Политимидиловая кислота

Этот прием кажется весьма удобным с практической точки зрения, хотя пока кратко сообщалось только об использовании его при изучении распада синтетического гомополимера — политимидиловой кислоты, и поэтому о его реальном значении трудно еще судить. [c.254]

Спектры действия образования и разрушения димеров в политимидиловой кислоте, как и следовало ожидать, близки по форме к соответствующим спектрам поглощения, хотя и имеют некоторые различия, о которых мы будем говорить ниже. [c.229]

В настоящее время основным методом разделения олигонуклеотидов является гель-проникающая хроматография на гелях декстрана и агара. Так, гель-хроматографию на сефадексах G-15, G-25 и G-75 (в 0,1 М растворе бикарбоната триэтиламмония с рн 7,5) применяют для разделения промежуточных продуктов в синтезе политимидиловой кислоты и выделения конечного [c.89]

Первое условие, очевидно, выполняется в поли-dT и d(TpTp)-последовательностях в ДНК. Второе зависит от ряда факторов и прежде всего от конформации полинуклеотида и, следовательно, от температуры. УФ-Облучение политимидиловой кислоты в водном растворе при комнатной температуре приводит к фотодимеризации соседних нуклеозидных звеньев закономерности этой димеризации аналогичны таковым для динуклеозидфосфатов, однако квантовый выход образования фотодимеров вдвое выше (0,02— 0,03) >7,338 Начальная скорость низкотемпературной фотодимеризации поли-dT при 77° К приблизительно в 5 раз выше, чем при комнатной температуре (см. стр. 651). Однако конечное количество фотоднмеров в 4 раза меньше 7 , что, вероятно, объясняется малой долей тиминовых ядер, ориентированных благоприятно для димеризации при 77° К. При УФ-облучении замороженных растворов ДНК при 77° К только 0,65% тиминовых звеньев переходит в димерные фрагменты, а при комнатной температуре — уже около 20% 75. При низкой температуре сшивки между цепями практически не образуются (см. ниже). Следует отметить, что понижение температуры влияет не только на степень фотодимеризации, но и на характер получающегося продукта. В этих условиях в ДНК из Е. соИ наряду с димерными фрагментами циклобутановой структуры образуются заметные количества тиминовых димерных фрагментов нециклобутанового типа(см. также стр. 652). [c.656]

Описан родственный метод, основанный на образовании специфического комплекса с молекулами, имеющими относительно короткие цепи [563]. Этерификацией гидроксильных групп целлюлозы концевыми 5 -фосфатными остатками смеси политимидиловых кислот с небольшой длиной цепи при помощи дициклогексилкарбодиимида было достигнуто ковалентное связывание этих олигонуклеотидов с целлюлозой. При 4° гекса(дезоксиадениловая кислота) удерживалась колонкой и, таким образом, могла быть отделена от гекса(тимидиловой кислоты) олигоадениловая кислота элюировалась при 35°. Этим методом возможно фракционирование транспортных РНК [563]. [c.371]

Первоначально предпочтение было отдано первому методу. В частности, проведен ступенчатый синтез гомоолигодезоксинуклеогидов, например политимидиловой кислоты, путем последовательного присоединения к З -гидроксилу растущей цепи -фосфатного остатка З -ацетилтимидина [c.400]

При исследовании механизма реакции было выяснено, что ДНК играет роль матрицы, на которой осуществляется построение полирибонуклеотидной цепи нуклеотидный состав синтезированной РНК целиком соответствует составу ДНК и не зависит от соотношения вводимых в реакцию нуклеозидтрифосфатов Синтез РНК при участии РНК-полиме-разы носит комплементарный характер. Например, при использовании в качестве ДНК-матрицы гомополимера политимидиловой кислоты синтезируется полиадениловая кислота. В качестве матрицы в условиях in vitro могут функционировать как двух,- так и однотяжевые ДНК. При использовании двухтяжевой ДНК синтез РНК in vitro осуществляется на обеих цепях, т. е. копируются обе цепи ДНК, причем цепи строящейся РНК и ДНК-матрицы обладают противоположной полярностью. Синтез РНК на однотяжевой ДНК-матрице [c.443]

Как и при всякой ферментативной реакции, между ферментом и субстратом (облученной ДНК, или синтети-ческим полинуклеотидом) в темноте образуется устойчивый комплекс, который может быть выделен путем ультрацентрифугирования или гельфильтрации. Размеры сорбционного центра фермента достаточно велики, поскольку фрагменты политимидиловой кислоты, содержащие менее девяти мономеров, с ним не комплексируют. В отличие от обычных ферментативных реакций каталитический акт в фермент-субстратном комплексе фотореактивирующий энзим — облученная ДНК не протекает без видимого света, т. е. фермент работает в электронно-возбужденном состоянии. Прн постоянной интенсивности света реакция мономеризации подчиняется кинетическому уравнению Михаэлиса — Ментена [c.295]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология