Экспериментальные исследования флуоресценции

Рис. 13.48. Сопоставление электронного спектра, вычисленного по методу ОКВ ССП, с экспериментальной кривой поглощения аценафтилена в гексане. Для каждой полосы экспериментального спектра указана поляризация перехода (Ц, Л.), определенная путем исследования поляризации флуоресценции. Под рисунком приведены теоретические данные о поляризации пере ходов (<-> , I) относительно оси, показанной на структурной фор муле молекулы. Там же приведены данные о вкладах различных конфигураций в волновые функции, найденные методом ОКВ размер кружка под цифрой 50 (на шкале волновых чисел) соответствует 100%-ному вкладу.

Вследствие изменения донорно-акцепторных свойств можно ожидать, что электронное возбуждение должно также влиять и на кислотно-основные свойства. Экспериментальные исследования зависимости спектров флуоресценции от pH показывают, что молекулы в состоянии 5[ могут быть либо более сильными, либо более слабыми кислотами, чем в основном состоянии 5о. Например, для фенолов значение рАГа для может быть на [c.151]

Экспериментальная проверка и применение. Экспериментальное исследование опалесценции коллоидных систем осуществляют либо путем измерения интенсивности света, рассеянного под данным углом, либо по ослаблению проходящего света. Первый метод часто называют нефелометрией, а соответствующие ему приборы — нефелометрами. Устройства, используемые во втором методе, представляют собой обычные фотометры. В случае сильно разбавленных золей изометрических, достаточно малых, непроводящих бесцветных или слабоокрашенных частиц результаты измерений могут быть интерпретированы в рамках теории Рэлея. В качестве переменных используются длина волны света, угол, под которым измеряется рассеянный свет, разбавление (концентрация) золя, а также поляризация рассеянного света. Интенсивность рассеянного и проходящего света определяется визуальными сравнительными методами или с помощью фотометров и фотоэлектрических умножителей. С целью устранения эффекта флуоресценции используют то обстоятельство, что длина волны флуоресценции всегда повышена по сравнению с длиной волны рассеянного света. Поэтому, если при визуальном измерении рассеянного света использовать красный свет, эффект флуоресценции будет исключен. Так как интенсивность рассеянного света сильно зависит от угла наблюдения, то в исследованиях необходимо использовать очень узкий пучок света, а измерения производить при сильном диафрагмировании. К сожалению, эти требования, далеко не всегда выполнимые, вносят довольно большие сложности в изучение рассеяния света коллоидными системами и требуют тщательного обдумывания эксперимента. Желающим заниматься этими исследованиями мы рекомендуем ознакомиться с приборами новейшей конструкции. [c.26]

Обзор В. Л. Ермолаева [219] Перенос энергии в органических системах с участием триплетного состояния охватывает твердые растворы и кристаллы. В последнем разделе этого обзора рассматривается перенос энергии с участием триплетных состояний в парах, жидкостях, молекулярных соединениях и при фотохимических реакциях. Основная часть обзора посвящена детальному описанию экспериментальных исследований сенсибилизированной фосфоресценции в твердых стеклах при низких температурах, т. е. той области исследований, которая развивается А. Н. Терениным и В. Л. Ермолаевым [220]. Приведены значения квантовых выходов сенсибилизированной фосфоресценции, а также данные русских авторов об абсолютных значениях квантовых выходов обычной флуоресценции и фосфоресценции. В качестве доноров использовались бензофенон и другие ароматические кетоны, а в качестве акцепторов — многочисленные производные нафталина. Обзор содержит 120 ссылок, в том числе 60 на работы советских авторов. [c.137]

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ [c.157]

Значительное число экспериментальных работ посвяш,ено исследованию тушения триплетны.х состояний свободными радикалами (табл. II.9). В присутствии радикалов времена жизни ЗФ заметно укорачиваются, а эффект влияния магнитного поля на интенсивность флуоресценции имеет обратный знак — (интенсивность увеличивается с повышением напряженности поля). Общая схема процесса имеет вид [c.187]

До недавнего времени экспериментальные исследования колебательной релаксации осуществлялись либо в ударных волнах, либо но поглощению и дисперсии ультразвука." Результатом измерений в обоих случаях является время релаксации колебательной энергии молекул [18, 77, 379, 380]. С созданием лазеров появилась возможность исследования вероятности переходов между отдельными уровнями методом лазерной флуоресценции [381—386]. [c.94]

Различные типы фотолюминесценции, рассмотренные в гл. I и II, приведены в табл. 11 вместе с механизмами, по которым их можно распознать экспериментально. Отметим, что ко времени написания книги рекомбинационная замедленная флуоресценция и рекомбинационная фосфоресценция были обнаружены только в твердых средах. Замедленная флуоресценция типа Р в жесткой среде пока не обнаружена, но ее, несомненно, можно получить при высокой концентрации растворенного вещества. Не вызывает сомнения, что во всех жидких растворах, в которых испускается замедленная флуоресценция типа Р, должна наблюдаться и сенсибилизованная фосфоресценция (возможно, с низкой интенсивностью). В твердом растворе при высоких концентрациях акцептора ее наблюдали Теренин и Ермолаев [106] в классических исследованиях, впервые продемонстрировавших существование процесса переноса энергии от три- [c.125]

Используя неразрушающую технику рентгеновского излучения, с помощью РМА и РЭМ можно провести количественный анализ состава области массивного образца размером 1 мкм При исследовании образцов в виде тонких пленок и срезов органических материалов размер анализируемого объема уменьшается приблизительно в 10 раз от значения для массивных образцов. Для анализа металлов и сплавов обычно используется метод трех поправок. В качестве эталонов можно использовать чистые элементы или сплавы, причем поверхности образцов и эталонов должны тщательно готовиться к анализу и анализироваться в идентичных экспериментальных условиях. Для анализа геологических образцов обычно используется эмпирический метод, или метод а-коэффициентов. Для этого класса объектов вторичная рентгеновская флуоресценция незначительна, и при анализе используются эталоны из окислов элементов с близким к образцу атомным номером. Биологические образцы часто повреждаются бомбардирующим электронным пучком. Важно обеспечить, чтобы эталоны находились в такой же форме в матрице, что и образец. Цель настоящей главы состоит в том, чтобы дать детальное описание различных методов количественного анализа для неорганических, металлических и биологических образцов различного вида массивных образцов, малых частиц, тонких пленок, срезов и поверхностей излома. [c.5]

Итак, проведенные нами исследования спектрального распределения и температурной зависимости вспышечного действия видимого света на люминесценцию окрашенных щелочно-галоидных кристаллов и изложенные здесь результаты других авторов по инфракрасной флуоресценции этих кристаллов приводят к важным выводам о роли электронных центров окраски в явлениях люминесценции окрашенных кристаллов щелочно-галоидных соединений. Экспериментальные данные бесспорно доказывают, что электронные центры окраски в этих кристаллах являются одновременно и центрами свечения и центрами захвата электронов. [c.70]

Существуют два дополняющих друг друга пути исследования того, из каких видов энергии слагается энергия активации. Одним из них является экспериментальная проверка того, какой вид энергии должен быть подан в систему, чтобы вызвать протекание реакций. Второй состоит в изучении видов энергии, содержащейся в молекулах, которые получаются в ходе экзотермических реакций. По принципу микроскопической обратимости те же самые виды энергии будут приводить к обратной реакции. К счастью, существует несколько методов, с помощью которых можно определить энергии продуктов 1) реактивное рассеяние молекулярных пучков, 2) хемилюминесценция в инфракрасной области, 3) флуоресценция и 4) химические лазеры [116]. Результаты могут содержать весьма подробную информацию, включая заселенности отдельных энергетических уровней. [c.569]

Тесное соотношение между флуоресценцией хлорофилла и его фотосенсибилизирующей активностью, обнаруженное из параллельных измерений выходов фотосинтеза и флуоресценции, сделало флуоресцентные исследования важным средством для кинетического анализа фотосинтеза. Поэтому мы намерены ограничиться в настоящей главе только некоторыми общими соображениями на эту тему, оставляя более детальное описание экспериментальных результатов до тех глав четвертой части, которые касаются влияния на кинетику фотосинтеза интенсивности света, температуры, концентрации СОд и других внешних факторов. [c.231]

В результате исследований тушения атомной флуоресценции элементов воздухом и кислородом установлено, что тушащим агентом является кислород [437]. Из экспериментальных данных были вычислены значения продолжительности существования атомов в возбужденном состоянии, а затем эффективность тушащих столкновений [438]. Установлено, что эффективность равна 1 для флуоресценции атомов Нд и XI (т. е. каждое столкновение с кислородом приводит к тушению), и 0,36 для флуоресценции С(1. Механизм столь эффективного тушения [c.204]

Экспериментальных данных об относительных скоростях внутренней и интеркомбинационной конверсии довольно мало. Для получения этих данных необходимы измерения зависимости выхода флуоресценции и фосфоресценции от длины волны возбуждающего света. Исследований такого рода было выполнено немного, главным образом потому, что точные эксперименты проводить трудно. Вебер и Тил [201] обнаружили, что выход флуоресценции для двадцати щести органических соединений в растворе не зависит от длины волны возбуждающего света (А, > 2100 А). [c.102]

Продолжительность времени затухания. Требуются более надежные экспериментальные данные о продолжительности времени затухания сцинтилляции и флуоресценции чистых кристаллов, бинарных и тройных растворов. Особый теоретический интерес представляют исследования влияния размеров кристалла в тех случаях, когда они соизмеримы с длиной свободного пробега экситона, и соотношение между величинами молекулярного времени затухания в кристалле и в разбавленном растворе. Необходимы также уточненные данные о продолжительности времени затухания бинарных и тройных растворов при различных концентрациях компонент с целью [c.223]

Мы должны теперь дать некоторые объяснения природы за-преш,енного триплет-синглетного излучения. В разд. 2.6 мы полагали, что электрические дипольные переходы могут иметь место и при Д8 0, если S не дает хорошего описания системы. Оптические переходы между триплетными и синглетными состояниями могут наблюдаться, если триплет не является чистым, а содержит синглетную составляющую, и наоборот. В органических молекулах перемешивание синглетных и триплетных состояний происходит за счет слабого спин-орби-тального взаимодействия. Так как спин-орбитальное взаимодействие между состояниями одной и той же конфигурации запрещено, то, например, состояние (я, я ) может перемешаться с состояниями (п, я ) и .,(о, я ) и не может с состоянием (я, л ). Аналогично состояние (п, л ) перемешивается с состоянием (я, я ). Поскольку радиационный переход из состояния (я, я ) в основное состояние полностью разрешен, тогда как переход из (п, я ) в общем случае частично запрещен, следовательно, переход Т(п, я )->-5о является более разрешенным, чем (я, я )- 5о. Таким образом, относительная вероятность триплет-синглетных переходов из состояний (п, я ) и (я, я ) отличается от той, что наблюдается при синглет-син-глетных переходах. Экспериментальные исследования естественных времен жизни флуоресценции находятся в соответствии с этими предсказаниями в ароматических углеводородах, имеющих нижнее триплетное состояние (я, я ), радиационное время жизни равно приблизительно 1—10 с, в то время как у карбонильных соединений нижним триплетным состоянием является уровень (л, я ), характерное время жизни которого обычно равно 10 2—10- с. [c.100]

Конечно, в этом отношении необходимо проводить больше экспериментальных исследований и могли бы быть достигнуты гораздо лучшие результаты, если диапазон перестройки мог бы простираться до области 200—300 н.м. При использованин резонансной флуоресценции и.меется только одна возможность — использовать лазер с узкополосным излучением. В этом отношении рассеяние может быть компенсировано путем записи сигнала при двух длинах волн — одна настраивается на центр, а другая — чуть в сторону от контура поглощения. [c.238]

Когда в 1872 г. Менделеев сформулировал периодический закон, он приписал урану атомный вес 240, хотя в то время считали его равным 120 это дало возможность рассматривать уран как самый тяжелый элемент в периодической таблице. Тот факт, что атомный вес был действительно близок к 240, установлен впервые экспериментально Циммерманом в 1882 г. Неясность, окружающая уран, постепенно исчезала в результате открытия Бек-кереля, который в 1896 г. установил, что уран претерпевает радиоактивный распад. В связи с исследованиями флуоресценции урановых солей Беккерель, воздействовав уранилсульфатом калия на фотографическую пластинку, завернутую в черную бумагу, обнаружил, что это соединение вызвало ее почернение. Дальнейшие исследования показали, что все урановые соединения, минералы и сам металл действуют на фотографическую пластинку подобным образом. Это указывало на то, что данное явление оказывается свойством элемента урана. Вскоре после этих на- [c.110]

Хороший общий обзор выполненных до 1957 г. теоретических и экспериментальных исследований поляризации люминесценции (как флуоресценции, так и фосфоресценции) сложных молекул дан в гл. 4 книги П. П. Феофило-ва [9]. Особенно ценным является рассмотрение работ, выполненных советскими авторами. [c.125]

Превращения колебательной энергии электронно-возбужденных молекул. Один из экспериментальных методов изучения передачи колебательной энергии электронно-возбужденными молекулами основан на исследовании спектров флуоресценции при различных давлениях флуоресцирующего газа или в присутствии посторонних газов. Выше (стр. 305) уже указывалось, что в присутствии посторонних газов в спектре флуоресценции паров иода, наряду с резонансной серией и - 1, возникают новые продольные серии Деландра (Эти новые серии, а именпо серии [c.332]

Спектральный состав ультрафиолетового свечения рентгенизованных кристаллов каменной соли был объектом исследования различных авторов. Из-за слабой интенсивности свечения изучение его спектрального состава наталкивалось на экспериментальные трудности, В 1923 году Перрен [111 ], впервые обнаруживший флуоресценцию каменной соли под действием рентгеновых лучей, изучая спектральный состав этого свечения, определил, что максимум полосы ультрафиолетовой флуоресценции находится приблизительно в области 2400—2450 А°. [c.131]

Присутствие гидрофобных областей в структуре белков доказано экспериментально по данным растворимости углеводородов в растворах белков [283—286] и по интенсификации флуоресценции реагентов типа К—О—5 или А—О—5, связанных или сорбированных в этих областях. На большое значение флуоресценции при таких исследованиях впервые указывали Остер и Нишид-жима [287, 288]. Они подчеркивали, что молекула основания со свободно вращающейся группой хромофора начинает сильно флуоресцировать, если вращение заторможено вследствие адсорбции. Тушение флуоресценции вследствие теплого рассеяния энергии возбуждения за счет внутреннего вращения может быть уменьшено при фиксации планарной молекулы на биополимере. В последнее время подобное увеличение флуоресценции исследуется в связи с наличием в белках гидрофобных областей. Например, при адсорбции 1-анилино-8-нафталинсульфокислоты (АНС) на апомиоглобине и апогемоглобине, свободных от группы гема, флуоресценция группы претерпевает изменения добавление гема восстанавливает первоначальную флуоресценцию [289]. При адсорбции полоса флуоресценции 515 нм смещается в область 454 нм, а квантовый выход увеличивается в 200 раз, от 0,004 до 0,98. Вообще я — л возбужденные состояния я-электрон-ной системы стабилизуются по сравнению с основным состоянием за счет воздействия молекул растворителя в относительно большей степени, так что снятие этого эффекта интенсифицирует флуоресценцию и вызывает смещение в длинноволновую часть спектра. Опыты с модельными соединениями в растворителях с различными дипольными моментами свидетельствуют в пользу такого объяснения. Доказательством наличия в бычьем сыворо- [c.378]

После того как Релей предсказал, а Вуд в 1904 г. экспериментально обнаружил существование резонансной флуоресценции, т. е. резонансного рассеяния и поглощения света, это открытие явилось предметом многочисленных успешных исследований в атомной физике и оптике [39]. Хотя предсказанияРелея были сделаны на основе чисто классического (механического) описания резонансных явлений, само существование таких явлений в микросистемах является, конечно, сугубо квантовым свойством, связанным с наличием спектральных линий, характеризующих переходы между определенными энергетическими уровнями. [c.8]

В последующих простых и изящных экспериментах Мёссбауэр [18, 19] окончательно подтвердил правильность объяснения наблюденного им эффекта резонансной гамма-флуоресценции без отдачи и в то же время дал основу экспериментальной методики всех последующих исследований этого явления. [c.21]

Качественно теория хорошо согласуется с эксперименталь-ны.ми результатами, но объем данных, на основании которых можно было бы судить о степени количественного соответст-1ВИЯ, в настоящее время весьма ограничен. При этом результаты отдельных работ противоречат друг другу. Так, в [6] для полиметилметакрилатного раствора люминофоров величина Яо (расстояние между М) и Мг, при котором вероятность переноса равна вероятности спонтанной излучательной дезактивации) составляет 0,72 / о теор. В [7] наблюдается хорошее совпадение расчетных и экспериментальных значений / опри исследовании тушения флуоресценции хлорофилла. Полное согласие с теорией обнаружено в [8] и [9], где исследовались жесткие и толуольные растворы люминофоров. В [10] экспериментальная величина параметра переноса Р д с для жесткого полистирольного растшора в 1,4 раза выше расчетной Рт(с — концентрация Мг). В [11 —14] отношение А= Р /Р для жестких растворов люминофоров равно 1,8. [c.422]

Практически важно, что оптические свойства красителя в ацетонсодержащем растворе не зависят от природы других компонентов раствора (анион экстрагированной или растворенной соли, экстрагент) и стабильны во времени разбавление ацетоном экстракта любого соединения красителя, проведенное сразу после разделения фаз, позволяет получить раствор, поглощение и флуоресценция которого однозначно связаны с содержанием в нем катиона красителя что значительно сокращает объем экспериментальной работы при исследовании равновесий в экстракционных системах (глава 2) и обусловливает возможность единой оценки чувствительности экстракционно-фо- [c.28]

Лазеры с такими короткими импульсами, особенно с высокой частотой следования (вплоть до 10 МГц), дают возможность измерять и другую характеристику частиц — время туще-нпя люминесценции. Экспериментальные методы н проблемы, связанные с этими измерениями, детально обсуждаются в гл. 7. Улучшение селективности, достигаемое путем измерения этой допол1штельной величины, являющейся характеристикой частиц, особенно важно прп изучении флуоресценции в конденсированной фазе, когда спектральные полосы довольно широки (- 10 нм). При исследованиях газовой фазы сравнение измеренных времен флуоресценции с известными временами флуоресценции дает информацию о тушении вследствие соударений, что очень важно для аналитических измерений. [c.564]

На рис. II.9 представлена осциллограмма эмиссионного спектра, наблюдаемого при импульсном радиолизе раствора флуорена (0,01 М) в сквалане на электронном ускорителе с энергией 3 МэВ. Видно, что в магнитном поле интенсивность эмиссии после действия импульса (- -бО не) заметно увеличена. Наблюдаемый эффект означает, что в магнитном поле заселенность предшествующих синглетных ион-радикальных пар возрастает. Это находит качественное объяснение в рамках СТВ-механизма. Исследование полевой зависимости интенсивности флуоресценции, проведенное в работе [118], подтверждает этот вывод. Как видно из рис. 11.10, общий вид экспериментальной кривой аналогичен рассчитанной для СТВ-механизма (ср. с рис. II.I). Поскольку вььход синглетных состояний в магнитном поле увеличивается, одновременно должен уменьшиться выход триплетных возбужденных состояний. Хотя в последнем случае картина заметно усложняется из-за длинного времени жизни триплетных состояний, авторам работы [118] все же удалось экспериментально наблюдать небольшое уменьшение концентрации триплетов в магнитном поле (см. рис. II.10). [c.167]

При добавлении к сорбенту, насыщенному адсорбированным полимером,дополнительной порции чистого сорбента, наблюдается существенное увеличение степени св5цывания сегментов р, определенной методом ЯМР. Эю свидетельствует об образовании мостиков между различными частицами сорбента, связанными макромолекулой, одновременно адсорбированной на двух частицах, что существенно для понимания механизма взаимодействия дисперсных частиц при введении в дисперсную систему полимерных молекул. Этот эффект, как предполагают авторы, связан с тем, что часть сегментов, первоначально входящих в петлю, превращается в адсорбированную последовательность сегментов в результате адсорбции на незанятой поверхности добавленных частиц. Образование мостика означает, что часть молекул переходит с насыщенной адсорбционно частицы на ненасыщенную, что приводит к росту р. Применение метода ЭПР при исследовании влияния растворителя на конформацию адсорбированной молекулы показало, что ухудшение термодинамического качества растворителя способствует увеличению доли сегментов в последовательностях сегментов, связанных поверхностью. Мы здесь остановимся на вопросах оценки толщины адсорбционного слоя, поскольку эта величина будет очень существенна при дальнейшем обсуждении свойств поверхностных слоев, играющих определяющую роль в свойствах полимерных композитов. Экспериментально профиль концентрации полимера на поверхности раздела твердое тело—раствор может быть оценен оптическим и рентгеновскими методами. В работе [80] содержится обзор данных, полученных этим методом для различных полимеров. Типичные значения толщин определяемых областей 10 — 1000 нм. Информация в виде функции распределения полимера в адсорбционном слое в области его толщин до 6 < 10 нм может быть получена с помощью метода тушения флуоресценции [81]. [c.31]

С целью выяснения природы фотохимически активных частиц проведено большое число исследований, в которых сопоставлялось тушение флуоресценции реагентами или добавками каких-либо веществ со скоростью фотохимического превращения. Эти работы основывались на следующих соображениях. Флуоресценция и химическая реакция — конкурирующие процессы. Если в реакции с реагентами участвуют в основном обычные возбужденные молекулы, то каждый акт тушения флуоресценции реагентом является одновременно актом химической реакции. По этой причине, в случае тушения реагентом, должно выполняться условие Y + p = oust, где у и ср соответственно квантовые выходы флуоресценции и фотореакции. Если же флуоресценция тушится добавками веществ, не участвующих в реакции, то должно наблюдаться торможение фотохимического процесса. В подавляющем большинстве работ эти предположения не подтвердились, на основании чего и был сделан вывод об отсутствии связи между тушением флуоресценции и скоростью фотохимического превращения. Такого рода экспериментальные результаты объясняются тем, что фотохимически активными частицами, ведущими реакцию, являются метастабильные молекулы, которых значительно больше, чем возбужденных молекул в синглетном состоянии. [c.200]

В прис пгствии субстрата появляются два дополнительных центра связывания Mg + (или Мп +) с гораздо меньшим сродством к этим металлам. В то же время присутствие субстрата в 3—4 раза повышает сродство того из двух прежде существовавших центров, который проявлял меньшее сродство к этим ионам в отсутствие субстрата. Найденное для Мп + Кв. этого последнего центра хорошо согласуется с определенным в результате СРП-исследований [9, 21]. Однако необъяснимым остается то, что при этих исследованиях не удалось обнаружить второго более прочного места связывания Мп2+, особенно учитывая, что более прочный центр связывания Mg2+ наблюдался при изучении изменений ультрафиолетовых спектров и спектров флуоресценции енолазы, вызываемых этим ионом металла [308]. Различие в предположениях о роли ионов двухвалентных металлов в реакциях енолазы является прямым результатом противоречий в имеющихся экспериментальных данных. Эти противоречия должны быть разрешены до того, как будут сделаны какие-либо заключения о механизме этих реакций. [c.485]

В последние годы сильно возросло число экспериментальных и теоретических работ по исследованию передачи эиергип возбуждения прн атомных столкновениях. Целью настоящей работы является изучение ударов второго рода с помощью сенсибилизированной флуоресценции. [c.178]

Система полос видимой флуоресценции иода, впервые критически исследованная Вудом [34], хорошо изучена. Она легко возникает при возбуждении зеленой линией 5461 А ртутной дуги, и множество линий спектра флуоресценции приходится на область, удобную для экспериментальной работы. Эти полосы обусловлены переходами [11] (рис. 3-33) [c.152]

Как указано в предыдущем разделе, можно ожидать, что поведение сульфида цинка во многих отношениях будет сходно с поведением теллурида кадмия. В случае dTe правильность модели подтверждалась в основном измерениями электрических свойств. Однако в случае сульфида цинка благодаря большей величине запрещенной зоны и более глубоким энергетическим уровням для экспериментальной проверки теоретической модели необходимо исследование главным образом оптических свойств поглощения, флуоресценции, фотопроводимости. Зависимость оптических и электрических свойств от условий приготовления действительно показывает, что в поведении ZnS и dTe имеется некоторая аналогия. [c.490]

Вторичные процессы исследовались независимо от первичных процессов при использовании вместо ионизирующей радиации ультрафиолетового излучения для непосредственного возбуждения X [13—17]. Сравнения-результатов этих исследований с результатами исследований характера сцинтилляций тех же систем [18] показали, что вторичные процессы в общем случае не зависят от способа возбуждения, и это дает возможность разделить первичные и вторичные процессы. Несмотря на некоторые неопределенности в ранних экспериментальных данных, теперь уже ясно, что основные характеристики сцинтилляционного излучения — его спектр, время затухания, самопоглощение — аналогичны тем же характеристикам фотофлуоресценции. Метод возбуждения флуоресценции ионизирующим излучением менее эффективен, чем метод возбуждения ультрафиолетовым излучением. [c.156]

Форма клетки зависит от находящихся в данный момент в полимеризованном состоянии элементов цитоскелета. Существуют два экспериментальных подхода к исследованию сборки интерфазного цитоскелета, но каждый из них имеет свои ограничения. Один состоит в том, что в клетки вводится путем микроинъекции флуоресцентно меченный белок, способный участвовать в сборке цитоскелетных структур in vitro [182—186]. Внутриклеточная локализация этого белка изучается затем с помощью световой микроскопии. Структуры, идентифицированные таким образом, почти никогда не бывают артефактом, поскольку они выявляются также методом иммунофлуоресценции. Метод микроинъекций страдает некоторыми недостатками. С его помощью можно идентифицировать только такие цитоскелетные структуры, у которых происходит обмен мономерами с растворимой фазой. Стабильные структуры, у которых не происходит заметного обмена в течение нескольких часов, таким методом выявить нельзя. Метод микроинъекций не позволяет также различить процессы сборки и обмена. После инъекции сначала видна диффузная флуоресценция, которая затем локализуется в определенных точках такая картина равно согласуется и с предположением о том, что происходит сборка структур, способных к обмену, и с предположением о том, что инъецированный белок связывается с ограниченным числом связывающих участков. Различать эти возможности позволяет изучение кинетики процесса. Еще один недостаток рассматриваемого метода состоит в том, что на флуоресцентной картине размеры структур кажутся увеличенными по сравнению с действительными. Относительно результатов, получаемых данным методом, заметим также следующее 1) выявляемые им структуры, как правило, не являются артефактом 2) скорость, с которой выявляются структуры в опыте, отличается от скорости их формирования в клетке 3) в некоторых случаях наблюдаемая картина зависит от типа клеток [184] 4) определенное для микротрубочек направление сборки согласуется с тем фактом, что их быстро растущий конец является дистальным 5) наиболее подвижная форма актина, которую можно обнаружить в клетках [c.99]