Ацетилхолинэстераза, сорбция

Избирательное выделение биологически активных макромолекул аффинной хроматографией основано на обратимых взаимодействиях между имхмо билизованным аффинным лигандом и свободной макромолекулой. Однако принцип аффинной хроматографии может быть также использован даже с сорбентом, который содержит необратимый ингибитор, когда после сорбции комплементарной макромолекулы в специфическом комплексе образуется ковалентная связь. Для освобождения выделяемого вещества из комплекса с аффинным сор бентом используют подходящую химическую реакцию. Пример ковалентной аффинной хроматографии— выделение ацетилхолинэстеразы с помощью иммобилизованных органофосфатов [1, 56]. Ацетилхолинэстераза принадлежит сериновым эстеразам, для которых типично ингибирование связыванием с органофосфатами или органофосфонатными эфирами, содержащими легко отщепляемую группу, например, [c.158]

Активный центр ацетилхолинэстеразы состоит из двух участков ационного (Л), содержащего ионизированный карбоксил аспарагиновой и глутаминовой кислот, и эстеразного (Э), который содержит гидроксил серина. Процесс разрушения ацетилхолина происходит в три стадии I — сорбция ацетилхолина на анионном участке, которая фиксирует молекулу медиатора на поверхности фермента и резко повышает вероятность реакции И — ацетилирование фермента с образованием холина П1 —десорбция холина и водный гидролиз ацетилированного фермента, при этом происходит регенерация фермента и высвобождается уксусная кислота [c.139]

Высокоспецифическая сорбция белков биосорбентами зависит от объемной концентрации карбоксильных групп в ионите (рис. 6) и от pH раствора. Специфичность обусловлена строением биосорбентов, но регулируется и условиями проведения фронтальных сорбционных и десорбционных процессов. На биосорбенгах биокарб можно осуществлять не только разделение белков близкой молекулярной массы и с близкими изоточками, как, например, протеазы и амилазы (ММ 28 ООО и 30 ООО, р/ 4,8 и 4,6), но также и одноактное выделение с получением высокоочищенных препаратов из культуральной жидкости и экстрактов протеолитических и амилолитических ферментов, ацетилхолинэстеразы, нейрамини-дазы, урокиназы, иммуностимулятора тималина, нейрогормонов, а также других белков и пептидов. [c.134]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология