эдманом, включает реакцию с. фенилизотиоцианатом СеНвКСЗ. Продуктом реакции является тиомочевина (II), которая легко гидролизуется до идентифицируемого фенилтиогидантоина (III) в условиях, при которых остальная часть белка не гидролизуется (рис. 12.11). Весь процесс можно повторить на оставшемся белке и получить последовательность аминокислот. Этот процесс можно автоматизировать, причем тиогидантоин идентифицируется газохроматографически (гл. 3), а оставшийся белок после очистки и осаждения вновь возвращается в цикл. [c.269]

Ацетил- и трифторацетилпроизводные фенилтиогидантоинов этих аминокислот, а также метионина и фенилаланина анализировали на колонке, заполненной сорбентом с 1 % ЗЕ-ЗО на обработанном кислотой и силанизированном хромосорбе О [85]. Разделение указанных производных проводили как в изотермическом режиме при 180° С, так и при программировании температуры от 150 до 200° С со скоростью 10 град/мин при детектировании по теплопроводности, В этих условиях анализа ацетилнроизводные [c.58]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология