Экстракт куриных эмбрионов

До начала 70-х годов культивирование ткани представляло собой нечто вроде смеси науки и колдовства. Хотя на смену сгусткам плазмы пришли пластмассовые чашки и жидкие среды с точно составленной смесью солей, аминокислот и витаминов, все же в большинстве сред содержалось небольшое количество плохо охарактеризованного биологического материала, например лошадиная сыворотка, очищенный экстракт из куриных эмбрионов или эмбриональная сыворотка коровы. Для большинства обычных тканевых культур такие среды используются до сих пор (табл. 4-4), но они не пригодны для изучения особых потребностей, возникающих в процессе роста и дифференцировки клеток. [c.204]

Экстракт куриного эмбриона [c.225]

Для преодоления неидентифицированных ограничений роста клеток и промотирования роста культуры в культуральную среду часто добавляют неочищенную смесь питательных веществ В приложении 1 (табл. 9, 10 и 11) приведены методы получения гидролизата лактальбумина, экстракта куриных эмбрионов и триптозофосфатного бульона, а в соответствующих главах этого издания встречаются указания на использование этих компонентов. [c.86]

Экстракт куриных эмбрионов (50%). [c.220]

Этот метод, лишенный многих недостатков, типичных для плазменного сгустка, позволяет избежать разжижения сгустка и дает возможность использовать химически определенные среды. Впервые техника агарового сгустка была предложена Спраттом [10], который использовал 3%-ный агаровый гель на растворе Рингера, а впоследствии 4%-ный гель, содержащий забуференный бикарбонатом солевой раствор, глюкозу, 11 аминокислот, 10 витаминов и агар [11]. Вольф и Хаффен модифицировали метод Гейларда [9] для изучения развития и дифференцировки органов или зачатков органов амфибий, птиц и млекопитающих. Они использовали агаровый гель в эмбриологическом часовом стекле. Первоначально предложенная ими среда состояла из 1%-ного агара, растворенного в растворе Гэя с 50%)-ным экстрактом куриных эмбрионов и раствором Тиро-де. В более поздних модификациях в агар добавлялась куриная или лошадиная сыворотка либо эмбриональный экстракт заменялся на некоторые аминокислоты и витамины [39]. [c.225]

Первым из нейротропных факторов был идентифицирован фактор роста нервов (ФРП), и в настоящее время он лучше всего изучен. Этот фактор был открыт случайно в ходе экспериментов с трансплантацией тканей и опухолей куриным эмбрионам. Трансплантаты одного вида опухолей необычайно обильно иннервировались и вызывали значительное разрастание определенных групп периферических нейронов в близлежащих областях. Такому влиянию подвергались нейроны только двух категорий сенсорные и симпатические (подкласс периферических вегетативных нейронов, регулирующих сокращение гладкой мускулатуры и функцию экзокринных желез). Экстракты из опухоли стимулировали также рост нейритов в культуре этих нейронов. Дальнейшие исследования показали, что в культуре другой ткани-слюнной железы сампа мыши -такой же стимулирующий фактор образуется в огромных количествах. Эта игра природы пока еще не разгадана, так как образование ФРП клетками слюнной железы не имеет видимой связи с главной функцией этого фактора, но так или иначе открылась возможность получать чистый ФРП в количествах, достаточных для выяснения его химической природы и изучения его функций. Оказалось, что активность связана с белком-димером, содержащим две идентичные полипептидные цепи из 118 аминокислотных остатков каждая. После того как ФРП был вьщелен в чистом виле. появилась возможность получать антитела, блокируюшие его действие. Если антитела к ФРП ввести мыши, у которой развитие нервной системы еще не закончено, то большая часть симпатических нейронов и некоторые сенсорные нейроны погибнут. [c.358]

IV. Второй пипеткой добавьте одну каплю экстракта куриных эмбрионов (50%) к плазме и быстро и тщательно перемещайте стеклянной палочкой. [c.224]

В качестве источников белкового питания, витаминов, факторов роста и других веществ, необходимых для роста клеток, в состав этих сред включают сыворотки животных, амниотические жидкости, эмбриональные экстракты. Обычно применяют сыворотки человека или некоторых животных лошадей, крупного рогатого скота). Из амниотических жидкостей чаще всего используют коровью амниотическую жидкость. Эмбриональные экстракты готовят обычно из куриных или коровьих эмбрионов. [c.22]

Обычно принималось, что клеточные культуры поддерживались в виде монослоя или суспензий, варьирующих по их ростовым свойствам in vitro, и что клетки со способностью расти в суспензии как агрегаты могут обладать более высокой онкогенной потенцией. Для клеток, растущих монослоем или в суспензии как и для клеток с их комбинированным ростом, можно подобрать условия культивирования. Методы и схемы субкультивирования и выбор среды, в которой клетки будут расти, крайне важны. Некоторые предназначены для роста клеток в суспензии. Культуральные среды, используемые для размнояшния клеток в монослое, высоко вариабельны, и специфический выбор особенной среды редко проводится исследователями. Например, обоснованно ли сравнивать свойства клеток, растущих в минимальной среде Игла, свободной от антибиотиков, но содержащей 10 % эмбриональной телячьей сыворотки, с клетками, растущими в среде Ham (F-10), содержащей 5 % телячьей сыворотки, 1 % лошадиной сыворотки, 10 % триптозофосфатного бульона, 1 % экстракта куриных эмбрионов и антибиотики. [c.192]

Эта техника была первоначально предложена Феллом и Робисоном [6] для изучения развития зачатков костей конечностей птиц. В дальнейшем использование этого метода распространилось на исследование роста и дифференцировки других тканей птиц и млекопитающих. При использовании этого метода ткани птиц помещают на сгусток, состоящий из равных частей плазмы кур и экстракта куриных эмбрионов и находящийся на часовом стекле. Одно или два таких стекла кладут в чашку Петри и закрывают сверху влажной ватой или фильтровальной бумагой (рис. 7.1) для предотвращения высыхания сгустка и эксплантатов. Чашки Петри переносят в термостат и культивируют обычно при 37,5 °С. [c.217]

К флаконам емкостью в две унции (56,7 г) добавляют 0,4 мл куриной плазмы, а затем 0,1 мл 50% экстракта куриного эмбриона. После образования сгустка в сосуд вносят 4 мл суспензии клеток HeLa, содержащей 10 клеток в 1 мл. В качестве питательной среды используют раствор, в состав которого входят 20% телячьей сыворотки, 0,5% раствора лактальбумина и 79,5% раствора Хэнкса. После образования монослоя среду сливают и на клеточный слой на-но сят 0,3 мл соответствующего разведения вируса. После адсорбции при 37° из чашек сливают вируссодержащую жидкость, промывают клетки средой 199, а затем добавляют 0,6 мл плазмы и 0,1 мл куриного эмбрионального экстракта для образования второго слоя плазмы. [c.170]

Первым этапом постановки опыта по методу Купера является приготовление агарового покрытия, С этой целью смешивают равные объемы питательной среды (25% экстракта куриного эмбриона или 1% гидролизата лактальбумина, 0,1 /о кристаллического бычьего альбумина и 0,1% дрожжевого экстракта, 0,6% органического буфера оксиметиламинометан) и расплавленного, а потом охлажденного до 44 " 1,8% агара. 6 мл такой смеси вносят в чашку Петри диаметром 100 мм, 2 мл агарового покрытия добавляют в пробирку, в которую уже были внесены клетки в 0,5 мл растворе Эрла и 0,1 мл вирусного материала. Полученную суспензию сразу же выливают в чашки на основной слой агарового покрытия. После формирования второго слоя чашки переносят в термостат. [c.176]

Культивирование селезенок мышиных эмбрионов ил фрагментов селезенки новорожденных мышей проводилос на миллипорном фильтре на среде Игла с добавлением Л( шадиной сыворотки и куриного эмбрионального экстракт, [c.141]

Куриный эмбриональный экстракт готовят из эм брионов 7— 11-дневного возраста. Зародыши э.мбрионов извлекают, голову его отсекают, а тело растирают в фарфоровой ступке, измельчают в гомогенизаторе или до образования однородной кашицеобразной массы встряхивают во флаконе со стеклянными бусами. Затем, в зависимости от возраста эмбриона, на каждый эмбрион добавляют [c.24]

Некоторые рекомендуют выдерживать суспензию эмбрионов при 37° в течение 30 минут, а потом центрифугировать при 3000 об/мин 30 минут. В связи с тем что куриный эмбриональный экстракт способствует иногда появлению жировых гранул в культурах фибробластов, Лединко, Риордан и Мельник (1952) предложили получение эмбрионального экстракта путем экстраги- [c.24]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология