Гидроксимочевина

Смит и Мартин (Smith, Martin, 1974) добавляли 3 мМ гид-роксимочевину (ингибитор синтеза ДНК разд. 11.8.4) к обработанным сывороткой клеткам как раз перед тем, когда клетки должны были вступить в фазу S. Через 6 ч после удаления ингибитора клетки вступали в фазу S, но не все одновременно скорость их вступления в фазу зависела от концентрации сыворотки. По мнению авторов, это свидетельствовало о постоянной зависимости вероятности перехода и указывало на то, что клетки в присутствии гидроксимочевины задерживаются в состоянии А и этап перехода локализован на границе фаз G1 и S. [c.129]

Ингибиторы синтеза ДНК несомненно блокируют прохождение клетками фазы S. К числу таких ингибиторов относятся аналоги фолиевой кислоты (аминоптерин и аметоптерин разд. 11.8.1 и 13.2.1), фтордезоксиуридин (разд. 11.8.2) и ингибиторы рибонуклеотидредуктазы (гидроксимочевина и высокие концентрации тимидина см. разд. 11.8.3 и 11.8.4). [c.142]

Этот метод обычно основан на использовании либо тритированного тимидина с высокой удельной радиоактивностью (Whitmore, ulyas, 1966) (данный вариант применим для широкого круга клеток), либо гидроксимочевины (Sin lair, 1965) (данный [c.148]

Голодание по изолейцину и гидроксимочевина [c.160]

После 8 ч инкубации сменить среду на МСИ с изолейцином, 10% недиализованной сыворотки эмбриона крупного рогатого скота и 2 мМ гидроксимочевиной. [c.160]

После 16 ч вновь сменить среду на полную среду без гидроксимочевины. Большинство клеток оказываются при этом на [c.160]

Метод с изолейцином/гидроксимочевиной также включает в себя две смены среды, но первая из них может быть просто заменена добавлением нзолейцина в неполную среду. [c.161]

Прометить клетки Ш-тимидином (5 мкКи/мл, 20 Ки/ммоль) в присутствии 1—2 мМ гидроксимочевины. После периода мечения определить включение метки в ДНК, как указывалось выше, либо подготовить клетки для радиоавтографического анализа в этом случае нет необходимости в присутствии гидроксимочевины, поскольку клетки, находящиеся в фазе S, легко отличимы по очень высокому числу зерен. В культурах необлучен-ных клеток обнаруживается менее 0,2 зерен на клетку, а в культурах, облученных дозой около 5 Дж/м , обнаруживается 15— 20 зерен на клетку после 8-дневной экспозиции (Abo-Darub et al., 1978). На рис. 12.9 показана динамика репарации облученных лимфоцитов, полученных от здоровых людей и от больных с лучевым кератозом (заболевание, часто встречающееся в некоторых регионах, при котором образуются опухоли на участках кожи, открытых солнцу), в лимфоцитах больных с лучевым кератозом скорость репарации ДНК ниже, чем в нормальных лимфоцитах. [c.182]

Вы инкубируете культуру мутанта i/ lOl дрожжей при рот риктивной температуре (37°С) в течение 2 ч (приблизительна продолжительность клеточного цикла у дрожжей) с тем, чтоб проявился мутантный фенотип. Затем вы переносите клеп в среду, содержащую гидроксимочевину, и инкубируете их пр пермиссивной температуре (20°С). Клетки не делятся. [c.242]

А. Опыты со сменой температуры свидетельствуют о том, что мутант d XQl блокирован при 37°С в фазе Gj клеточного цикла. Первый опыт показывает, что точка мутационного блока предшествует точке блокады гидроксимочевиной или совпадает [c.475]

Б. Результаты опыта с мутантом d lQl показывают, что клетки блокированы при 37 °С в фазе S. Из первого опыта следует, что точка мутационного блока предшествует или совпадает с точкой блокады гидроксимочевиной, иначе клетки должны были бы делиться при температуре 20 °С. Второй опыт говорит о то, что точка блокады гидроксимочевиной предшествует точке мутационного блока или совпадает с ней, иначе клетки могли бы делиться при 37 °С. Вместе эти два опыта показывают, что точки мутационного блока и блокады гидроксимочевиной совпадают. Поскольку и гидроксимочевина, и мутация d Q2 действуют на одну и ту же фазу клеточного цикла, порядок обработки не имеет значения клетки останавливаются на фазе S и, следовательно, не делятся. [c.476]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология