Флуоресцеин в методе флуоресцентных антител

Очень широкое применение нашли производные флуоресцеина и родамина в иммуноцитохимии. Для этой цели используют реакции флуоресцентных метчиков с белками-антителами и затем по люминесценции метчика судят о путях распространения антител в организме. Впервые метод флуоресцентной метки антител был описан Кунсом й др. [19], предложившими в качестве метчика флуоресцеин-изоцианат. В дальнейшем для метки белков были предложены и [c.291]

Метод флуоресцентных антител с использованием флуоресцеина [c.208]

Пример 2-3. Метод флуоресцентного антитела, С антителами, полученными против частей клеток или белков, может ковалентно связываться флуоресцеин (рис. 2-20). Прибавление такого флуоресцентного антитела к тонким срезам тканей или к клеткам, которые в результате обработки кислотой или ацетоном стали проницаемыми для белка, позволяет локализовать эти вещества. Например, вирусные антигены, компоненты клеточных мембран, гистоны и многие другие вещества можно локализовать этим методом в отдельных клетках или тканях. Белки мышечных волокон, актин и миозин, можно надежно различить при использовании антиактина и антимиозина со связанным флуоресцеином. [c.55]

Лиганд (например, сАМР или прогестерон) ковалентно связывают с хемилюми-несцирующим соединением (АВЕ1), а антитело делают флуоресцирующим, присоединяя к нему флуоресцеин. Перенос энергии определяется уравнением Ферстера, которое предполагает сближение донора и акцептора на близкое расстояние (около 50 А) [26]. Таким образом, связанный изолюминол излучает зеленый свет, а свободный сохраняет характерное для него голубое свечение. В данной системе можно использовать различные фильтры (полосы излучения достаточно широки), но лучшие результаты получаются при соотношении 460/525 нм. Принцип данного метода заключается в следующем. Антиген (А ) метят хемилюминесцирующим соединением (С), а антитело (АЬ) - флуоресцентным акцептором (Р). При вытеснении А —С определяемым веществом (в данном случае антигеном А и)) неизвестной концентрации расстояние между С и Р становится слишком большим для переноса энергии, так что связанный и свободный антиген легко различимы. [c.498]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология