Смена среды

Ассоциаты данного вида, попадая в какую-либо жидкую среду иной природы, могут распадаться под влиянием частиц среды, и получившиеся мономеры сольватируются молекулами растворителя. Иногда, наоборот, смена среды ведет к усилению полимеризации. [c.242]

С целью выяснения причин возникновения пористой структуры в частице лёсса в водных суспензиях была исследована при помощи электронного микроскопа картина строения частиц лёссовых суспензий в воде, затем вода в суспензии заменялась этиловым спиртом. Мы считали возможным проводить обезвоживание лёсса этиловым спиртом вследствие того, что электронно-микроскопическая картина частиц лёсса, полученных распылением и из спиртовых суспензий, совершенно идентична. Смена среды вода—спирт повторялась 5—6 раз с одним и тем же образцом лёсса. [c.188]

Схема простейшей установки для коррозионных испытаний алюминиевых сплавов (99] приведена на рис. 200. В этой схеме контур не замкнут. Смена среды обеспечивается за счет ее непрерывной подачи из компенсационного объема 1 с помощью насоса 2 в автоклав 4, откуда она поступает в холодильник 5 и сбрасывается посредством спускного клапана 6. Таким образом, в рабочем объеме происходит постоянное восполнение по- [c.328]

Среда переменная смена среды проводилась через 10—J2 я. [c.398]

Смену среды проводили каждые 8 ч. [c.251]

Эффективность смены среды в монослойных культурах такова, что позволяет достигать полного удаления нежелательных компонентов. [c.76]

После трехкратной замены модельной среды свежими порциями жидкости и выдержки 1 сут количество фталатов в. ней снижалось в 1—5 раз, непредельных соединений в 2—44 раза, хлориды и акрилонитрил практически не определялись. Из некоторых образцов выделение химических веществ после смены среды обнаружить не удавалось [48, с. 173]. [c.88]

I52 о ь ч смена сред- ний макси- маль- ный сред- ний макси- маль- ный сред- ний макси- маль- ный [c.285]

Используя прием многократной смены среды, можно в несколько раз (в наших опытах в пять раз) увеличить эффективность использования одной порции эякулята, что особенно важно при применении спермы от высокоценных быков-производителей. [c.213]

Через 24—48 ч замените среду на селективную (табл. 8.2). Еще раз смените среду через 3—4 дня, когда станет заметной значительная гибель клеток (мертвые клетки теряют способность удерживаться на субстрате и всплывают). [c.246]

ИЗ других источников углерода. Удаление любого из семи витаминов приводило к развитию симптомов недостаточности. Таким образом, Игл, используя метод культивирования клеток, продемонстрировал питательные потребности клеток мыши и человека. При культивировании клеток в БСИ среду необходимо обновлять, и поэтому БСИ была вскоре заменена на минимальную среду Игла (МСИ) (гл. 7 и приложение 1), в которой концентрация различных компонентов была повышена, что обеспечивало непрерывный рост клеток в культуре в течение нескольких суток без смены среды. [c.21]

Инкубировать культуры при 37 °С и на следующий день сменить среду. [c.71]

Выращивать клетки в бутылях Ру в течение 2—3 дней до достижения полного монослоя. Целесообразно сменять среду в культуре за 24 ч до сбора клеток. [c.99]

После 16 ч сменить среду на свежую без тимидина. [c.161]

И лучше добавлять глюкозу в среду в ходе культивирования, чем повышать начальную ее концентрацию. В качестве альтернативы можно заменять глюкозу на галактозу и фруктозу. При этом заметно снижается образование молочной кислоты, но одновременно, как правило, снижается и скорость роста культуры. Такая замена замедляет снижение значений pH среды и достаточна для поддержания небольших культур. По мере увеличения масштабов культуры происходит снижение объема газовой фазы и поверхности культуральной среды по отношению к ее объему. Кроме того, были созданы многочисленные системы с увеличенной поверхностью для роста клеток и увеличенной клеточной плотностью по отношению к объему культуры. В результате проблема pH возникает на более ранних стадиях культивирования, поскольку СОг удаляется менее эффективно и увеличение количества клеток приводит к увеличению образования молочной кислоты и СОг. Выходом из создавшегося положения является более частая смена среды или создание систем контроля pH. [c.66]

II. Посев культуры. При посеве культуры с микроносителями критичными оказываются многие факторы, перечисленные в разд. 2. Микроносители имеют сферическую форму, а клетки всегда прикрепляются к участкам с минимальной кривизной. Хотя поверхность микроносителей не может быть идеальной, но она обязана быть приемлемой по своим химическим и физическим свойствам. Убедившись в том, что среда и гранулы находятся при оптимальных pH и температуре, вносите в культуру клетки (с логарифмической, но не со стационарной фазы культуры) в объеме среды, составляющем треть конечного объема. Это увеличивает вероятность контакта клетки с микроносителем. Конечная концентрация микроносителей должна составлять 2—3 г/л, а более высокие концентрации требуют повышенного контроля условий культивирования и очень частых смен среды. Раньше предпочитали проводить связывание [c.89]

HI. Поддержание культуры. Анализ роста клеток в культуре на микроносителях не представляет никакой проблемы. Легко производится отбор проб, определяется число клеток (по подсчету ядер), концентрация глюкозы и исследуется морфология клеток. По мере роста клеток гранулы микроносителя становятся тяжелее, что требует увеличения скорости вращения. После 3 дней культивирования или около того происходит за-кисление культуры и следует сменить среду. Это также оказывается чрезвычайно простой процедурой мешалка отключается, гранулам с клетками дают осесть в течение 5 мин и затем удаляется столько среды, сколько нужно. После этого культура осторожно заполняется свежей средой, нагретой до 37 °С, и перемешивание возобновляется. [c.90]

V. Увеличение масштаба культур на микроносителях. Увеличение масштаба может быть достигнуто а) увеличением концентрации микроносителей и б) увеличением размера культур. Если идти по пути а), то возникают быстрое истощение питательных веществ и кислорода в среде и снижение pH до нефизиологических значений. Смены среды не только утомительны, но и [c.91]

Рис. 3.10. Система перфузии по замкнутому контуру с полным контролем параметров среды для выращивания клеток при высокой концентрации микроносителей. КС — культуральный сосуд РЕ — резервуар К —коннектор для смены среды, сбора и т. д. Ф — фильтр ГС — газовый смеситель У — контроллер уровня П — устройство для отбора проб М —магнит Щ — резервуар со щелочью (ЫаОН) ОЭ — кислородный электрод рЭ — pH электрод Н — насосы Н1—среда к резервуару (постоянно) Н2 —среда в культуру (контролируется У) НЗ — щелочь к резервуару (контролируется рН-метром) Т — измеритель скорости тока воздуха гп —поступление газа для поверхностной аэрации гв—поступление газа для пробулькивания

VII. Успешная адаптация обнаруживается вначале по увеличению количества клеток после смены среды, а далее по постоянному росту клеточной массы в течение данного периода времени, свидетельствующему о постоянной скорости роста. [c.96]

IV. Смените среду в полученных культурах на четвертый или пятый день и далее меняйте среду каждый третий или четвертый день. [c.117]

II. Через 4 сут смените среду (или добавьте свежей среды, если клетки растут в суспензии). [c.118]

При наличии гибридов производят смену среды Дальбекко (без аминоптерина) в течение последующих 14 дней и, наконец, добавляют минимальную модифицированную среду Дальбекко. После этого следует скрининг (от англ. s reen — решето, хфосеивать) гибридных клеток по образованию антител, используя серологические реакции, радиоиммунный, иммунофлуоресцентный или иммуноферментный анализ. Более чувствительный из них радиоиммунный метод. [c.576]

Данные многих опытов па животных и с участием человека были за гелиевый воздух. Но все опыты на людях были кратковремеины. Как скажется на человеке долгое пребывание в гелио-кислородной среде Точный ответ на этот вопрос дали проведенные несколько лет назад опыты советских биологов профессора А. Г. Кузнецова и кандидата медицинских наук А. Г. Дианова. Было проведено два эксперимента иродолжительиостью одии—22, другой—30 дке1[, в которых участвовали молодые, абсолютно здоровые люди. Первые два дня герметическая камера была заполнена обыкновенным воздухом. За это время медики сняли фоновые данные. На третий день произошла смена среды обитания. Сначала камеру провентилировали чистым медицинским кислородом, который не только вытеснил азот, но и вымыл этот газ из организма участника опыта. Когда концентрация кислорода в воздухе камеры достигла 97%, его подачу прекратили и начали подавать гелий. В этот жо [c.44]

Динамика отложения гликогена существенно зависит от условий культивирования, в частности от состава питательной среды. Эта зависимость различна в обеих указанных выше категориях культур. При смене среды уже через сутки отмечается увеличение содержания гликогена, умеренное в клетках первично-зксплантирован- [c.216]

Окислительно-восстановительный потенциал (ОВП), нли редокс-потенциал, является показателем заряда среды, и его величина, следовательно, определяется соотношением окисляющих и восстанавливающих химических соединений, концентрации кислорода и pH. При изготовлении свежей среды и помещении ее в культуральный сосуд требуется время для установления равновесного ОВП (процесс называется уравновешиванием). Оптимальный уровень ОВП для роста многих линий клеток составляет +75 мв, что соответствует значению рОг растворенного кислорода 8—10%. Некоторые исследователи предпочитают контролировать поступление кислорода в культуру с помощью окислительно-восстановительного, а не кислородного электрода. При прослеживании изменения ОВП с помощью редокс-электрода и рН-метра (с милливольтовой шкалой) можно получить данные о характере роста клеток [5]. Это связано с тем, что значение ОВП снижается в течение логарифмического роста клеток и достигает минимального значения примерно за 24 ч до наступления стационарной фазы (рис. 3.5). Такой способ оценки роста культуры является особенно эффективным, когда невозможно отбирать пробы клеток. Этот метод полезен также для предсказания момента окончания логарифмической фазы роста, чтобы смена среды, добавление вирусов или промоторов образования клеточных продуктов были произведены в оптимальное время. Влияние ОВП на клеточные культуры подробно рассмотрено Гриффитсом [6]. [c.71]

При переходе к более полярным растворителям (метанолу, ДМФА) ( таблица 3 ) даже при использовании пиперидина в значительных концентрациях величина к практически не зависит от концентрации пиперидина для соединения (I) и увеличивается в 3-6 раз для соединения (Ш) только при увеличении концентрации пиперидина более 6 молей/л. Аналогичное влияние смены среды в реакциях отмечалось ранее при изучении основного катализа для нитроантивированных ароматических субстратов (см., например, обзоры ). [c.487]

При пересеве клеток в новые сосуды рост клеток с максимальной скоростью возобновляется не сразу, особенно при низкой плотности посева клеток. В течение 1—2 дней после посева клетки находятся в лаг-фазе, в течение которой они адаптируются к новым окружающим условиям и кондиционируют новую среду. Как было показано (Риск, 1972), это не является обязательным свойством растущих клеток. Лаг-фаза может быть практически элиминирована, если избегать избыточной трипсинизации клеток и поддерживать клетки при пересеве при 37 С. Большинство мышиных клеток L929 начинают делиться в течение суток после пересева более концентрированного инокулята. Тем не менее в течение первых суток после посева часто наблюдается слабое увеличение количества клеток только через двое суток количество клеток удваивается. После этого экспоненциальный рост может поддерживаться в течение последующих 2—10 суток, если ростовая поверхность сосуда достаточно велика и регулярно производится смена среды. В дальнейшем, однако, скорость роста падает и количество клеток достигает насыщения (рис. 5.2). Некоторые клетки на этой стадии могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель, особенно при смене среды каждые 5 дней. В других линиях клеток, растущих в так наз ываемой монослойной культуре, клетки начинают наползать друг на друга, нижележащие клетки оказываются в условиях недостатка питания и вскоре [c.57]

После 8 ч инкубации сменить среду на МСИ с изолейцином, 10% недиализованной сыворотки эмбриона крупного рогатого скота и 2 мМ гидроксимочевиной. [c.160]

После 16 ч вновь сменить среду на полную среду без гидроксимочевины. Большинство клеток оказываются при этом на [c.160]

Метод с изолейцином/гидроксимочевиной также включает в себя две смены среды, но первая из них может быть просто заменена добавлением нзолейцина в неполную среду. [c.161]

Через 1—2 дня роста сменить среду и добавить 5У40 со множественностью заражения 1 БОЕ/клетка (2 мл на чашку или 0,1 мл на лунку.). [c.202]

Сходство молодых особей Hemimetabola с имаго существенно облегчает их определение и классификацию. Желая подчеркнуть это сходство, их часто именуют имагообразными личинками или нимфами. Однако при смене сред обитания, например, у веснянок или стрекоз развивающиеся в воде нимфы (наяды) все же мало похожи на взрослых особей. [c.50]

Некоторые быстроделящиеся культуры, например постоянные линии клеток, таких как НеЬа, требуют смены среды после 3—4 сут культивирования. На необходимость смены среды обычно указывает значение pH ниже 7,0. [c.24]

Рис. 3.3. Сравнение роста клеток МКС-5 при постоянной перфузии (А) или полных сменах среды (Б). В обеих системах использовался один и тот же объем сменяемой среды за сутки. Рост клеток представлен в эквивалентах монослоя (ЭМ) этим подчеркиваетси многослойный рост клеток МЕС-5.

Рис. 3.9. Простые системы культур на микроносителях, обеспечивающие легкую смену среды. Для заполнеипя культурального сосуда К открыть вентиль Л1 и перекачать среду из резервуара Р, нагнетая воздух через трубку А. Для отбора клеток остановить на 5 мии мешалку, открыть вентиль Л2 п перекачать среду из К в И, нагнетая воздух через трубку Б. П — устройство для отбора проб.

VI. Если при смепе среды обнаруживается значительное прикрепление клеток к поверхности культурального сосуда, особенно на границе среды и воздуха, добавьте в сосуд после удаления среды смесь трипсина (0,01%) и версена (0,01%) и инкубируйте при перемешивании в течение 30 мин при 37 °С. Открепившиеся клетки соберите центрифугированием. Если в суспензии появляются агрегаты клеток, их также можно обработать смесью трипсина и версена, Такая обработка обычно необходима при первой и второй сменах среды, но в дальнейшем необходимость в ней, как правило, отпадает. Если агрегация клеток сохраняется, добавьте в ростовую среду трипсин (50 мкг/мл) или диспазу (Boehringer). [c.96]

Использование заключенных в полимерный матрикс клеток в ферментёрных культурах представляется заманчивой техникой получения клеточных продуктов. Во многих случаях в этом методе могут быть использованы преимущества культуры с микроносителями (гранулы с растущими на их поверхности клетками) в смене среды и в соотношении объемов клеток и среды. Кроме того, заключение клеток в матрикс может быть использовано для облегчения перфузии или смены среды, и продукты можно будет получать свободными от клеток. [c.107]

VIII. Начните стандартное культивирование клеток. Если этап центрифугирования был опущен, смените среду через 24 ч. [c.115]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология