Титрование бактериофага

Титрование бактериофага на плотной питательной среде по методу агаровых слоев Грациа. Метод агаровых слоев Грациа основан на внесении различных разведений титруемого бактериофага в со- [c.78]

Рис. 14. Вирус коровьей оспы, титрованный на кролике (а) стерильные пятна, вызванные размножением бактериофага (б) местные поражения (вирус табачной мозаики) (в) кристаллический вирус кустистой карликовости помидор (г) и электронная микрофотография табачной мозаики (й).

Титрование бактериофага в жидкой питательной среде по методу Лппельмана. Метод Аппельмана основан на внесении различных количеств титруемого бактериофага в бульон, засеянный одной и той же дозой культуры гомологичных микробов, с целью получения феномена бактериофагии. [c.78]

Для титрования бактериофага предложены различные методы, однако наибольшее распространение получили способ титрования фага в жидкой питательной среде, предложенный Аппельманом, и метод агаровых слоев Грациа. [c.78]

Первый способ заключается в отборе мутантов по морфологии стерильных пятен, образуемых частицами бактериофага на твердой питательной среде. Напомним, как производится титрование бактериофагов. На пластинку питательного агара в чашке Петри наливают небольшую порцию расплавленного мягкого агара (берется 0,65%-й агар с питательной средой, он плавится ири 45° С). Туда же вносится некоторый объем суспензии бактерий, на которых фаг паразитирует, например Е. соИ В для [c.366]

Густота микробной взвеси, прибавляемой в пробирки с титруемым бактериофагам, существенного значения не имеет, так как опытным путем (Л. Д. Переметина) было установлено, что изменение микробной концентрации в пределах 100000—4 500 000 в 1 мл не оказывает заметного влияния па исход титрования бактериофага. Пробирка 11-я — контроль культуры, содержит 5 мл бульона и 0,2 мл бульонной культуры микробов. Пробирка 12-я — контроль на стерильность, содержит 5 мл бульона без добавления культуры и фага. Штатив с пробирками помещают в термостатчпри 37 °С на 18—20 ч. [c.78]

При попытках построения генетических карт бактерий для больших участков хромосомы необходимо измерять вероятность вхождения w x). Для этого были предложены различные методы. Один из них использует явление зиготной индукции профага. При конъюгации мужской клетки, несуш,ей профаг, т. е. лизогенной, и женской, нелизогенной, происходит часто переход профага в вегетативную форму и лизис клетки. Причина зиготной индукции в том, что генетическое веш,ество бактериофага попадает с отцовской хромосомой в материнскую клетку, которая не лизогеннаи, следовательно, чувствительна к фагу. Если конъюгировать клетки Н г(Л.+) с клетками Г (Я,"), отбирать в разные моменты времени пробы и засе- вать их на чашках Петри так, как это делается при титровании бактериофага [c.337]

Определение колифагов. Присутствие колифагов (бактериофагов, паразитирующих на Е. соИ) определяют в воде поверхностных источников и питьевой воде, подготовленной из нее, а также в сточных водах. Они являются индикаторами эффективности охраны грунтовых вод и очистки питьевой воды. Исследование проводят методом агаровых слоев по Грациа (см. рис. 1.10 и цв. вклейку, рис. 12). Для титрования колифагов исследуемую воду смешивают с расплавленным и остуженным питательным агаром, куда вносят также индикаторный штамм Е. соИ. Полученную смесь выливают вторым слоем на питательный агар в чашке Петри и после застывания среды чашку инкубируют при 37 °С 24 ч. В результате индикаторная культура образует равномерный сплошной рост, а при наличии колифагов в этом газоне образуются прозрачные бляшки ( негативные колонии бактериофагу 419 [c.419]

Иной результат получен в опытах Кона, Леннокса и др. ° Техника эксперимента у них весьма сходна с только что описанной, но антигенами служили бактериофаги Т и Tg, а титрование антител, образовавшихся в микрокаплях, проводилось путем [c.509]

Для получения маточных бактериофагов к пробам речных и сточных вод подсевают соответствующую культуру бактерии и после инкубации при 37°С фильтруют через стерилизующие фильтры. Литическая активность фильтратов проверяется титрованием в жидкой питательной среде (по Аппельману) с набором штаммов данного вида. Наиболее активные используют для приготовления маточных фагов. [c.580]

Однако в некоторых случаях при развитии патологического процесса, например в опытах с растительными вирусами, с бактериофагами, при титровании вируса осповакцины иа коже кролика, индивидуальная чувствительность подопытных объектов не играет решающей роли. В данных условиях закономернссти количественного ответа подчиняются распределению Пуассона [Лу-риа (Luria, 1953)]. [c.201]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология