Электрофорез см горизонтальных блоках

Электрофорез в горизонтальных блоках [c.47]

Электрофорез продолжается 6 ч при 140 В и 70 мА. Закончив электрофорез, крахмальный блок горизонтально разрезают на две половины, одну из которых окрашивают амидовым черным 10 В (см. стр. 87). [c.81]

Методика. Закончив электрофорез, крахмальный блок горизонтально разрезают на две половины. Одну половину окрашивают обычным образом, другую переносят на стеклянную пластинку и располагают колонки крахмала так, как показано на фиг. 9. Затем вокруг них наливают горячий раствор агара (приготовление см. на стр. 127), при застывании которого образуется слой толщиной [c.82]

Электрофорез в пористой среде можно вести как в горизонтальном, так и в вертикальном направлении. В первом случае часто говорят об электрофорезе в блоке , а во втором случае — в колонке . Нам кажется более оправданной классификация, при которой различие проводится в зависимости от способа извлечения зон если после опыта зоны вытесняются новыми порциями растворителя вдоль направления движения, прибор называется колонкой . Блоком же следует называть прибор, в котором предусмотрено механическое разделение пористого носителя на слои, каждый из которых промывается отдельно. [c.80]

Для успешного электрофореза необходим канал , в котором происходит разделение. Он может представлять собой колонку (вертикальную), плоскую ванну или прямоугольный блок (горизонтальный), в которых движутся белки. Связь обоих концов этого канала с электродами осуществляется через большие резервуары с буфером. Необходима также система охлаждения, чтобы поддерживать постоянной температуру канала . Из-за того что в свободном растворе трудно поддерживать устойчивую границу, буфер в этом канале может быть смешан с инертным порошком или материалом в виде гранул, что позволяет снизить до минимума как гравитационную, так и диффузионную нестабильность. Простейшая система представляет собой горизонтальный блок. Сухой порошок крахмала, сефадекс 0-25 (не удерживающий белок) или порошок любого другого полимерного материала смешивают с буфером так, чтобы образовалась густая суспензия, которую вносят в прибор. Избыток буфера удаляют. Вместо суспензии можно использовать очень крупнопористый гель, например 2%-ный агар или агарозу. Концы геля соединяют с увлажняемой тканью или другим материалом, образующим контакт с наполненными буфером резервуарами, в которые помещены электроды (рис. 5.14). [c.217]

Блок во время электрофореза можно устанавливать как горизонтально, так и вертикально. Последний способ предпочтительнее, так как разрешение получается несколько лучшее. На рис. 17 показано расположение частей прибора при электрофорезе в вертикальном блоке. Устанавливая разность уровней в электродных сосудах, можно скомпенсировать электроосмос. Если блок расположен горизонтально, уровень жидкости в сосудах должен быть одинаковым и на несколько сантиметров ниже поверхности блока. [c.92]

ЛЛ. Описание метода. Известно множество вариантов прибора для электрофореза в вертикальных или горизонтальных пластинах (блоках) полиакриламидного геля [24, 73, 142, 170]. Источник питания должен обеспечивать стабилизацию по напряжению и по току, наличие термостата в таких приборах необязательно. [c.18]

Как и в других видах горизонтального зонального электрофореза, положение стартовой линии следует выбирать, принимая во внимание свойства подлежащих разделению макромолекул и уровень электроосмоса при данных условиях. Этот уровень, разумеется, зависит от свойств поддерживающего материала (в крахмале он заметно выше, чем в певиконе), а также от pH и состава буфера. Если производится разделение бесцветных веществ, то за их перемещением можно следить, добавляя в пробу краситель, например бромфеноловый синий. Для предотвращения испарения с поверхности блока края полиэтиленовой пленки осторожно загибают вверх и укладывают на блок (лоток первого типа) или накрывают поверхность блока куском оберточного материала фирмы Saran (лоток второго типа). Электрофорез обычно проводят в холодной комнате. Перед включением напряжения блоку нужно дать остыть до температуры окружающего воздуха. При ионной силе буфера 0,05 целесообразно применять градиенты напряжения в 3,5—5 В/см. [c.49]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология