Реакции флуоресцентные

Очень широкое применение нашли производные флуоресцеина и родамина в иммуноцитохимии. Для этой цели используют реакции флуоресцентных метчиков с белками-антителами и затем по люминесценции метчика судят о путях распространения антител в организме. Впервые метод флуоресцентной метки антител был описан Кунсом й др. [19], предложившими в качестве метчика флуоресцеин-изоцианат. В дальнейшем для метки белков были предложены и [c.291]

Анализ. Обычно анализ а-А. основан на взаимод. с нин-гидрином, в результате к-рого А. расщепляется до альдегида, СО2 и NH3, а NH3 образует с нингидрином фиолетовый краситель. Для количеств, определения измеряют объем выделившегося Oj или, чаще, фотометрируют образующийся краситель. Последний метод используется в автоматич. хроматографах, позволяющих разделять на сульфокатионитах и количественно анализировать сложные смеси аминокислот и пептидов. Еще более чувствителен флуоресцентный анализ продуктов реакции А. с о-фта-левым диальдегидом. Быстро развивается лигандообменный хроматографический анализ А. и пептидов на си-ликагельных сорбентах в присутствии ионов меди. Бумажная и тонкослойная хроматография чаще используются для качественного анализа. Измерение объема N3, выделяющегося при дезаминировании А. азотистой к-той, а также титрование А. щелочью в избытке формалина (методы Ван Слайка и Сёренсена) сохранили лишь историческое значение. [c.138]

Применение люминесценции для аналитических целей включает широкую область использования ее для идентификации веществ, для обнаружения малых концентраций веществ для контроля изменений, претерпеваемых веществом для определения степени чистоты веществ. Широко применяются измерения люминесценции при изучении кинетики обычных химических реакций. Высокая чувствительность метода позволяет фиксировать малую степень превращения, а иногда по люминесценции промежуточных соединений становится возможным установить механизм химической реакции. Люминесцентные методы используются в биологии, в частности, для исследования структуры белков методом флуоресцентных зондов и меток. [c.49]

Принцип метода РФС заключается в следующем. В исследуемой системе (смеси газов) генерируются тем или иным способом атомы или свободные радикалы. Светом зондирующего источника исследуемые частицы переводятся в возбужденное состояние. Зондирующий источник настроен на длину волны, вызывающую возбуждение. Переход из возбужденного состояния в основное сопровождается излучением (флуоресценцией), что используется для контроля за изменением концентрации этих частиц во времени. Установка включает реактор и соединенные с вакуумной системой СВЧ-генератор для генерирования атомов в разряде, источник зондирующего излучения, приемник возникающей флуоресценции, фильтры и монохроматоры. Источником зондирующего излучения могут быть перестраиваемые лазеры и струевые разрядные лампы. Они охватывают диапазон длин волн от глубокого ультрафиолета до коротковолновой инфракрасной области. Для регистрации флуоресценции используются фотоумножители и счетчики Гейгера. Для кинетических измерений резонансно-флуоресцентная спектроскопия может быть применима в трех различных вариантах, Во-первых, в статических условиях, когда атомы и радикалы генерируются реакционной смесью. В таком варианте РФС-метод предназначался для изучения цепных разветвленных реакций горения водорода и фосфора. Во-вторых, РФС-метод часто используется в струевых условиях в сочетании с СВЧ-разрядом. Это позволяет измерить концентрацию атомов и радикалов и изучать их реакцию с реагентом-газом в объеме или гибель на поверхности. Этим же способом изучаются продукты той или иной элементарной реакции. В-третьих, РФС-метод применяется в сочетании с импульсным фотолизом. Максимальное значение константы скорости бимолекулярной реакции, измеряемой [c.359]

Когда говорят о люминесцентном (или о флуоресцентном) методе анализа, под этим обычно понимают фотолюминесценцию. Различают обычно две группы методов анализ по непосредственному наблюдению люминесцирующего материала и анализ, основанный на переведении определяемого компонента в люминесцирующее соединение. Вторая группа методов люминесцентного анализа близка к фотометрическому анализу. Известно немало случаев, когда один и тот же реактив может быть применен для определения одного и того же элемента как фотометрическим, так и люминесцентным методом. В обоих случаях необходимо перевести определяемый компонент в соединение, которое, возможно, более сильно поглощает свет. При фотометрическом анализе измеряют непосредственно ослабление интенсивности светового потока. Для люминесцентного же анализа эту реакцию можно использовать только в том случае, если значительная часть поглощенной энергии выделяется не в виде тепла, а в виде света. Естественно, что это явление более редкое, поэтому в общем число люминесцентных методов меньше, чем фотометрических. В то же время люминесцентные методы при некоторых условиях более чувствительны по сравнению с фотометрическими. [c.354]

Титриметрические Цветные реакции в растворе Флуоресцентные [c.526]

Цель первой части работы — обнаружение на молекуле ЛДГ участков, способных к взаимодействию с аурамином О демонстрация чувствительности флуоресцентных характеристик связанного аурамина О к взаимодействию ЛДГ с коферментом, субстратом и ингибитором реакции определение значения константы диссоциации (/Сд) комплекса НАД—ЛДГ по флуоресценции аурамина О. [c.340]

Алюминий открывают по цветным реакциям с ализарином [115, 762] и с рядом других реагентов и по флуоресцентным реакциям с морином [1048], с понтахром сине-черным Н и др. [c.29]

Из солохромовых красителей [712, 1247], которые могут быть использованы для обнаружения галлия, особенно пригоден понта-хром сине-черный К [1245]. В табл. 12 приведены реакцил флуоресцентного открытия 1яллия некоторыми триоксиазокраси-телями (мешают многие катионы). Для всех соединений установлена чувствительность открытия галлия непосредственно в водном растворе и после извлечения образовавшегося комплекса равным объемом изоамиловою спирта. Оптимальное значение pH раствора 3,5. Все эти соединения не дают флуоресценции в отсутствие галлия. [c.35]

Фотометрические методы, использующие цветные реакции комплексообразования и окисления — восстановления, а также реакции флуоресцентные и каталитические, были описаны для определения в германии и его двуокиси всех главнейших примесей. Особое внимание уделялось определению одной из вреднейших примесей — мышьяка, который является обычным спутником германия в процессе получения последнего. Отделение этой примеси от германия производили экстракцией хлороформным раствором дизтилдитиокарбамината диэтиламмония из солянокислого раствора, содержащего щавелевую кислоту для связывания германия в комплекс. Определение производили электролити- [c.111]

Пример 6. В недавней работе Хироми с сотр. [9] провели исследование множественной атаки с помощью флуоресцентного метода регистрации деструкции амилозы со средней степенью полимеризации 17 под действием панкреатической свиной а-амилазы. Авторы обнаружили, что при низких значениях pH (6,9 и ниже) короткие олигосахариды О], Ог образуются в больших количествах, чем при высоких pH (до 10,5) и, напротив, длинные олиго-сахарнды 64, 65 доминировали при pH 10,5 по сравнению с pH 6,9. Следовательно, в распределении продуктов реакции по степени полимеризации происходит изменение в зависимости от pH. [c.84]

Флуоресцентные измерения обладают рядом преимуществ в сравнении с абсорбционными. В частности, оптическое поглощение промежуточного продукта, содержащегося в низкой концентрации, вызывает незначительное изменение относительно большой интенсивности зондирующего пучка. Шум , получающийся вследствие случайных флуктуаций интенсивности света, а также из-за статистической природы пучка фотонов, ограничивает чувствительность, достижимую в абсорбционном эксперименте. В люминесцентном эксперименте, напротив, нет излучения кроме того, которое испускается возбужденными соединениями. Статистические ограничения продолжают лимитировать точность, с которой могут измеряться концентрации, но достижимая на практике предельная чувствительность люминесцентного эксперимента обычно значительно выше, чем абсорбционного. По этой причине люминесценция часто используется для изучения веществ, первоначально находящихся в основном состоянии, путем специального оптического возбуждения их в более высокое люминесцентное состояние. В отдельных случаях описанные ранее линейчатые газооазоядные. лям-пы могут использоваться для возбуждения резонансной флуоресценции атомов (например, Н, О, С1) и радикалов (например, ОН). Поскольку флуоресценция изотропна, ее можно регистрировать под углом к направлению возбуждающего пучка. С большим успехом в качестве источника возбуждения можно использовать перестраиваемые лазеры. Лазеры обеспечивают существенно большую гибкость эксперимента, чем газоразрядные лампы. В частности, с их помощью можно возбуждать значительно большее число разнообразных молекулярных частиц (например, ОН, КОз, СН3О, С2Н5О). Более высокая мощность возбуждающего излучения от лазеров обеспечивает высокую чувствительность. Индуцированная лазером флуоресценция (ИЛФ) стала наиболее ценной методикой изучения промежуточных продуктов реакций в газовой фазе. При этом по- [c.196]

Флуоресцентная реакция с 8-оксихинолином. Катионы лития образуют в растворе с 8-оксихинолином sH NOH продукт реакции красного цвета (по-видимому, оксихинолинат лития sHsNOLi), который в УФ-излучении флуоресцирует голубым светом. [c.346]

Значительная часть (около 99%) ионизирующих излучений, падающих на пленку, свободно проходит через нее, не вызывая в фотоэмульсии никаких фотохимических реакций. Для улучшения качества снимков и сокращения времени экспозиции применяют металлические и флуоресцентные экраны. Усиливающее действие металлических экранов определяется вторичными элек- [c.126]

Гетерог. фон связан с генерированием аналит. сигнала (напр., вследствие рассеяния электронов, флуоресцентного возбуждения) в соседней с анализируемой фазе. Величина сигнала - ф-ция расстояния от границы между фазами. Наиб высокие систематич. погрешности могут возникать, если концентрация определяемого элемента в соседней фазе существенно больше, чем в анализируемой Фазовая интенсивность обусловлена резким измененнем аналит. сигнала в соседних фазах (слоях), к-рое возникает вследствие различия в специфич. эмиссионных характеристиках этих фаз (как, напр., в случае реакц. эмиссии вторичных ионов) и не зависит от содержания определяемого элемента в них. Систематич погрешности при этом устраняют расчетными или эксперим. приемами. [c.610]

Нами разработана методика получения 8-(п-толуолсульфо-ниламино)-хинолина, пригодного для флуоресцентного анализа. Наилучшие результаты получены при проведении реакции в среде пиридина и применении небольшого избытка (5—10%) -тол уол сул ьфо.хло р и да. [c.67]

Индикаторный переход изученных комплексонов в ряду бис-(триазиниламино) стильбена (2.3.71—2.3.74), а также побочных (2.3.75, 2.3.76) и промежуточного (2.3.77) продуктов реакции их получения идентичен. Следует отметить, что флуоресцентный комплексон 2.3.78 несимметричной структуры не обладает рН-индикаторными свойствами. [c.281]

Энзиматический метод секвенирования основан на энзиматическом введении нуклеотида, терминирующего полинуклеотидную цепь (рис. 5.4). В этом случае обычно используют дидезоксирибо-нуклеозидтрифосфаты, в которых дезоксирибоза-З -ОН, представленная в нормальных нуклеотидах, отсутствует. Такой модифицированный нуклеотид, внедряясь в цепь ДНК с помощью ДНК-полимеразы, блокирует присоединение следующего нуклеотида. Синтез in vitro молекулы ДНК в присутствии затравки (праймера) и небольшого количества одного из таких модифицированных нуклеотидов приводит к образованию фрагментов ДНК в виде лесенки . Если для получения таких фрагментов применять меченую ДНК (обычно проводят четыре реакции синтеза с использованием различных нуклеотидов, терминирующих цепь), а электрофоретический анализ проводить на четырех дорожках геля, то можно определить последовательность нуклеотидов. В настоящее время используют модифицированный метод, сводящийся к флуоресцентному анализу наборов фрагментов ДНК в процессе движения по одной дорожке геля. [c.109]

Построив график зависимости флуоресцентного сигнала от концентрации глюкозы (рис. 7.8-17,п), обнаружим, что при [Аобщ] > 20 мМ концентрация а становится нечувствительной к изменению [Аобщ]., Рис. 7.8-17,в предсказывает величину сигнала на основе уравнений 7.8-30 и 7.8-31 и приведенных выше значений (а общ]. Кв.-, Ка и (Вробщ]. Можно видеть, что предсказанный диапазон для сенсора составляет 0,5мМ глюкозы. Ряд факторов могут давать вклад в столь значительное отклонение. Модель основана на гомогенной реакции. Ранее в разделе Теоретические основы планирования иммобилизации (см. с. 522) было отмечено, что гетерогенные реакции, включая взаимодействия на поверхности, имеют кинетику, которая может быть функцией заполнения поверхности, и что на Квг и Ка, вероятно, оказывает влияние общая концентрация сахара ([а 5щ] + [Аобщ]). Модель также должна рас- [c.554]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология