Аминекс в ионообменной хроматографии

Природные нуклеозиды разделяют ионообменной хроматографией в условиях, описанных ранее для фракционирования оснований, например на смоле дауэкс 1 в формиатной форме при элюировании формиатом аммония с pH 10,2 [73, 74] или на дауэкс 50 в нуклеозидном анализаторе [52]. Наилучшие результаты получены [75] при разделении нуклеозидов за счет ионной эксклюзии (исключения ионов) на колонке с катионитом аминекс А-6 [75] (рис. 37.7). В случае элюирования боратом натрия или калия (с концентрацией Ю- —Ю- М) при pH 8— 10 соединения, имеющие цыс-диольную группировку, образуют боратный эфир и приобретают вследствие этого дополнительный отрицательный заряд, что создает благоприятные условия для ионообменного разделения. При разделении рибонуклеозидов на сильном анионите (в боратной форме) в градиенте концентрации боратного буферного раствора (pH 9,2) и раствора хлорида натрия (0,01—0,1 М) компоненты смеси элюируются в следующем порядке цитидин, аденозин, уридин, гуанозин [76]. [c.47]

Рис. 3.25. Экспериментально установленные зависимости удерживания от величины pH для некоторых нуклеиновых оснований (а) и нуклеозидов (б) в условиях ионообменной хроматографии [71] (с разрешения авторов). Неподвижная фаза аминекс А-28 подвижная фаза 5 мМ цитрат и 5 мМ фосфат в смеси этанола с водой (1 1, по объему) температура колонки 70 °С.

Катионообменные смолы имеют преимущество перед анионообменными смолами, так как в промышленности они легко получаются в виде мельчайших однородных частиц (благодаря чему их используют в аминокислотных анализаторах). Наиболее часто используются дауэкс 50 / -Х8, амберлит 1К-120, аминекс (Ат1пех) А-6 и техников (ТесЬшсоп) Т5С, техникой Т4 или дауэкс 1-Х8 с величинами частиц в пределах 5—20 мкм. В качестве противоионов обычно используют литий-, натрий-, калий-, барий-, кальций-, сульфат- и хлорид-ионы. Из изученных типов смол наиболее благоприятное разделение многоатомных спиртов получалось при использовании литиевой формы (рис. 22.1) (о методике этого разделения см. разд. V, А, Хроматография на ионообменных смолах). В последнее время стали использовать противоионы органических оснований, такие, как пиперидиний и метил-, диметил- и триметиламмоний [26]. Применение иона триметиламмония давало оптимальное соотношение между объемами удерживания, шириной хроматографических зон и временем анализов. [c.64]

Разделение первичных аминов, диаминов и полиаминов на ионообменных колонках с сорбентом типа аминекс с использованием несколько измененной аппаратуры, обычно применяемой для автоматического анализа аминокислот, показало, что жидкостная колоночная хроматография, по-видимому, является в настоящее время наиболее перспективным способом разделения [c.267]