Белки флуориметрия

Кроме этих приборов, в литературе описан ряд ультрафиолетовых флуориметров, сконструированных и изготовленных в некоторых учреждениях для изучения поляризованной флуоресценции [13], для анализа водно-масляных эмульсий [80, 81], для исследования флуоресценции резины [48], для определения белка в молоке [34], для анализа продуктов азотно-тукового производства [63] и некоторых других целей [17]. На ВДНХ были представлены опытные образцы разработанных Ленинградским физико-механическим техникумом люминесцентного спектро-электрофотометра УЛФ-1, фотоэлектрического полевого флуориметра— абсорбциометра ФАУ-1-П и фоторегистрирующей насадки к ультрафиолетовым приборам УП-1. [c.94]

После проведения электрофореза гели облучают светом с длиной волны 390 нм и измеряют флуоресценцию при 475 нм. С помощью специального флуориметра удается определить до 0,5 мкг белка [1053]. [c.184]

Не надо специально объяснять, что ту же кювету можно применять для классической флуориметрии образцов белка в растворе. В этом случае раствор белка вводят в верхнюю часть проточной кюветы. Это позволяет, сохраняя в целом геометрию кюветы постоянной, сравнить спектры флуоресценции белков в растворе и на нерастворимой матрице. Были исследованы растворы а-лакталь-бумина в интервале концентрацией 0,05—0,15 мг/мл в 0,05 М буфере (pH 7,5). [c.254]

Флуориметри-ческий анализ 5 мкг/л Аминокислотный или пептидный буфер Быстрота, высокая чувствительность, небольшой объем Пробы, удобен для очищенных белков Результаты варьируют в зависимости от аминокислотного состава использование дноксана [77, 94] [c.347]

Выявление белков с помощью флуориметрии. Полиакриламидный гель флуоресцирует при длинах волн возбуждающего света 280 или 340 нм. Близкие длины волн возбуждают флуоресценцию соответственно нативных белков (максимум испускания 340 нм) и белков, меченных дансилхлоридом или 8-анилино-1-нафталинсерной кислотой (АНС спектр испускания при 460—520 нм). И хотя максимум спектра флуоресценции геля находится при 415 нм, т. е, довольно далеко от максимального испускания флуоресценции как нативных, так и меченых белков, его широкая полоса в значительной степени перекрывает спектры флуоресценции белков. Для приготовления нефлуоресцирующего геля необходимо добавить к смеси мономеров ди-тиотреитол или заменить ТЕМЭД сульфитом [463]. [c.183]

Ход определения. Инкубационная смесь объемом 3 мл содержала 100-мМ трис-НС1 буфер (pH 7,4) и 3 мг белка микросом. Реакцию начинали добавлением НАДФ-Н или НАД-Н до 33 мкМ концентрации и регистрацию флуоресценции проводили на флуориметре ЭФ-ЗМ (фильтр возбуждения 366 нм, фильтр регистрации 420 нм) при 30 °С в термостатированной кювете с подключенным к нему самописцем КСП-4. [c.59]

Растворы уреазы (25 нМ) в воде (pH 6) обрабатывали ВЧ-ультразвуком в течение 1.5-2 ч при температуре 56°С в присутствии возрастаюшдх концентраций полимерного антиоксиданта по-ли(ДСГ) в диапазоне от l( до 10- М. В табл. 5 представлены константы скорости инактивации уреазы ин и ку в поле УЗ-кавитации в присутствии поли(ДСГ). Величины и уз снижаются в 2 и 3 раза в присутствии 1.0 нМ поли(ДСГ), т.е. полимерный антиоксидант сильно тормозит УЗ-инактивацию уреазы в присутствии ингибитора в концентрации, которая в 25 раз ниже концентрации белка. Увеличение концентрации по-ли(ДСГ) в пределах 10- -10- М вызывает рост всех трех констант скорости инактивации уреазы пропорционально содержанию ингибитора, что связано с его непосредственным взаимодействием с ферментом. В нашей лаборатории показано, что поли(ДСГ) в воде представляет собой полиэлектролит [30], способный взаимодействовать с белками - амфолитами, что подтверждено на примере сывороточных альбуминов человека и быка методами разностной спектрофотометрии и флуориметрии [31]. Прочные нековалентные комплексы поли(ДСГ) с уреазой характеризуются снижением активности фермента в них в условиях УЗ-кавитации (повышение уз и ) и при [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология