Химический инициирование реакционной смес

Секвенирование ДНК по Сэнгеру. Это наиболее употребительный метод секвенирования ДНК, поскольку по сравнению с химическим методом он позволяет анализировать более крупные фрагменты ДНК с меньшей вероятностью ошибки. Секвенируемую ДНК сначала клонируют в одноцепочечный бактериофаговый вектор, который может функционировать в Е. соН. Чаще всего используют фаг М13 и его производные [13]. Одноцепочечная ДНК взаимодействует как субстрат с ДНК-поли-меразой, которая точно копирует первую цепь. Однако если нормальный дезокси-нуклеозидфосфат заменить его аналогом-дидезоксинуклеозидфосфатом, то дальнейшее функционирование полимеразы прекращается и рост синтезируемой цепи останавливается. Для инициирования этого процесса используют химически синтезированный универсальный нуклеотидный праймер. Реакцию проводят в присутствии четырех аналогов dNTP, один из которых содержит метку Р. Исходно имеется четыре реакционные смеси, в каждой из которых понижена концентрация одного из аналогов меченого нуклеотида. Поэтому в результате реакции получаются смеси меченных радионуклидами фрагментов ДНК, один конец у которых одинаков, но при этом они имеют разную длину и разные основания на другом конце. После инкубации ДНК в каждой смеси превращается в одноцепочечную форму. Затем смеси подвергают электрофорезу в полиакриламидном геле. Длину и последовательность фрагментов ДНК можно считывать непосредственно с гелевого слоя. Этот метод позволяет секвенировать в одной серии реакции от 250 до 500 пар оснований. Полученные данные часто анализируют с помощью компьютера. [c.95]

В первых двух главах книги читатель найдет основные определения полимеров рассматриваемых типов и, пожалуй, чрезмерно краткое описание методов выделения привитых и блок-сополимеров из реакционной смеси. Основной материал книги распределен в последующих главах в соответствии со способом инициирования, приводящим к получению того или иного сополимера. Помимо разнообразных чисто химических методов инициирования, описываются также приемы синтеза привитых и блок-сополимеров при помощи фотохимических реакций, ионизирующих излучений и механической деструкции. [c.5]

Константы скорости инициирования и роста цепи (к , кр) составляют не ниже 10 -ь 10 л/(моль-с) [255-259], что при реальных исходных концентрациях катализатора и мономера определяет характерное время химической реакции 10 10 с. Это означает, что полимеризация ИБ протекает в основном на расстоянии менее 1 10 см от места ввода катализатора и процесс лимитируется смешением катализатора, мономера и реакционной массы. Накопление в реагирующей системе тепла при высокой турбулентности движения реакционной смеси приводит к колебательному изменению температуры в зоне реакции во времени [255]. Поэтому термостатирование процесса полимеризации ИБ, как и других весьма быстрых химических процессов, не только в промышленном производстве, но и в лаборатории представляет значительные трудности. Ввиду неизотермичности наблюдается изменение ММ и ММР полиизобутилена в ходе процесса по длине реакционной зоны [107, 255-257, 259-262 . [c.112]

Факторы, обусловливающие инициирование в реакциях присоединения по Харашу, чрезвычайно важны для определения выходов и для выбора условий реакции. Методы инициирования, т. е. введения свободных радикалов в реакционную смесь, можно подразделить на три общих типа (1) химическое инициирование, (2) фотоинициирование и (3) облучение частицами с высокой энергией. Преимущество хилшческих инициаторов обусловлено легкостью обращения с ними и простотой аппаратуры, однако их недостатком является то, что они требуют высоких температур и могут вступать в побочные реакции. Фотоинициирование и инициирование облучением частицами с высокой энергией не зависят от температуры и не нуждаются в добавлении к реакционной смеси химических реагентов. Но они требуют более сложной аппаратуры. [c.126]

В принципе такое инициирование реакции полимеризации аналогично обычному химическому инициированию, которое часто применяют в промышленных процессах получения полимерных материалов. Обычно для создания какой-то минимальной концентрации радикалов к реакционной смеси добавляют вещества, которые при нагревании разлагаются с образованием радикалов. Эти вещества — главным образом перекисные соединения. Уже при небольшом нагревании молекула перекиси раскалывается на два радикала. Кстати, нагревание — одна из самых известных и широко распространенных причин образования радикалов. В любой подгоревшей корке хлеба всегда больше радикалов, чем в обычном, не подгоревшем хлебе. [c.50]

В ряде работ [397, 398] показано, что размягчение стекол независимо от их химического состава и температуры происходит при вязкости, равной примерно 1012 Па-с. Таким образом, можно считать, что инициирование цепного гидробромирования хлористого аллила стабилизированными активными центрами происходит в узком интервале температур при значениях вязкости порядка 1012 Па-е. Последующее резкое возрастание скорости реакции связано в основном со снижением вязкости в результате саморазогревания смеси. При этом, как и в случае низкотемпературного фотохимического гидробромирования этилена, важную роль, по-видимому, играет соотношение скоростей теплоприхода за счет реакции и теплоотвода из образца через стенки реакционного сосуда. [c.112]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология