ДНФ-аминокислоты, колориметрия потоке

В обычном аминокислотном анализаторе N -2 сохранен блочный принцип. Прибор снабжают одной или несколькими колонками (0,5X75 см). Анализ белковых гидролизатов может занять 2 ч 30 мин анализ образцов более сложного состава может длиться более 36 ч. Прибор имеет два колориметра, с полосами пропускания при 570 и 440 нм в случае необходимости можно использовать один колориметр с полосой при 410 нм. Полагают, что потерю чувствительности можно многократно перекрыть благодаря непрерывному 10-кратному расширению шкалы, что вообше является конструктивной особенностью этих колориметров. Для достижения максимального разрешения используют также рассечение потока пузырьками азота (что является характерной особенностью анализатора Te ni-соп), хотя новый состав нингидринового реагента, с использованием гидразинсульфата, делает излишним хранение его под азотом. Предел детектирования аминокислот составляет 1 нмоль. [c.325]

Интенсивность окраски реакционной смеси, получающейся при добавлении нингидринового реагента к эффлюенту, измеряется проточным колориметром в условиях постоянной скорости потока жидкости. Возникающее изменение напряжения на фотоэлементе регистрируется самописцем. Обычно выходное напряжение колориметра на самописец составляет О—5 мВ. При максимальном развитии окраски (наивысшая оптическая плотность, ОП) напряжение равно нулю, а при отсутствии, за исключением фона реагентов (фоновая линия), напряжение составляет 5 мВ. Для точной записи результатов хроматографического анализа самописец должен а) точно реагировать только на сигнал фотоэлемента калориметра б) допускать длительную работу с минимальным дрейфом из-за тепловых и электрических помех в) иметь постоянную скорость лентопротяжного механизма для обеспечения точной идентификации пиков по времени. Если запись на самописце производится на диаграммной бумаге с линейной шкалой, то для расчета пиков аминокислот или пептидов необходим шаблон с нанесенной сеткой ОП. Если самописец снабжен диаграммной бумагой со шкалой в единицах ОП или логарифмической шкалой, величина поглощения находится непосредственно. Другими вспомогательными элементами, которые связаны с записью анализа и считаются составными частями системы регистрации, являются устройства, осуществляющие расширение шкалы, логарифмирование сигнала, интегрирование пика, а также цифропечать и связь с ЭВМ. Расширение шкалы представляет собой метод, по которому вся шкала самописца может быть легко заменена с О—5,0 мВ на 4,0—5,0 или 4,5— [c.32]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология