Микросом белки

В полученных разными методами препаратах микросом определяют содержание белка, учитывая, что теоретический выход препаратов по белку составляет 20—30 мг на 1 г ткани. [c.373]

Л. 6 выделяют из микросом путем центрифугирования клеточного гомогената при ускорении 105 000 g с послед, осаждением белков сульфатом аммония. Индивидуальные белки получают фракционированием с помощью хроматографии (в т. ч на гелях агарозы, содержащих ковалентно иммобилизованные фосфолипиды, и гель-фильтрацией на сефадексе), а также изоэлектрич. фокусированием в градиенте pH. Активность Л. б. определяют по перераспределению метки (изотопной, спиновой или флуоресцентной см. Липидные зонды) между донорными мембранами, содержащими меченые липиды, и немечеными акцепторными мембранами. [c.598]

Определена также структура солюбилизированного цитохрома Ьв из микросом печени. Хотя точная функция его неизвестна, можно думать, что он играет роль, подобную роли цитохрома с, взаимодействуя с ферментативной системой эндоплазматического ретикулума, катализирующей образование ненасыщенных жирных кислот. Белок содержит 93 аминокислотных остатка, а еще 44 (преимущественно гидрофобных) отщепляются с Ы-конца в процессе солюбилизации белка. Вероятно эта Ы-концевая часть служит гидрофобным якорем, погружаемым в мембрану эндоплазматического ретикулума. Гем в цитохроме Ьв не связан ковалентно с белком, но прочно удерживается между двумя боковыми цепями гистидинов. По способу свертывания цепи этот белок совершенно не похож ни на цитохром с, ни на миоглобин. И в этом случае не видно путей переноса электрона от атома железа на поверхность молекулы [23]. [c.375]

Взяв за основу происхождение организма, различают растительные, животные, вирусные и бактериальные белки, в то же время учитывая органы и клеточные органеллы — белки плазмы, мышечные белки, белки молока, яиц, рибосомные белки, белки клеточного ядра, микросом и мембран. [c.344]

Поскольку микросомы так малы, что их с трудом можно рассмотреть даже в электронный микроскоп, строение нх изучено плохо. По всей вероятности, оии представляют собой пузырек, окруженный мембраной и утыканный очень. маленькими частичками величиной 100—150 ангстрем, состоящими из нуклеиновой кислоты и белка. Химический состав микросом сравнительно прост. Они содержат жироподобные венгества, белки н рибонуклеиновую кислоту (РНК). [c.160]

Одновременно этим же методом проводилось определение белка в надосадочной жидкости, полученной после осаждения митохондрий. Следует отметить, что в пей, помимо растворимого цитоплазматического белка, содержится также фракция микросом. Поэтому в данном случае мы лишь условно называем эту фракцию растворимым цитоплазматическим белком. [c.66]

В клетках, пограничных с зоной заражения, накапливаются различные метаболиты, играющие важную защитную роль против возбудителя черной гнили. Наряду с низкомолекулярными метаболитами наблюдается новообразование белка, в частности белка клеточных структур — митохондрий и микросом. Высказывается [c.251]

Микросомы с помощью соответствующих реагентов можно разделить на отдельные компоненты рибосомы, которые содержат почти всю РНК микросом, около 20% их белка и очень мало фосфолипидов, могут быть затем разделены на белки и нуклеиновые кислоты (см. табл. 11.4 и рис. 11.7). Мембрана [c.94]

Рибосомы шероховатого ЭР удерживаются на мембране частично благодаря растущим полипептидным цепям, продвигающимся сквозь мембрану по мере своего синтеза (см. ниже). Однако, если образование полипептидных цепей прерывается под действием какого-либо ингибитора (например, пуромицина), то рибосомы все равно остаются связанными с мембраной шероховатых микросом. Это сродство значительно повышается в растворах с низкими концентрациями солей. Если в таких условиях смешать очищенные рибосомы с мембранами шероховатых микросом, предварительно лишенными рибосом, то такие ободранные мембраны вновь приобретают то же количество рибосом, которое было на них после выделения из клеток. Участок связывания с мембраной находится на большой субъединице рибосомы, но до сих пор еще неясно, с каким из многочисленных белков мембраны шероховатого ЭР связывается рибосома. Установлено, однако, что для связывания рибосом с мембраной ЭР в физиологических условиях требуется дополнительное, более специфическое прикрепление, для которого необходим вновь созданный белок, несущий сигнальный пептид. [c.43]

Активация глюкоэо-6-фосфатазы детергентами. Процедура активации фермента в мембранных препаратах проводится прй 0°С под действием тритона Х-100 или дезоксихолата натрия. К 0,9 мл суспензии микросом (примерно 20 мг белка) добавляют 0,1 мл детергента до необходимой концентрации. Через 10 мин инкубации при помешивании действие детергентов прекращают пятикратным разведением суспензии 0,25 М сахарозой. Обработку микросом детергентами проводят непосредственно перед началом экспериментов. [c.372]

Рибоиуклеииовые кислоты (РНК) — нуклеиновые кислоты, полимеры нуклеотидов, в состав которых входят фосфорная кислота, рибоза и азотистые основания — аденин, цитозин и урацил содержатся главным образом в цитоплазме и микросо-мах животных и растительных клеток. РНК участвует в биосинтезе белка. Риформинг — способ переработки нефтепродуктов с целью получения высокооктановых бензинов, ароматических углеводородов, [c.113]

Исследования функциональной роли рибосом щли параллельно с их обнаружением и структурным описанием. Первой убедительной демонстрацией того, что именно рибонуклеопротеидные частицы микросом ответственны за включение аминокислот в новосинте-зированный белок, были эксперименты П. Замечника с сотрудниками (США), опубликованные в 1955 т. За этим последовали эксперименты из той же лаборатории, показавшие, что свободные рибосомы, не прикрепленные к мембранам эндоплазматического ретикулума, также включают аминокислоты и синтезируют белок, освобождающийся затем в растворимую фазу (1957). Функции бактериальных рибосом были предметом интенсивных исследований группы Р. Б. Робертса (США) К. Мак Киллен, Р. Б. Робертс и Р. Дж. Бриттен в 1959 г. окончательно установили, что белки синтезируются в рибосомах и затем распределяются по другим частям бактериальной клетки. [c.50]

Трудно говорить об образовании мембран de novo, поскольку существование клетки предполагает существование ее мембран. Одиако можно считать установленным, что процесс формирования клеточной мембраны идет непрерывно, путем введения в иее новых составных частей, обновления компонентов, прежде всего липидов, белков и т. п. В частности, полупериод жизни мембранных компонентов клеток печени, в течение которого обновляется половина их исходного содержания, составляет для белков микросом, ядерной мембраны и цитоплазматической мембраны 2—3 дня, белков внешней митохондриальной мембраны — 5—6 дней, внутренней митохондриальной мембраны — 8—10 дней, для липидов микросом — [c.586]

Нуклеиновые кислоты являются существенными составными частями клеток, такими же важными для жизни, как и белки. Нуклеиновые кислоты имеют макромолекулярное строение, причем молекулярные веса, определяемые при помощи ультрацентрифуги, лежат в пределах от 200 ООО до нескольких миллионов. В клетках нуклеиновые кислоты связаны с белками слабыми связями, по-видимому, в виде солей (нуклеопротеиды, см. ниже). Нуклеиновые кислоты являются главными компонентами хромосом, микросом и вирусов. Они играют важную роль в синтезе белков и обладают свойством автовоспроизведения (см. ниже). [c.773]

Обработка суспензии микросом дезоксихолатом натрия приводит к их разрушению. При этом из мембранного компонента образуются, во-первых, неседимеитирующий материал, содержащий большую часть белка и почти все фосфолипиды, пигменты и ферменты, и, во-вторых, фракция частиц, седиментирующих при 100 ООО g. Последняя содержит почти 20% белка и едва ли не всю РНК микросом (эта PH1I в сущности составляет основную часть РНК цитоплазмы). Эти мельчайшие частицы (которые необходимо строго отличать от собственно микросом), содернчащие приблизительно равные количества РНК и белка [105 — 108, 221], и являются фактически изолированными рибосомами. [c.131]

Добавление некоторого ограниченного числа нуклеотидных единиц к концу молекулы имеющегося полирибонуклеотида не может рассматриваться как полинуклеотидный синтез. Тем не менее эта реакция близка к нему, имеет большое значение и хорошо сейчас изучена. В 1956 г. было показано, что в присутствии фосфорилирующей системы Р -аденозин-5 -мопофосфат целиком включается в РНК в цитоплазме печени крыс [149]. После гидролиза диэстеразой змеиного яда был получен меченый 5 -АМФ, а после щелочного гидролиза — меченые цитидип-2 - и цитидин-З -монофосфаты. Это говорит о том, что в РНК АМФ преимущественно присоединяется к ЦМФ. Подобные наблюдения на различных биологических объектах были проведены многими исследователями. Эти данные наряду с данными о том, что основная часть включенного аденина освобождается после щелочного гидролиза в виде нуклеозида, свидетельствуют о том, что АМФ присоединяется к концу цепи РНК. На важность этих наблюдений впервые обратили внимание Замечник, Хоглэнд и их сотрудники [150—152] в Бостоне, работавшие с растворимой, т. е. транспортной, РНК (s-PHK) цитоплазмы печени крысы. s-PHK отличается от РНК рибосом или микросом своеобразной способностью акцептировать нуклеотиды, присоединяясь к ним своей концевой группой, Такое присоединение нуклеотидов к концу цепи РНК обязательно предшествует прикреплению аминокислот в процессе биосинтеза белка. Все s-PHK из тканей животных, дрожжей и бактерий ведут себя в этом отношении одинаково. [c.251]

Если суспензию микросом из печени крысы обработать дезоксихолатом, то рибосомы (стр. 131) отделяются от микросомных частиц и их можно выделить центрифугированием при 105 ООО g в виде фракции, нерастворимой в дезоксихолате. Показано, что в них содержится вся РНК и одна шестая часть белка исходных микросом [36]. Мы уже обсуждали строение рибосом в гл. VIII. [c.265]

Роль нуклеиновых кислот в синтезе белка изучали многие исследователи, но, несмотря на большое количество экспериментов, она остается еще не выясненной. В ряде работ подчеркивалось, что синтез рибонуклеиновой кислоты и белка, как и включение аминокислот, связан с фракцией микросом [582, 637]. Исследование процессов включения в ядерных и безъядерных фрагментах ацетабулярии показало, что лишенные ядра фраг-ментб способны включать аминокислоты [641]. В общем данные, доказывающие участие дезоксирибонуклеиновой кислоты в синтезе белка, немногочисленны. Роль рибонуклеиновой кислоты не установлена, хотя высказан ряд предположений о том, что рибонуклеиновая кислота может участвовать каким-то образом [c.279]

Как показали недавно проведенные опыты, во всех частях покоящегося семени синтез белка может быть полностью выключен [49]. Является ли это следствием структурной неполноценности рибосом или отсутствия информационной РНК, еще не выяснено. В препаратах неотмытых микросом из семядолей ненабухших семян земляного ореха наблюдается лишь незначительное включение аминокислот в белок. В то же время аналогичные препараты из набухших семян быстро включают аминокислоты. Имеются данные, указывающие на то, что во время поглощения воды происходит активация или синтез информационной РНК [49]. [c.481]

Например, Виллокс с сотр. [32] в исследованиях метаболизма анилина у пауков хроматографировал водорастворимые метаболиты на сефадексе G-15, проводя элюирование водой. В этом случае, при отборе фракций по 15 мл, жидкостный сцинтилляционный счет показал наличие двух основных метаболитов. Гель-хроматография часто используется для анализа высокомолекулярных комплексов. Игл [33] анализировал экстракты, содержащие индолуксусную кислоту, связанную с белком из растений, на колонках с сефадексом G-25 или G-50. Элюат собирали по фракциям объемом около 2 мл и для измерения активности отбирали пробы по 0,2 мл. Нельсон с сотр. [34] использовал сефадекс G-10 для разделения продуктов, которые образовались при инкубировании микросом печени в присутствии [ С] ацетилгид-)азина. Они собирали фракции по 2 мл. Клейн с сотр. 35] хроматографировал на сефадексах G-I00 и G-200 55]гепаран-сульфат и также использовал метод со сбором фракций. Гель-хроматографию применяют и для разделения полисахаридов. Пример разделения меченых В-глюканов приведен в работе Говарда с сотр. [36]. [c.193]

Особую группу составляют липопротеины, входящие в состав клеточных мембран и структурных элементов цитоплазмы (митохондрий и микросом). Самый факт наличия липидов в этих элементах клеток известен уже давно, однако до сих пор мы почти ничего не знаем о характере их связей. В отличие от липидов жировой ткани, липиды, входящие в состав клеточных мембран и структурных элементов цитоплазмы, не окрашиваются ни суда-ном, ни шарлаховым алым, ни нильским синим. Поэтому их часто называют замаскированными липидами . Отсутствие у названных липидов способности соединяться с липофильными красками является веским доказательством в пользу того, что они связаны с белками. Митохондрии клеток печени содержат 15—20% липидов [17]. Субмикроскопические частицы (микросомы), выделенные из печени или поджелудочной железы путем центрифугирования при высоких скоростях, содержат до 40—50% липидов, связанных с нуклеопротеидами [18] (см. также стр. 260). [c.230]

Наличие митохондриального типа синтеза белка в НО подтверждается следующими данными 1) система для включения АК in vitro не требует добавления рН-5 фракции, с-РНК и микросом, экзогенной АТФ или АТФ-генерирующей системы, т. е. в самих НО есть богатые эндогенные энергетические источники 2) неспособность РНКазы ингибировать синтез белка 3) торможение включения АК ингибиторами цикла Кребса и разобщителями окислительного фосфорилирования [c.40]

Инкубацию суспензии микросом, миелина и синаптосом с ПАВ проводили в течение 30 мин. при 4—5° С, за исключением специальных опытов по изучению длительности воздействия ПАВ, в которых инкубационное время было различно. В течение времени воздействия ПАВ на фермент содержание белка составляло 0.5 мг/мл. Mg +-, Na -, К" -АТФазную активность определяли как описано ранее (Палладии и др., 1970). В пробу вносили по 0.1 мг белка, что соответствовало 0.2 мл смеси суспензии и ПАВ. Фосфор определяли по методу Фиске и Суббароу, белок — по методу Лоури. ККМ определяли по изотермам поверхностного натяжения (Ребиндер, 1959). Изотермы поверхностного натяжения исследуемых ПАВ измеряли при температуре 8.5° С в водном растворе и в суспензии микросом при концентрации белка в ней 0.5 мг/мл методом наибольшего давления пузырьков (Методы испытаний водных растворов ПАВ, 1965). Растворы готовились на бидестиллированной воде. Для исследования выбранных нами систем указанный метод имеет то преимущество по сравнению с другими, что позволяет измерять истинную поверхностную активность. В других же методах, например в методе Вильгельми, использование платины для систем, в которых содержатся азотсодержащие или оксиэтилиро-ванные соединения, приводит к заниженным значениям ККМ из-за повышенной адсорбции этих компонентов на платине в результате комплексо-образования. Исследования но определению ККМ проводили в отделе поверхностно-активных веществ сектора нефтехимии Института химии высокомолекулярных соединений АП УССР. [c.119]

Тритон Х-100 активировал фермент в микросомах и миелине в концентрации 0.025% при содержании белка в пробе 0.5 мг/мл, в то время как для синаптосом активирующая концентрация детергента была несколько ниже — 0.01%. Максимально активирующая концентрация трис-дезоксихолата для синаптосом была 0.05%, что вдвое ниже концентрации, необходимой для активации фермента микросом и миелина, для которых она составляла 0.1%. Активирующая концентрация додецилсульфата натрия для двух фракций—микросом и синаптосом—была одинакова и составляла 0.01%, а для миелина несколько выше — 0.025%. Более высокие копцентрации додецилсульфата натрия обусловливают резкое сни5кение Ка -, К -АТФазной активности во всех трех фракциях. Дигитонин эффективнее других ПАВ активировал Ка" -, К -АТФазу в микро- [c.121]

Вопросам динамического состояния белков и других составных частей клеток посвящена специальная глава книги (стр. 573). Здесь же следует отметить, что использование в исследованиях, наряду с радиоактивными и стабильными изотопами также отдельных элементов клеток гранул, митохондрий, микросом и ферментных экстрактов из клеток позволило весьма детально разобраться в ферментативных процессах, обеспечивающих обновление аминокислотного состава белков тканей. Установлено, что обновление ами1юкислотного состава белков происходит при определенных условиях. Аминокислоты, участвующие в этом процессе, как это имеет место в случае синтеза белковых молекул, подвергаются активированию. Активирование аминокислот происходит в присутствии кислорода, или же при добавлении к среде аденозинтрифосфорной кислоты. Продукта.ми активирования являются аденилаты аминокислот. Ферментативные процессы активирования аминокислот сосредоточены преимущественно в митохондриях, обновление же белков интенсивно происходит в лшкросомах клеток. В процессах обновления а.минокислотного состава белков участвуют нуклеиновые кислоты. [c.431]

Модель, объясняющая механизм встраивания в мембрану, была предложена на основе работ с эукариотическими системами микросом (содержащими рибосомы и эндоплазматический ретикулум). Эти системы способны упаковывать новосинтезированные белки в мембраны, но не функционируют в случае добавления уже выделенного п репротеина. В свое время была выдвинута гипотеза сигнальной последовательности, согласно которой наличие лидерной последовательности почти во всех секрети-руемых белках служит своего рода сигналом, присутствие [c.128]

В соответствии с сигнальной гипотезой секреторный белок в процессе его синтеза in vitro должен проникать в полость микросом. Чтобы убедиться в этом, применили протеазную обработку. Оказалось, что вновь синтезированный белок, образованный в отсутствие микросом, при добавлении протеазы деградирует. Тот же белок, синтезированный в присутствии микросом, остается интактным благодаря защите микросомной мембраны. Когда в бесклеточной системе транслировали белки, лишенные сигнального пептида, эти белки не попадали в микроеомы и поэтому оставались чувствительными к протеазной обработке. [c.44]

В направлении сигнального пептида к мембране ЭР участвуют 1) частица, распознающая сигнал (а signal-re ognition parti le, SRP), связывающая сигнальный пептид, и ее рецептор, известный также как стыкующий белок. Частицы, распознающие сигнал, были открыты в ходе экспериментов, которые показали, что отмывка микросом в растворах солей уничтожает их способность импортировать секреторные белки. Эту способность можно восстановить, добавляя супернатант, содержащий солевой экстракт. Впоследствии фактор переноса был выделен Он [c.44]

Смотреть страницы где упоминается термин Микросом белки: [c.57] [c.278] [c.238] [c.88] [c.513] [c.199] [c.237] [c.482] [c.279] [c.378] [c.191] [c.46] [c.226] [c.66] [c.275] [c.44] [c.121] [c.161] [c.125] [c.32] [c.453] [c.43]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология