Ферментативный синтез полирибонуклеотидов

I. ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ СИНТЕЗ ПОЛИРИБОНУКЛЕОТИДОВ [c.340]

Почему следует избегать фосфатных буферов при ферментативном синтезе полирибонуклеотидов [c.355]

Влияние образования кo шлeк a с металлом (или водородных связей) по Р-фосфатной группе нуклеозид-5 -пирофосфатов хорошо видно на примере ферментативного синтеза полирибонуклеотидов из таких субстратов, где обычно более сильная кислота (нуклеозид-5 -фосфат) используется для фосфорилирования З -гидроксильной группы. (Следует отметить, что комплексы нуклеозид-5 -трифосфатов с двухвалентными катионами более устойчивы, чем [c.352]

Описано несколько других систем, которые катализируют включение концевых рибонуклеотидов в РНК- Они, возможно, и не имеют отношения к специфическому синтезу РНК de novo, так как рибонуклеиновые кислоты, вероятно, образуются путем постепенного присоединения нуклеотидов и концевые фрагменты, по-видимому, должны быть более чувствительны к обратимому пирофосфоро-лизу, чем внутренние нуклеотиды. Однако важным фактором при включении в концевые группы может быть отсутствие подходящего рибонуклеозид-5 -трифосфата. В различных рибонуклеиновых кислотах было идентифицировано около тринадцати различных нуклеозидов при попытке вызвать ферментативную полимеризацию-четырех основных нуклеотидов встретились затруднения, препятствующие образованию полинуклеотида с достаточно высокой длиной цепи. Тем не менее существуют прямые доказательства синтеза полирибонуклеотидов из рибонуклеозид-5 -трифосфатов в животных системах. Например, экстракты из ядер зобной железы теленка после фракционирования дают ферментные препараты, которые катализируют образование полиадениловой кислоты (длиной 25—100 нуклеотидов) из аденозин-5 -трифосфатов. В присутствии затравочной РНК цитидин-5 -трифосфат превращается в по-лицитидиловую кислоту частично очищенным ферментом (в отличие от фермента, специфичного для АТФ) из того же самого источника. В случае других систем животных (ядра печени крысы) моно-нуклеотидный остаток цитидин-5 -трифосфата (а-Р ) включается во внутренние участки, а не в конец цепи. Включение заметно стимулируется АТФ, ГТФ и УТФ, в то время как рибонуклеаза и дезоксирибонуклеаза заметно понижают включение. [c.318]

Наряду с полирибонуклеотидами важно было изучить также модельные полидезоксирибонуклеотиды. Для них долгое время не удавался ферментативный синтез. Поэтому здесь первые успехи принесла органическая химия. Корана 1удалось, применяя создан-ный им метод конденсации мононуклеотидов, получить целый ряд олигонуклеотидов до степени полимеризации, равной 15. Для этого нуклеотиды приводились в соприкосновение со специальным реагентом, дициклогексилкарбодиимидом, ведущим конденсацию с отнятием воды [c.224]

РНК. биосинтез — система ферментативных процессов, ведущих к синтезу полирибонуклеотидных цепей. Наиболее вероятными типами реакций биосинтеза РНК являются I) синтез РНК с участием ДНК-зависимой РНК-полимеразы (см. ДНК-зависимая РНК-полимераза) 2) синтез РНК с участием РНК-зависимой РНК-полимеразы (см. РНК-зависимая РНК-полимераза) и 3) синтез полирибонуклеотидов с участием по лирибонуклеотидфосфорилазы (см. Полирибонуклеотид — нуклеотидилтрансфераза). Поскольку эти процессы в различной степени освещены в указанных рубриках, то здесь мы ограничимся лишь схемой наиболее вероятного механизма биосинтеза РНК in vivo на ДНК-матрице (рис. 24). [c.77]

Важное значение имел открытый Очоа и Гринберг-Манаго ферментативный метод синтеза полирибонуклеотидов из нуклеотида и аналогичный синтез полидезоксирибонуклеотидов из дезоксинуклеозид-5 -три-фосфатов, осуществленный Корнбергом. [c.681]

Примерно в то же время Гобинду Коране (Gobind Khorana) удалось синтезировать полирибонуклеотиды с определенной повторяющейся последовательностью. Сочетая методы органической химии и ферментативные методы, он синтезировал ряд сополимеров с повторяющейся последовательностью из двух, трех и четырех оснований. Рассмотрим, к примеру, стратегию синтеза poly(GUA). Этот упорядоченный сополимер имеет последовательность [c.72]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология