Усилители транскрипции

Элементы АП являются сайтами связывания белков, регулирующих транскрипцию. Ряд их свойств напоминает свойства усилителей транскрипции (энхансеров) в генах позвоночных, действующих вне зависимости от ориентации и на значительных расстояниях (около 1000 п. н.) от сайта инициации (см. раздел 2 этой главы). [c.196]

Рассмотренный элемент называется усилителем транскрипции, или энхансером. Он не входит в состав промотора, но способен увеличивать частоту инициирования транскрипции. Как он это делает Как он может осуществлять свое действие на таких больших расстояниях Одна из возможностей состоит в том, что энхансер изменяет всю структуру матрицы, например влияя на организацию хроматина или изменяя плотность суперспирализации ДНК. Но возможно также, что энхансер обеспечивает расположение матрицы в определенном месте в клетке, например прикрепляя ДНК к ядерному матриксу. Существует еще одна возможность, хотя и менее вероятная,-энхансер непосредственно уча.ствует в связывании РНК-полимеразы (после чего фе >мент начинает двигаться собственно к промотору). [c.154]

Можно лишь рассуждать о том, будет ли справедливым суждение, обратное этому принципу гены, регуляторные участки которых организованы в нуклеосомы, не могут экспрессироваться. Предположим, что образование нуклеосом происходит независимо от последовательности в любом участке ДНК, из которого специально не удалены гистоны. Тогда в отсутствие специфических регуляторных белков промоторы, усилители транскрипции и другие регуляторные участки будут организованы с помощью гистоновых октамеров в такое состояние, в котором они, возможно, не могут быть активированы. (Доказательств существования какого-либо белка, способного удалять гистоны с ДНК, нет.) [c.392]

Энхансер - усилитель транскрипции может действовать, находясь на значительном расстоянии от промотора (до сотен тысяч пар нуклеотидов) и независимо от ориентации относительно промотора. [c.14]

Д. Джолли с соавторами (1983 г.) показали, что встройка в плазмиду, содержащую ген гк вируса герпеса, участка длинного концевого повтора ДНК вируса саркомы мышей (содержит усилитель транскрипции см. 14.1.1) приводит к увеличению частоты образования стабильных клонов трансформантов в 10-20 раз. При этом ориентация и расположение концевого повтора относительно tk не влияют на частоту трансформации. [c.341]

Усилители транскрипции удалось обнаружить у многих других вирусов, а также в геноме [c.357]

Рис. 14.3. Модель функционирования усилителя транскрипции

Опероном назьгаается упорядоченная совокупность структурных генов (со знаками начала и конца) и регуляторных участков. В состав регуляторной зоны оперона входят ген-регулятор, промотор, усилители транскрипции (энхансеры), ослабители транскрипции (сайлансеры) и другие компоненты. [c.36]

Область вируса SV40 или полиомы, окаймляющая чувствительный к нуклеазе пробел, имеет несколько потенциальных функций, и, следовательно, ее нельзя просто считать структурой, активирующей промотор. Наличие пробела может быть связано с последовательностями элементов усилителя транскрипции (энхансер, enhan er), которые находятся в этой области и которые необходимы для функции промотора (гл. И). [c.392]

УСИЛИТЕЛИ ТРАНСКРИПЦИИ (enhan er). Участки ДНК, усиливающие транскрипцию с ряда эукариотических промоторов, находящихся по отношению к ним в t/u -положении. Эти элементы оказывают свое действие независимо от того, с какой стороны промотора они располагаются. [c.527]

Наряду с обычными нуклеотидными последовательностями промоторной и терминаторной областей транскрипции у эукариот обнаружены такие специфические элементы регуляции, как усилители, или энхансеры (enhansers), и глушители (silen ers). Энхансе-ры впервые были найдены в геноме вируса SV 40. Это последовательность длиной в 72 п. н., повторенная тандемно. Она повышает эффективность транскрипции с промоторов вируса, находясь на своем обычном месте, вблизи ori — начала репликации вирусного генома, а также при искусственном перенесении в другие участки этого генома, имеющего размер 5243 п. н. Аналогичные энхансеры обнаружены в геноме млекопитающих. У них отсутствует видимая протяженная гомология. Они действуют как усилители транскрипции, находясь на расстоянии нескольких сот и даже тысяч пар нуклеотидов от регулируемого гена. Механизм действия энхансе-ров может быть связан с изменением нуклеосомной структуры хроматина. [c.424]

Замена в векторах pSV-серии промотора ре вируса SV40 на промотор и усилитель транскрипции из длинного концевого повтора ДНК провируса саркомы Рауса или других ретровирусов приводит к тому, что в ряде культур клеток увеличивается эффективность транскрипции генов at, neo, gpt и, как следствие, повышается частота образования соответствующих стабильных трансформантов. Причем для разных усилителей характерен свой специфичный спектр культур клеток, на которых проявляется их роль активатора транскрипции. [c.349]

Ретровирусы обладают рядом уникальных свойств, что обусловило активное использование их в последние годы в качестве молекулярных векторов. Относительно небольшой геном ретровирусов позволяет довольно просто с ним манипулировать и вводить в его состав чужеродные гены. При этом нет жестких ограничений на размер генома, упаковываемого в вирион, и поэтому удается встраивать экзогенные фрагменты ДНК длиной до 10 тпн. Ретровирусная инфекция обычно приводит к стабильной интеграции единственной копии вирусного генома в ДНК клетки-хозяина. Данные вирусы можно легко нарастить в кулыуре клеток до высокого титра. Ретровирусы способны инфицировать как эмбрионы, так и кроветворные клетки, причем эффективность инфицирования очень велика и достигает в эксперименте практически 100 %. Ретровирусы содержат мощные усилители транскрипции, которые обеспечивают высокий 5фОвень экспрессии клонированных генов в клетках различных типов. [c.400]

Во-вторых, промотор, находящийся в 3 LTR провируса, может направлять транскрипцию соседних генов хозяина. Более того, мощные усилители транскрипции провируса также могут активировать транскрипцию разных (даже удаленных) генов хозяина, включая онкогены. Избежать подобного эффекта удалось, разработав самоинактивирующиеся ретровирусные векторы. Промотор и активатор транскрипции ретровируса расположены в области U3 обоих вирусных LTR (см. рис. 14.38). Для вируса жизненно важной является область U3 в 5 LTR провируса, так как с этого промотора транскрибируется геномная РНК, вирусная РНК содержа единственный участок иЗ в 3 -концевой части молекулы и при обратной транскрипции область иЗ копируется в 5 LTR провируса. В самоинактивирующихся ретровирусных векторах с помощью рестриктаз делетируют основную часть области иЗ в 3 LTR для удаления промотора и усилителя транскрипции. В такой вектор можно поместить целевой ген с любым подстроенным к нему промотором (рис. 14.47). После трансфекции упаковывающих клеток гибридная ДНК интегрируется в хромосомную ДНК, и с провируса транскрибируется как вирусная геномная РНК (с делецией в области иЗ [c.412]

В 1987-1989 гг. в лаборатории В. Геринга разработали метод, позволяющий выявлять тканеспецифичную экспрессию репортерного гена la Z, помещенного в составе Р-элемента под контроль его слабого промотора. Если в результате интеграционной трансформации дрозофилы происходит встройка репортерного гена вблизи тканеспецифичного усилителя транскрипции, то активная экспрессия гена la Z будет происходить именно в этой ткани, что можно выявить при окраске внутренних органов дрозофилы реактивом Xgal. Встроив вместе с репортерным другой целевой ген, можно добиться его тканеспецифичной экспрессии. Та- [c.431]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология