Дансилхлорид

Недавно для определения аминокислот применили 1-(диметиламино) нафталин-5-сульфохлорид (дансилхлорид) с изотопом в метильной группе [94, 95 [c.310]

Гидразиды аминокислот удаляют реакцией с бензальдегидом, изо-валериановым и другими альдегидами, а находящуюся в водной фазе С-концевую аминокислоту анализируют методами хроматографии или электрофореза на бумаге и в тонком слое или с помощью аминокислотного анализатора. Смесь, получаемую после гидразинолиза, можно обрабатывать динитрофторбензолом или дансилхлоридом. Это дает возможность идентифицировать С-концевые аминокислоты в виде ДНФ- (с. 145) или ДНС-производных (с. 148). [c.156]

Рис. 6-7. Введение метки в аминокоицевой остаток трипептида с помощью дансилхлорида. После гидролитического расщепления всех пептидных связей дансильное производйое амино-коицевой аминокислоты можно выделить и идентифицировать. Благодаря интенсивной флуоресценции дансильных групп они выявляются в значительно меньших количествах, чем динитрофенильные группы. Поэтому дан-сильный метод по чувствительности намного превосходит метод с использованием фтордини-тробензола.

Дансилхлорид (5-днметил-аминонафталин-1 -сульфонил-хлорид ДНС) [c.322]

Биогенные амины 208,250, 254 Дансилхлорид Ацетонитрил -буфериьсс растворы [c.251]

Дансилхлорид (1-диметиламинонафталин-5-сульфонилхлорид) обладает сильной флуоресценцией. Он дает с аминокислотами производные, которые можно обнаружить и измерить даже в очень небольших количествах. Напишите структурную формулу соответствующего производного глицина. [c.418]

Раствор дансилхлорида в ацетоне — 2 мг/мл. Указанный раствор не следует долго хранить. [c.149]

М,М-диыетил-аминонафталин-- 1-сульфо)(лорид (Дансилхлорид) [c.217]

Среди известных люминофоров — фталевый альдегид, 1 -диметиламино-5 нафталинсульфохлорид (дансилхлорид), фенилизотиоцианат. Метод отличается высокой селективностью, а его чувствительность на 2-3 порядка превышает возможности УФ-детектирования. Часть капилляра облучается УФ-светом соответствующей длины волны, а испускаемый свет регистрируется перпендикулярно направлению входящего излучения. Простые модификации приборов обеспечивают фиксированные длины волн возбуждения и регистрации флуоресценции, те, что сложнее, позволяют варьировать длину волны возбуждения [122]. Более дорогие приборы с этим видом детектирования имеют монохроматоры как для возбуждающего, так и для флуоресцентного света, благодаря чему детектирование становится высоко специфичным. Необходимо обращать внимание на явление тушения флуоресценции и предотвращать его возникновение (если детектирование не проводят по косвенному варианту, в основе которого лежит тушение люминесценции ведущего электролита) [130]. Флуоресцентное детектирование требует применения импульсных источников света, в качестве которых использу- [c.352]

Одновременное использование нескольких флуорохромов дает возможность метить различные места сложной молекулы и таким образом судить об их взаимном пространственном расположении. В результате изучения миграции энергии между двумя флуорохромами в молекуле ДНК разработан метод определения доли участков, свободных от белка [11, 53]. Аналогичными опытами на иммуноглобулине с использованием дансилхлорида и флуоресцеина было установлено расстояние между местом прикрепления гаптена — компонента антигена, определяющего его специфичность, — и дисуль-фидным мостиком, соединяющим тяжелую и легкую цепи иммуноглобулина [54]. [c.296]

Аминогруппы белков и пептидов при щелочных значениях pH взаимодействуют с флуоресцентным красителем диметиламинонафта-ленсульфонилхлоридом (дансилхлоридом, ДНС—С1) [c.148]

Помимо а- и е-аминогрупп дансилхлорид вступает в реакцию с ОН-группами тирозина, 5Н-группами цистеина и имидазольными кольцами гистидина (два последних соединения неустойчивы при щелочных значениях pH), а также с аммиаком, растворенным в воде. При взаимодействии ДНС—С1 с аммиаком образуется дансилсульфо-намид (ДНС-ЫНг). При щелочных значениях pH, дансилхлорид подвергается гидролизу с образованием дансилсульфоновой кислоты (ДНС—ОН). После окончания реакции дансилирования модифицированный белок или пептид подвергают кислотному гидролизу. Боль- [c.148]

Наиб, распространение для определения N-концевых остатков находит данейльный метод. Его первая стадия-присоединение дансилхлорида (1-диметиламинонафталин-5-сульфохлорида) к непротонированной а-аминогруппе с образованием дансилпептида (ДНС-пептида) Затем последний гидролизуют 5,7 н. р-ром НС1 при 105°С, в результате чего освобождается N-концевая а-ДНС-аминокислота, к-рая обладает интенсивной флуоресценцией в УФ-области спектра для ее идентификации достаточно 0,1-0,5 нмоля в-ва. [c.250]

Еще один способ изменить свойства системы в целом дпя решения аналитической задачи — дериватизация определяемых веществ. Таким образом может быть изменена полярность соедннення, увеличена чувствительность его жгектирования, а отклик может стать более селективным. Например, аминокислоты дериватизуют в гвдролизатах белка реакцией с дансилхлоридом (1-диметиламинонафталин-5-сульфонилхлоридом), при этом получаются флуоресцирующие соединения (рис. 5.3-12). [c.280]

Особо чувствительный метод двойной метки основан на применении меченого ( Н]-дансилхлорида в качестве реагента и меченой [ С]-аминокислоты как внутреннего стандарта. Отношение Н С в дансильном производном зависит от отношения количества добавленной ( 0]-аминокислоты к концентрации немеченой аминокислоты в пробе. Этот метод особенно подходит для идентификации аминокислот в биологическом материале. Его чувствительность лежит в пикомольной области [196]. [c.66]

ДНФ-группу вытеснила Л -(1-диметиламинонафтил-5-сульфо-нильная) или дансильная группа, которую можно вводить при реакции пептида или белка с 1-диметиламинонафтил-5-сульфонил-хлоридом (8) при pH 8 схема (13) . Дансильные производные аминокислот и пептидов сильно флуоресцируют их можно отделить и идентифицировать с помощью тонкослойной хроматографии, например на е-поликапролактаме [16]. Обычная чувствительность (примерно 100 пикомоль) может быть повышена до 25 фемтомоль при использовании [ Н]-меченного дансилхлорида с последующей авторадиографией [17]. [c.266]

Дансильный метод основан на получении производных N-koh цевой а-аминокислоты при обработке дансилхлоридом и после дующем отщеплении при гидролизе н. хлороводородной кис лотой (105 °С, 12—16 ч). ДНС-амннокислоты обладают интен сивной флуоресценцией, позволяющей обнаруживать их в ни чтожно малых количествах. [c.350]

Анализ аминокислот методом жидкостной хроматографии разрабатывался многими исследователями В настоящее время одним из самых чувствительных считается ВЭЖХ-метод определения аминокислот в виде даисилпроизводных Получают указанные производные путем обработки пробы аминокислоты 5-диметиламинонафталинсульфанилхлоридом (дансилхлоридом или ДНО [c.166]

При анализе концевых аминокислот часто применяют дансилпроизводные аминокислот. Их получают обработкой растворов аминокислот дансилхлоридом в ацетоне при pH = 9,5 в 0,05 М боратном буфере. [c.116]

Флуоресцируюш ий метчик должен специфически связываться с изучаемым веш,еством и не должен связываться с другими сопутствующими веществами. Это требование особенно существенно в медицинской диагностике, иммунофлуоресценции и люминесцентной цитохимии, где специфичность связывания метчика с изучаемым веществом, тканью или клеткой целиком определяет пригодность его для целей специфического обнаружения. Во всех подобных случаях необходимо проводить тщательный контроль, позволяющий убедиться в том, что весь метчик действительно специфически связался, а не связанный удален из среды. Особую ценность при этом имеют метчики, которые не флуоресцируют в растворенном состоянии и начинают флуоресцировать только после связывания с изучаемым веществом. Таким свойством обладает 1-диметиламинонафталин-5-сульфо-хлорид (дансилхлорид), применяемый для метки белков. Еще лучшим метчиком оказался флуорескамин (I), флуоресцирующий только после связывания с аминокислотами и б елками [13] [c.291]

Очень часто флуорохромы применяют для количественного определения следовых количеств выделенных и очищенных веществ (белков, аминокислот, лекарственных веществ). В этом случае требования к постоянству квантового выхода красителя и его спектра люминесценции в различных условиях несколько ниже, так как для каждого отдельного метода и вещества можно с помощью эталонов сделать пересчет на абсолютные величины. Именно так поступают при использовании дансилхлорида или флуорескамина в количественной хроматографии [13, 41, 42]. Количественное определение белков и аминокислот по интенсивности люминесценции связанных с ними флуорохромов в настоящее время применяется и в биохимии, и в медицине, и в сельском хозяйстве [43]. [c.295]

Другим реагентом, используемым в качестве метки, позволяющей идентифицировать М-концевой остаток, служит дансилхлорид (рис. 6-7), который реагирует со свободной а-аминогруппой и дает дансильное проюводное. Последнее интенсивно флуоресцирует, вследствие чего его можно обнаружить и измерить при значительно более низких концентрациях, чем динитрофенильные производные. [c.148]

Методы получения и некоторые простые реакции присоединения альдегидов и кетонов Ч.2 (0) -- [ c.418 ]

Названия органических соединений (1980) -- [ c.0 , c.138 , c.253 ]

Справочник биохимии (1991) -- [ c.322 ]

Биологическая химия (2002) -- [ c.226 ]

Органические люминофоры (1976) -- [ c.29 , c.291 , c.295 ]

Основы биохимии Т 1,2,3 (1985) -- [ c.148 ]

Реактивы и препараты для микроскопии (1980) -- [ c.132 ]

Новые методы имуноанализа (1991) -- [ c.152 ]

Биохимия Т.3 Изд.2 (1985) -- [ c.29 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология