Аденозин З фосфат разделение изомеров

Применение методов хроматографии на бумаге для быстрого анализа пуриновых и пиримидиновых оснований [76, 77] в гидролизатах небольших количеств рибонуклеиновых кислот вскоре показало, что молярная эквивалентность этих оснований скорее была исключением, чем общим правилом. Еще более важным было наблюдение, что разделение смеси нуклеотидов в щелочном гидролизате рибонуклеиновой кислоты при помощи ионообменной хроматографии дает изомерные пары нуклеотидов, являющихся, как позже было показано, нуклеозид-2 - и пуклеозид-З -фосфатами [78]. Хотя эти изомеры не подвергались взаимопревращению в щелочи, кислота легко катализировала миграцию фосфатного остатка между 2 - и З -гидроксильными группами. Таким же методом были обнаружены 5 -фосфаты аденозина, цитидина, гуанозина и уридина (среди прочих продуктов) после гидролиза кишечной фосфодиэстеразой рибонуклеиновых кислот, предварительно обработанных рибонуклеазой [79]. Со значительно более высокими выходами нуклео-зид-5 -фосфаты получены при действии диэстеразы змеиного яда на рибонуклеиновые кислоты из дрожжей и печени теленка гидролизаты содержали также свободные нуклеозиды и нуклеозид-2 (3 ),5 -ди-фосфаты [80]. [c.373]

В следующем порядке монофосфаты цитозина, уридина, аденозина и гуанозина. В каждом случае 2 -изомер элюируется раньше, чем З -изомер. Общее время анализа меньше 70 мин, и каждый пик соответствует компоненту, содержание которого менее микрограмма. Итак, используя эту систему, можно достичь высокой скорости, высокого разрешения и высокой чувствительности. Разделение проводится на колонках, заполненных пленочными анионообменными смолами. Объемная скорость потока подвижной фазы составляет 12 см /ч при этих условиях на входе обеспечивалось давление в 35 атм. Разделение проводилось методом градиентного элюирования, в качестве стартового элюента использовался 0,01 М однозаме-щенный фосфат калия с pH 3,35. Для установления градиента 1,0 М раствор однозамещенного фосфата калия (pH 4,3) смешивали с стартовым раствором при объемной скорости потока 6 мл/ч. Начальный стартовый объем фосфатного бу( )ера низкой концентрации составлял 50 мл, и ввод градиента осуществлялся через 7,5 мин после начала анализа (с момента ввода пробы). По окончании [c.307]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология