Флуоресцеин и его производные

Очень широкое применение нашли производные флуоресцеина и родамина в иммуноцитохимии. Для этой цели используют реакции флуоресцентных метчиков с белками-антителами и затем по люминесценции метчика судят о путях распространения антител в организме. Впервые метод флуоресцентной метки антител был описан Кунсом й др. [19], предложившими в качестве метчика флуоресцеин-изоцианат. В дальнейшем для метки белков были предложены и [c.291]

В 6-й группе находятся ассоциаты комплексных анионов или катионов кадмия с производными антипирина, с бруцином, галоидопроизводными флуоресцеина, тетрафениларсонием или фосфонием, с трифенилметановыми красителями, с хинином с комплексами железо — дипиридил и медь — этилендиамин. [c.31]

Влияние указанных заместителей аналогично их влиянию при образовании ангидридов янтарной и глутаровой кислот [57]. Флуоресцеины, представляющие собой производные малеиновой (XVI, R = Н) [83] и цитраконовой (XVI, Н = СНз) кислот, несмотря на наличие окраски, рассматриваются как лактоны [84]. [c.387]

Поскольку флуоресцеин, как и другие адсорбционные индикаторы является слабой кислотой, важно строго поддерживать необходимый pH раствора. При pH=7 доля анионной формы индикатора слишком мала для получения заметного перехода окраски. Однако для растворов с более низким pH можно использовать производные флуоресцеина, являющиеся более сильными кислотами. Например, в интервале pH от 4 до 10 можно применять дихлорфлуоресцеин. [c.350]

Красящие вещества, содержащие бром. К ним относятся главным образом красящие вещества группы флуоресцеина и все их галогенированные формы. Флуоресцеин является производным ароматического углеводорода - флуорена. Бромные красители используются, в частности, в качестве красящих веществ в губных помадах. В связи с их плохой растворимостью, в основную массу добавляют особые бромные растворители , например касторовое масло. [c.127]

Опубликован и ряд других работ, в которых использована методика Вебера. Лоуренс [32] применил второй из указанных методов получения комплексов и с помощью его исследовал адсорбцию молекул различных флуоресцирующих соединений (производные 1- и 2-нафтиламина, производные акридина, флуоресцеина и родамина) на белковых молекулах. Из измерений поляризации и интенсивности люминесценции свободных и адсорбированных молекул красителей он определил относительное число связанных молекул и отсюда—константу диссоциации комплексов белок— краситель. Проведя сравнительные исследования на флуоресцирующих красителях с различной структурой, автор получил ряд сведений о механизме адсорбции молекул красителей на белковых молекулах. [c.340]

Для флуоресцеина, родамина и их производных характерно концентрационное тушение. Изучению его причин посвящено большое число работ. В частности, считается, что с ростом концентрации увеличивается вероятность появления димеров. Безызлучательная дезактивация энергии возбуждения может происходить за счет образования в возбужденном состоянии эксимеров или за счет димеров, уже существующих в растворах до возбуждения [70]. Спектр флуоресценции с ростом концентрации смещается в длинноволновую область. [c.135]

Фе1юлфталеин, флуоресцеин, производные дифенол- и дирезорцинизатина " и другие оксисоединения трифенилметанового ряда меркурируются в фенольное кольцо в спиртовом, водном, часто щелочном растворе при кипячении в течение нескольких часов. В большинстве случаев меркурирование происходит в ортоположение к гидроксилу. [c.42]

Производные флуоресцеина, в которых атомы водорода замещены галоидами и другими группами, обладают ценными крася-щигаи свойствами. Простейшим из таких производных флуорес- [c.478]

Интересные результаты получены при изучении производных флуоресцеина, содержащих вместо иминодиацетатных групп глициновые (бисглицинметилендихлорфлуоресцеин) и метилгли-циновые группы (метилкальцеин) (2.3 44) [1]. [c.270]

Наиболее распространенные флуорофоры, используемые напрямую в качестве меток, традиционно являются производными флуоресцеина и родамина в первом случае при присоединении метки в качестве активного интермедиата часто исполь ют взотиоцианатное производное. Длины волн возбуждения/испускания этих меток хорошо подходят для большинства флуориметров (рис. 7.9-12), хотя их положение и малый стоксов сдвиг делают затруднительным ва )ждение недорогих диодных источников возбуждения, которые можно было бы использовать для создания небольшого специализированного прибора. [c.588]

Поглощение в УФ-свете. Пуриновые и пиримидиновые производные в УФ-свете проявляются в виде темных пятен на слегка флуоресцирующем фоне бумаги. Это наиболее чувствительный метод обнаружения (1 мкг), он позволяет локализовать вещество без химической модификации. Следует защищать глаза от действия УФ-света. Локализацию веществ на хроматограмме можно наблюдать визуально или фотографировать контактным методом. Если в качестве растворителей использовались фенол или коллидин, их следует сначала удалить многократным промыванием эфиром. В случае барбитуровых кислот используют предварительное опрыскивание 0,5 М NaOH. Чтобы увеличить фоновую флуоресценцию, а следовательно, и контрастность, можно использовать опрыскивание 0,005%-ным флуоресцеином в 0,5 М растворе NHj. Однако это не рекомендуется делать, если вещество предполагается элюировать с бумаги для последующей спектрофотометрии. [c.412]

Реакции замещения. При помощи различных реакций замещения было получено значительное число производных флуоранов и флуоресцеинов, [c.395]

Для люминесцентной метки белков применяют флуорохромы изоцианат и изотиоцианат флуоресцеина, некоторые производные родамина, в том числе изоцианат тетраметилродамина, хлорид диметил-нафтил-ами-но-сульфокислоты и ядерный красный прочный. Наиболее широко используется изоцианат флуоресцеина. Его растворяют в смеси диоксана с ацетоном и в таком виде соединяют с белком (обычно глобулиновой фракцией в количестве 5 мг флуорохрома на 100 мг белка) при температуре О—5° С, перемешивая в течение 18 часов. Полученный коньюгат белка с флуоресцеином освобождают от несвязавшегося красителя сначала с помощью диализа против забуференного при рН=9,0 физиологического раствора. Дальнейшая очистка от избыточного красителя производится переосаж-дением белка сульфатом аммония (4—5 раз), пока надосадочная жидкость не перестает люминесцировать. Препараты (мазки, суспензии, замороженные срезы), как фиксированные ацетоном, так и нефиксированные, приводят в соприкосновение с люминесцентно-меченым белком в течение 30 минут, промывают в физиологическом растворе (рН=7ч-7,5) и заключают в забу-ференный глицерин. Исследовать такие препараты лучше при ультрафиолетовом возбуждении. Соответствующие антигены при этом люминесцируют очень ярко светло-зеленым светом. Этот метод позволяет определять внутриклеточную локализацию чужеродных полисахаридов и белков, ферментов и гормонов, устанавливать антигенное родство тканей и клеток, быстро идентифицировать под микроскопом бактерии й вирусы. [c.317]

В ряду 9-(о-карбоксиалкилфлуоресцеинов и флуоресцеинов, являющихся производными янтарной (XIV) и глутаровой (XV) кислот, а также родамн-нов, в нейтральном растворе существует равновесие между лактонной и хиноидной формами. Это равновесие сдвигается в сторону лактонной структуры при введении в боковую цепь алкильных групп. [c.387]

К числу хорошо известных, описанных во многих руководствах по органическому синтезу, красителей относятся люминофоры с шестичленным кислородсодержащим (пира-новым) гетероциклом, прежде всего, флуоресцеин, родамин 6Ж и родамин С и их производные. Первый из них широко применяется в гидрологических исследованиях [42], в медицинской диагностике [43], а родамины — при получении дневных флуоресцентных пигментов и красок [44-47], некоторые в последние годы используются как одни из лучших лазерных красителей [48,49]. Мы приводим синтезы производных флуоресцеина и родамина С, содержащие, как заместитель в бензольном ядре, структурные группировки дихлор-триазина, циановую и тиоциановую группы, широко применяемые в биологических исследованиях в качестве люминесцентных метчиков белков [50-52]. Приведен также метод получения бифлуорофора, в молекулы которого, наряду с группировкой родамина С, входит структурный фрагмент [c.52]

Реже применяемыми реактивами для опрыскивания (гл. 23) являются растворы бромтимолового синего, фосфомолибденовой кислоты, треххлористой сурьмы, пятихлористой сурьмы, а-циклодекстрина с парами иода,, флуоресцеина с парами брома и гидроксиламина с хлоридом трехвалентного железа. Липиды, которые благодаря наличию системы сопряженных двойных связей поглощают УФ-свет, можно обнаружить в УФ-свете на слоях силшса-геля Г, содержащих флуоресцирующие вещества. Гидроксил- или аминосодержащие липиды следует хроматографировать в виде меченых радиоактивных ацетильных производных, жирные кислоты — в виде радиоактивных метиловых эфиров. Радиоактивные производные липидов локализуют методом радиоавтографии (см. стр. 67). [c.154]

Остер [142, 143] нашел, что эффективность фотоипициирования резко увеличивается, когда краситель присутствует совместно с восстановителем и кислородом. Так, флуоресцеин и его галоидные производные (эозин, эритрозин и др.) в присутствии кислорода и аскорбиновой кислоты или солянокислого фепилгидразина в водной среде вызывают полимеризацию акриламида при освещении видимым светом. В отсутствие кислорода краситель восстанавливается в лейкоформу с квантовым выходом 10" , но полимеризация не происходит. По-видимому, полимеризация инициируется гидроксильными радикалами, образующимися при взаимодействии лейкоформы красителя ОНа с кислородом [144, 145] [c.65]

Одним из наиболее важных семейств адсорбционных индикаторов являются производные флуоресцеина. Довольно часто в качестве адсорбционного индикатора для титрования хлорида нитратом серебра в нейтральном или слабощелочном растворе используют натриевую соль флуоресцеина. Эта соль ионизуется в растворе, 01бразуя катион натрия и ашюн флуоресцеина, который обозначим 1п (анион индикатора). Вначале в сосуде для титрования образуется некоторое количество хлорида серебра. В любой момент титрования до точки эквивалентности хлориды существуют в растворе в избытке, поэтому первичный ионный слой состоит из адсорбированных хлорид-ионов, а вторичный ионный слой — из любых катионов, имеющихся в растворе, например ионов натрия или водорода. Отрицательно заряженных ионов индикатора 1п адсорбируется лишь небольшое число, поскольку их замещают на поверхности осадка хлорид-ионы. После точки эквивалентности в растворе существует избыток нитрата се ребра, поэтому первичный адсорбционный ионный слой содержит ионы серебра, а вторичный ионный слой состоит из отрицательно заряженных ионов, значительное число которых будут анионами индикатора. Натриевая соль флуоресцеина придает раствору флуоресцирующий желто-зелвный цвет, а когда анионы индикатора адсорбируются на осадке в качестве противоионов, наблюдается изменение цвета — частицы осадка становятся ярко-розовыми. Считают, что это изменение цвета связано с искривлением или с изгибом структуры иона флуоресцеина, когда он притягивается к частицам осадка, имеющим положительный заряд вследствие адсорбции ионов серебра. Фактически анион флуоресцеина является индикатором на адсорбированные ионы серебра. Поэтому конечную точку титрования фиксируют по изменению зеленой окраски раствора в розовую окраску осадка. На практике, поскольку частицы осадка хорошо диспергированы в растворе, наблюдают изменение окраски всего раствора от желто-зеленой в розовую. Такая методика определения хлоридов обычно называется методом Фаянса. [c.260]

Одной из важных групп адсорбционных индикаторов являются производные флуоресцеина. Флуоресцеин, обозначаемый символом HFlu, представляет собой слабую органическую кислоту. В щелочном растворе он существует в основном в виде флуоресцеинат-иона [c.349]

Интересным развитием аллильного окисления служит использование синглетного молекулярного кислорода ( А) как в лабораторной практике, так и в промышленности [35]. Фотооксигени-рование, сенсибилизирвванное красителем (например, бенгальским розовым, флуоресцеином, метиленовым голубы-м), является наиболее часто применяемым вариантом, однако реагент может быть получен и другими путями, в частности термическим разложением аддукта трифенилфосфита с озоном или по реакции гипохлорита натрия с пероксидом водорода. В результате часто достигаются прекрасные выходы аллильных гидропероксидов и производных спиртов [схемы (13) и (14)], а продукты, полученные этим методом, не всегда удается получить другими путями. Реакцию применяют в промышленности как 1-ую стадию получения (28) из цитронеллола (29). Характеристики реакции, включая сдвиг [c.28]

При облучении видимым светом 7%-ных водных растворов акриловой кислоты, содержап их флуоресцеин или его галоидные производные, Остер и Марк [895] обнаружили, что полимеризация происходит со значительной скоростью только в том случае, если в системе присутствует кислород и восстановитель (аскорбиновая кислота и солянокислый фенилгидразин). Фотополимеризация в массе легко протекает при сенсибилизации реакции акрифлавином в присутствии Sn b (10" мол.%) и кислорода воздуха. [c.375]

Групповая реакция на 1 —2-д икарбоновые кислоты. При сплавлении с резорцином 1—2-дикарбоновых кислот или их производных получается флуоресцеин или его гомологи — соединения, для которых характерна яркая желто-зеленого цвета флуоресценция их щелочных растворов. [c.212]

Известен ряд органических люминофоров, содержащих пирано-вый цикл. К ним относятся такие классические люминофоры, как флуоресцеин, родамины и их производные. [c.132]

Флуоресцеин и его производные применяются главным образом как флуоресцентные метчики. С их помощью исследуют подземные течения рек, метят различные водные растворы (см. гл. 16). Флуо-ресцеинизоцианат используют в биологических исследованиях для метки белков (см. гл. 15). [c.133]

Гидроксиксантеновые красители (флуоресцеин и его галогеп-и другие производные). Эти люминофоры по числу реагирующих е ними элементов занимают следующее место после родаминов, но в практике массового анализа их использование еще только начинается. По виду спектров водных растворов они в общем сходны с родаминами (см. рис. 18), но полуширвна их спектра флуоресценции и величина стоксова смещения несколько больше. [c.280]

Смотреть страницы где упоминается термин Флуоресцеин и его производные: [c.301] [c.547] [c.78] [c.636] [c.193] [c.52] [c.294] [c.181] [c.387] [c.393] [c.397] [c.397] [c.400] [c.393] [c.397] [c.397] [c.400] [c.636] [c.255] [c.196] [c.277]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология