Перйодат, окисление белков

Хроматографический сорбент с АГП был получен на основе силикагеля с размером пор 300 А, на котором белок был иммобилизован путем изменения его функциональных групп и последующего сшивания, осуществляемого таким образом, чтобы образовавшиеся агрегаты были достаточно большими и могли удерживаться в порах. АГП содержит пять углеводных фрагментов, на долю которых приходится 45% его молекулярной массы. Окислением перйодатом натрия первичные спиртовые группы этих углеводных фрагментов превращаются в альдегидные. Закрепление модифицированного белка на силикагеле проводится путем повышения pH буферного раствора, что вызывает его сшивание через образование оснований Шиффа. Для получения гидролитически устойчивых связей последние восстанавливаются до иминогрупп с помощью циан-борогидрида натрия [94]. Процесс иммобилизации показан на схе- [c.137]

Недавно Спиро [122] осуществил последовательное периодатное окисление фетуина. Метод состоял в повторной обработке белка перйодатом, восстановлении борогидридом натрия и мягком кислотном гидролизе (0,05 н. серная кислота, 80°, 1 час), причем весь цикл операций повторялся несколько раз. По окончании каждого цикла белок анализировали на содержание оставшихся сахаров. На первой стадии количественно исчезала сиаловая кислота, причем никакие другие моносахариды при этом не окислялись. На втором этапе почти полностью окислялась галактоза, а другие моносахариды не затрагивались. Эти данные вместе с результатами измерения количества поглощенного перйодата и образования других продуктов окисления позволили сделать заключения о строении трех гетеросахаридных остатков, входящих в состав белка. Аналогичным образом было выполнено исследование орозомукоида [123]. [c.252]

Основой любого фермента является белок, представляющий собой компактную конструкцию из одной или нескольких полипептидных цепей, ковалентно связанных (сшитых) дисульфид-ными мостиками. Помимо белка ферменты иногда мо1ут содержать и небелковые компоненты простетические группы неорганической и органической природы, липиды (в липопротеидах) и углеводы (в гликопротеидах). Конечно, в общем случае химические методы иммобилизации нацелены на модификацию функциональных групп в белковой части молекулы фермента. Однако при выборе процедуры иммобилизации для конкретного фермента целесообразно учитывать и специфические особенности строения его молекулы. В этой связи укажем на хорошо известный и яркий пример ковалентной иммобилизации гликопротеидов. Относительно простым методом — окислением перйодатом натрия в мягких условиях — в полисахаридную часть фермента вводятся альдегидные группы, посредством которых на следующем этапе и осуществляется химическое взаимодействие с носителями или сшивающими агентами, содержащими аминогруппы (образованием азометиновых связей, оснований Шиффа). [c.82]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология