Техника агарового геля

Техника агарового геля [c.225]

Дальнейших успехов в химии гликонротеинов следовало ожидать на основе развития методов и лабораторной техники идентификации и количественного определения малых количеств сахаров и аминокислот, структурного анализа олиго- и полисахаридов, эффективного разделения и очистки белков, оценки гомогенности макромолекул и определения их молекулярных весов. С введением улучшенных методов исчерпывающего метилирования и периодатного окисления углеводов, реагентов (борогндридов щелочных металлов), избирательно восстанавливающих карбонильную группу, аналитической ультрацентрифуги Сведберга, аппарата Тизелиуса для электрофореза с подвижной границей, ультрафиолетовой и инфракрасной спектроскопии, метода меченых атомов, метода фракционирования белков плазмы крови холодным спиртом по Кону, хроматографии на бумаге и на колонках, хроматографии на ионообменниках, полученных из целлюлозы, упрощенных микрометодов электрофореза (электрофорез на бумаге, крахмальном или агаровом гелях), иммуноэлектрофореза и, наконец, последнего по времени, но важного в этой области открытия конститутивных и индуцируемых бактериальных ферментов, действующих избирательно на гетеросахариды, настало время для третьего и наиболее сложного и плодотворного периода исследования гликонротеинов. [c.18]

Этот метод, лишенный многих недостатков, типичных для плазменного сгустка, позволяет избежать разжижения сгустка и дает возможность использовать химически определенные среды. Впервые техника агарового сгустка была предложена Спраттом [10], который использовал 3%-ный агаровый гель на растворе Рингера, а впоследствии 4%-ный гель, содержащий забуференный бикарбонатом солевой раствор, глюкозу, 11 аминокислот, 10 витаминов и агар [11]. Вольф и Хаффен модифицировали метод Гейларда [9] для изучения развития и дифференцировки органов или зачатков органов амфибий, птиц и млекопитающих. Они использовали агаровый гель в эмбриологическом часовом стекле. Первоначально предложенная ими среда состояла из 1%-ного агара, растворенного в растворе Гэя с 50%)-ным экстрактом куриных эмбрионов и раствором Тиро-де. В более поздних модификациях в агар добавлялась куриная или лошадиная сыворотка либо эмбриональный экстракт заменялся на некоторые аминокислоты и витамины [39]. [c.225]