Белки выделение и очистка

Процессы получения белков [21, изображенные на рис. 6.1, а и б, различаются стадиями выделения и очистки биомассы. При работе на дизельном топливе необходима дополнительная ступень процесса - экстракция для извлечения остаточных углеводородов (не окисленных дрожжами или адсорбированных на них). [c.266]

СВОЙСТВА БЕЛКОВ. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА. ПРИМЕНЕНИЕ БЕЛКОВ [c.52]

Высокомолекулярные соединения делятся на искусственные, полученные в результате выделения, очистки и переработки природных полимеров (целлюлоза, белки, лигнин, нуклеиновые кислоты, [c.185]

Выделение, очистку и концентрирование антигенных токсинов проводят обычными химическими методами. В этих процессах нельзя допустить денатурацию специфического белка (антигена). Чаще всего токсины высаливают растворами нейтральных солей или осаждают спиртом или ацетоном. [c.126]

Хорошим примером изучения нативных белков является исследование белков сыворотки крови, включающее их выделение, очистку, количественный и качественный анализ. Широкое применение методов анализа белков будет показано нами именно на примере изучения сывороточных белков. [c.7]

Высокомолекулярные соединения делятся на искусственные, полученные в результате выделения, очистки и переработки природных полимеров (целлюлоза, белки, нуклеиновые кислоты, натуральный каучук и другие), и синтетические, которые производятся из различных низкомолекулярных органических соединений. [c.531]

Выделение из сырья ферментных белков, получение концентрированных различной активности ферментных препаратов также могут быть более экономичными. Здесь должны вводиться наиболее совершенные технологические схемы, с применением самых доступных солей для высаливания, минимальных количеств органических растворителей, наиболее простых способов выделения ферментных белков, их очистки, адсорбции и элюции. [c.292]

Обнаружение, выделение, очистка и изучение свойств фермента зависят прежде всего от наличия достаточно точного и быстрого метода определения активности фермента, а также подходящего метода определения общего белка. Точное определение активности фермента на ранних стадиях очистки часто бывает сопряжено со значительными трудностями, поскольку посторонние ферменты, присутствующие в препарате, могут конкурентно действовать на субстрат. Например, в присутствии АТФ-азы затруднено определение АТФ-зависимых синтетаз, а присутствие р-амилазы мешает определению а-амилазы. Многих трудностей, связанных, например, с подавлением активности продуктами реакции, инактивацией фермента и изменением степени его насыщения субстратом, можно избежать, если измерять начальные скорости реакции. [c.98]

Ионная сила раствора имеет большое значение при растворении и выделении белков, их очистке, фракционировании и электрохимических исследованиях (электрофорез, определение изоэлектрической точки). [c.60]

Осаждение и очистку выделенных из семян белков проводят таким же образом, как и белков из вегетативных органов растений. Белки, выделенные из семян, должны представлять собой порошки белого цвета с содержанием 14—18% азота. [c.48]

МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ, ОЧИСТКИ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ [c.8]

Приведенные выше Примеры иллюстрируют значение метода высаливания для выделения, очистки и получения в кристаллическом состоянии ряда белков (при проведении высаливания в соответствующих условиях). Большим числом других примеров можно столь же хорошо проиллюстрировать необходимость сочетания различных методов (включая, нередко, и высаливание) для выделения ряда белков из мышц кроликов [15, 23, 99, 251] или крыс [160, 252], из дрожжей [101, 160, 174, 253, 254], а также и из других источников [6, 22, 47, 171]. [c.58]

С развитием методов выделения, очистки и анализа белков в течение первых трех десятилетий этого века выяснилось два существенных факта. Оказалось, что каждый белок состоит из полипептидной цепи определенной длины, причем у разных белков длина цепи меняется от нескольких десятков до нескольких сотен аминокислотных остатков. Выяснилось также, что в каждом белке содержатся характерные для него относительные количества двадцати стандартных аминокислот. Когда эти факты были установлены, то было сделано следующее предположение индивидуальная особенность каждого типа белка зависит от того, сколько аминокислот и какие именно аминокислоты составляют его полипептидную цепь. [c.41]

Сегодня в тех случаях, когда исследуемый белок может быть очищен лишь в следовых количествах, главным ограничением для получения данных об аминокислотном составе и последовательности аминокислот является качество выделенного образца. Во многих случаях, когда выход белка после очистки составляет 10—100 пмоль, существует большое расхождение между количеством материала, определенным по данным аминокислотного анализа, и количеством белка, оцененным по выходу первого ФТГ-производного аминокислоты. Такого различия в оценке содержания анализируемого объекта не наблюдается, когда имеют дело со следовыми количествами белка, взя- [c.478]

Белки, выделенные описанными способами, всегда содержат некоторое количество низкомолекулярных примесей, особенно ионов солей. Для полного освобождения от этих примесей белки подвергают дальнейшей очистке путем диализа, электродиализа, ультрафильтрации и перекристаллизации, гельфильтрации и другими способами. [c.32]

Выделение, очистка ацилферментов, полученных при низких значениях pH, последующий гидролиз белка и идентификация связи белок — ацильная группа показали, что при ацилиро-вании происходит этерификация гидроксильной группы сери-на-195. [c.147]

Искусственные волокнистые материалы, получаемые химической переработкой природного сырья (растительного или животного) с выделением и очисткой соответствующего полимера (целлюлозы, белков). [c.13]

Перечень предложенных в 1920-1940 гг. теорий и гипотез можно было бы продолжить, но, по-видимому, приведеных уже достаточно для постановки следующих двух вопросов чем были вызваны фактический отказ от пептидной теории Фишера и появление такого большого количества существенно отличающихся и даже взаимоисключающих друг друга концепций химического строения белков и почему все они, несмотря на пестроту в химическом отношении, непременно постулировали существование белковых молекул только в форме циклических группировок Для сложившейся в послефишеровский период ситуации характерно прежде всего наличие заметного несоответствия между достаточно высоким уровнем развития аналитической и синтетической органической химии и неудовлетворительным состоянием белковых исследований. В химии белка отсутствовали надежные количественные методы выделения, очистки и анализа, а также методы расщепления, гарантирующие от вторичных реакций и образования побочных соединений. По этим причинам, а часто и вследствие неиндивидуальности выделенных белков среди продуктов их распада находили массу самых разнообразных веществ, строение которых органическая химия того времени уже умела анализировать. Поскольку разделить их на первичные и вторичные не представлялось возможным, выбор в каждом случае оказывался случайным, обусловленным вкусами и интуицией автора. Это ответ на вторую часть первого вопроса. [c.63]

Образование К. с. широко использ. в разл. отраслях хим. технологии (выделение, очистка, разделение платиновых, редкоземельных н нек-рых др. металлов, умягчение воды и т. д.), аналит. химии (см., напр., Комплексономет-рия). В живых организмах присутствуют К. с. нек-рых металлов (в частности, Ре, Си, Mg, Мп, Мо, Со) с белками, витаминами и др. п-вами, выполняющими специфич. ф-ции в обмене в-в. [c.268]

С другой стороны, методы исследования структуры белков продолжали оставаться слишком грубыми. Химики еще не могли оперировать с нативными (нетронутыми) молекулами белков. Очень важным было то, что полученные и изученные продукты разложения не охватывали всей молекулы белка. Огромная часть молекулы бесследно терялась на различных промежуточных этапах разделения и очистки. Господствовало убеждение, что белки, которые подвергались анализам, это далеко не те белки, которые существуют в организме. Э. Абдергальден, ученик и последователь Э. Фишера, писал по этому поводу Следует считаться с тем, что поскольку тот или иной белок не находится в организме в твердом состоянии, всегда возможна некоторая денатурация во время выделения белков и очистки выделенного продукта. Поэтому приходится учитывать возможность ряда отличий белка, находящегося в организме, от изучас мого [57]. [c.93]

Эти методы могут применяться для открытия небелковых веществ и определения их количеств независимо от того, связаны ли они химически с белком, или нет. Обнаружение небелковых компонентов, которые, повидимому, вряд ли являются обязательной составной частью выделяемого белка, указывает на необходимость дальнейшей очистки. Однако при работе с неизвестным белком и даже в случае определенных белков, происхождение которых неизвестно, такое предположение следует делать осмотрительно. Сходные белки, выделенные из различных источников, даже если они обладают одной и той же биологической функцией, часто обнаруживают различия в составе. Например, дегидраза глицероальдегидфосфата, полученная кристаллизацией из мышцы кролика, обычно содержит прочно связанный кофермент — дифосфопиридиннуклеотид, — в то время как аналогичный фермент, полученный из дрожжей, его не содержит [103, 104]. [c.22]

Ионообменные, в том числе хроматографические, методы выделения, очистки и разделения сложных смесей органических веществ приобрели исключительно широкое распространение как в области экспериментальных исследовашга, так и в промышленной практике. Получение многих аминокислот, полипептидов, белков, нуклеотидов, нуклеиновых кислот, выделение и очистка антибиотиков, витаминов, гормонов, алкалоидов стали немыслимы без использования ионообменных процессов, часто в сочетании с гелевой хроматографией. В нодавляюш,ем большинстве случаев процесс осуш ествляется на ионитах, принадлежащих к числу синтетических нерастворимых нолиэлектролитов с различной степенью набухания. Можно без преувеличения сказать, что ионообменные процессы как метод избирательного извлечения или метод анализа применяются во всех отраслях химии и биологии. [c.3]

Изучение генетического контроля утилизании лактозы в клетках Е. соИ привело исследователей к выводу о существовании белка-репрессора, который в отсутствие лактозы в среде выключает синтез Р-галактозидазы. Выделение, очистка этого белка и использование его в опытах in vitro позволили расшифровать механизм гакой регуляции. Оказалось, что репрессор ингибирует транскрипцию 1ас-оперона, связываясь с так называемым оператором - последовательностью ДПК длиной 21 нуклеотид, которая перекрывается с расположенным по соседству участком связывания РПК-полимеразы (промотором). До тех пор, пока репрессор [c.184]

Настоящий раздел посвящен достижениям рентгеноструктурного анализа белков, знание пространственного строения которых представляет для человека поистине жизненный интерес. Речь пойдет об аспартатных протеиназах, прежде всего протеиназе вируса иммунодефицита человека (HIV) и ренине, одних из главных участников системы регуляции тонуса стенок кровеносных сосудов, скселетных мышц и других тканей. Ниже показано, что поиск радикальных терапевтических средств борьбы с синдромом приобретенного иммунодефицита (AIDS), другими видами вирусных заболеваний, гипертонией, т.е. решение сугубо прикладных задач экстраординарной важности, требует высокого уровня развития теоретической молекулярной биологии. Необходимой, хотя и не в полной мере достаточной, предпосылкой для его достижения является информация о трехмерных структурах соответствующих белковых молекул. В отличие от структурных исследований мембранных рецепторов, сдерживающим моментом здесь служат не трудности выделения, очистки и кристаллизации белков, а сложности более принципиального порядка. [c.80]

Для более детальной очистки анионных изопероксидаз была предпринята ионообменная рехроматография на СМ-сефадексе С-50, который, удерживая другие белки, способствовал очистке анионных пероксидаз. Для элюции использовали ацетатный буфер pH 4,6—5,0. Как свидетельствуют данные табл. 20, удельная активность анионных пероксидаз после Очистки на СМ-сефадексе С-50 значительно возросла и составляла для вирозных растений 180 844, а для контрольных — 118 515 отн. ед/мг белка. Сопоставляя пероксидазную активность исходного экстракта (после высаливания сульфатом аммония) с конечной активностью анионных пероксидаз, выделенных из вирозных и контрольных растений табака, видно, что фермент после всех этапов выделения был очищен более чем в 900 раз. Если отнести активность очищенного фермента к активности в ткани исходных листьев (см. табл. 12), то эта цифра будет еще на порядок выше. [c.84]

Препаративные центрифуги, В настоящее время имеется большое количество превосходных препаративных ультрацентрифуг, способных развивать ускорение до 420 ООО . Они применяются для выделения, очистки и концентрирования вирусов и субклеточных частиц, фракционирования белков, нуклеиновых кислот, линопро-Т0ИДОВ и других макромолекул. Наиболее популярны следующие ультрацентрифуги Спинко модель Л и Л2 (США) Судер-Спид-40 ж 50 (Англия), ВАК-40 и ВАК-60 (ГДР) и Хитачи 55Р (Япония). В нашей стране выпускаются препаративная ультрацентрифуга типа УЦП. [c.192]

Процессы депарафинизации перестают сейчас быть средством очистки топлив, а становятся методами разделения топливных фракций. Выделенные из среднедистиллятных фракций парафиновые углеводороды используют в качестве сырья для получения белков в мииробиолопической промышленности. Для разделения [c.23]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология