Изолюминол

Схема 7.9-3. Модифицированная карбодиимидная реакция для конъюгата изолюминола через свободную карбоксильную группу. [c.593]

Субстратные метки. Кроме ферментов в качестве маркеров могут быть использованы субстраты. В частности, в иммуноко-факторном анализе применяются в качестве меток АТФ и НАД. которые могут быть пришиты к молекуле антигена через адени-новый остаток таким образом, что сохраняется их способность взаимодействовать с ферментом. Аналогично были использованы субстраты пероксидазы (люминол, изолюминол), которые могут быть окислены пероксидом водорода в реакции хемилюминесценции, катализируемой пероксидазой. [c.113]

Значительно более широкое применение в качестве маркеров получили производные изолюминола. Описано использование конъюгатов с производным изолюминола—[М-аи1Ы об /гыл-(Ы-этил)- [c.139]

Преимущества метода — сокращение времени регистрации (до 5 с) по сравнению со спектрофотометрическим вариантом ИФА, высокая чувствительность—1 нг/мл. Производные изолюминола ковалентно связываются с белком с помощью, бифункциональных реагентов (водорастворимых) и водонерастворимых карбодиими-дов. Очень часто химически модифицируют с получением активированного эфира АВЕ1, который затем ковалентно связывается с молекулой белка. [c.140]

АВЕ1 как маркер потенциально обладает рядом преимуществ, позволяющих на основе этого маркера разрабатывать высокочувствительные методы иммуноанализа. Данные по использованию изолюминола как маркера приведены в табл. 4.11. [c.140]

В литературе описан также гомогенный вариант ХИА с использованием конъюгатов биотин — изолюминол. При взаимодействии этого конъюгата с авидином в двух окислительных систе- [c.141]

Таблица 4.11. Использование производных изолюминола в хемилюминесцентном иммуноанализе

Производные изолюминола широко используются при количественном определении стероидов методами как гомогенного, так и гетерогенного иммуиоанализа. [c.141]

Процесс получения конъюгатов стероидов с хемилюминесцент-ным маркером включает два основных этапа 1) модификацию стероида — введение в молекулу стероида карбонильной группы, ее активацию в присутствии карбодиимида и М-Оксисукцинимида с образованием активированного эфира 2) реакцию активированного эфира стероида с аминогруппой производного изолюминола [c.141]

В основе гомогенного хемилюминесцентного иммуноанализа стероидов лежит эффект усиления интенсивности хетилюминес-ценции при взаимодействии конъюгата стероид — изолюминол с антителами. Введение в эту систему свободного стероида ингибирует излучение, которое пропорционально концентрации добавленного стероида. Указанный принцип использован при разработке методов определения прогестерона, эстриол-16-глюкоронида, эст-риола. Несмотря на то что чувствительность этих методов сопоставима с РИА (5—10 мг), в ряде случаев собственная неспецифическая хемилюминесценция образца (плазмы или мочи) ограничивает возможности метода, затрудняет определение низких концентраций. [c.142]

Таким образом-, использование производных изолюминола в качестве меток имеет ряд преимуществ простота получения меченых соединений, высокое отношение полезного сигнала к фоно-вому высокая точность и воспроизводимость результатов измерения. [c.142]

Люминол и изолюминол диазотируют в мягких условиях, и полученное диазопроизводное взаимодействует с тирозиновыми и триптофановыми остатками антител [c.197]

Лиганд (например, сАМР или прогестерон) ковалентно связывают с хемилюми-несцирующим соединением (АВЕ1), а антитело делают флуоресцирующим, присоединяя к нему флуоресцеин. Перенос энергии определяется уравнением Ферстера, которое предполагает сближение донора и акцептора на близкое расстояние (около 50 А) [26]. Таким образом, связанный изолюминол излучает зеленый свет, а свободный сохраняет характерное для него голубое свечение. В данной системе можно использовать различные фильтры (полосы излучения достаточно широки), но лучшие результаты получаются при соотношении 460/525 нм. Принцип данного метода заключается в следующем. Антиген (А ) метят хемилюминесцирующим соединением (С), а антитело (АЬ) - флуоресцентным акцептором (Р). При вытеснении А —С определяемым веществом (в данном случае антигеном А и)) неизвестной концентрации расстояние между С и Р становится слишком большим для переноса энергии, так что связанный и свободный антиген легко различимы. [c.498]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология