Аминокислоты разделение на колонке с крахмало

Область применения. Имеется много примеров применения колонок для препаративного разделения и очистки смесей белков, пептидов, аминокислот и т. д. Библиографию по крахмальным колонкам можно найти в обзоре [30]. Крахмал особенно пригоден для электрофореза сывороточных белков, которые на нем практически не адсорбируются. Но успешно исследовались и другие объекты в диапазоне pH от 2 до И. [c.90]

Крахмал, но в нем хорошо разделяются веш,ества, молекулярные веса которых лежат в пределах от 100 до 1000. Крахмал, разбухший при нагревании в воде примерно в 3 раза по сравнению с первоначальным размером частиц, становится проницаемым для более крупных молекул, таких, как инсулин, миоглобин и гемоглобин. Аминокислоты движутся через колонку, наполненную крахмалом, примерно в такой же последовательности, как при разделении на слабом катионообменнике однако этот ионообменный эффект можно устранить, используя для элюирования растворы соответствующей ионной силы. Партридж [17] обратил внимание на то, что сами ионообменные смолы обладают свойствами молекулярных сит, что повышает избирательность разделения. [c.219]

Для разделения свободных аминокислот можно, как показал Синдж (Synge, 1944), использовать колонки крахмала. Для промывания колонки применялся бутиловый спирт. Зоны аминокислот в колонке могут быть обнаружены пропусканием через колонку раствора нингидрина в эфире. Можно также собирать отдельные порции фильтрата и анализировать их качественно, пользуясь нингидриновой бумажкой. [c.146]

Ионообменная хроматография. Разделение смесей аминокислот на колонках с ионообменниками впервые было предложено Штейном и Муром в качестве ионообменника применялся крахмал Позднее крахмал был заменен ими на синтетическую смолу дауэкс 50x4, которая представляет [c.67]

СКОЛЬКИХ лет служила материалом для упаковки колонок, и на ней впервые удалось почти полностью разделить энантиомеры. (В 1944 г. было опубликовано сообщение о том, что основание Тре-гера разделено на колонке с лактозой длиной 0,9 м [2].) Разделяющая способность полисахаридов, в частности целлюлозы, была впервые обнаружена при попытке разделить рацемические аминокислоты методом бумажной хроматографии [3—5]. При этом выяснилось, что эти соединения в некоторых случаях дают два пятна на бумажной хроматограмме. Далглищ развил свою теорию трехточечного взаимодействия в 1952 г. на базе данных о бумажной хроматографии рацемических аминокислот [6]. Известны и другие ранние работы по непосредственному разделению энантиомеров аминокислот посредством бумажной хроматографии [7] и тонкослойной хроматографии на целлюлозе (ТСХ) [8]. Все это способствовало использованию целлюлозы и ее производных, а также крахмала и циклодекстринов в хиральной ЖХ. В настоящее время в качестве потенциальных хиральных сорбентов изучается ряд природных полисахаридов. [c.108]

Созданию современной аналитической хроматографии аминокислот предшествовало два очень важных события — разработка методов получения химически гомогенных белков (школа Норт-ропа, середина 30-х годов [1]) и организация промышленного производства ионообменных смол с последующим развитием ионообменной хроматографии (50-е годы). В промежуточный период были разработаны адсорбционная и распределительная хроматографии аминокислот (на бумаге и на колонках с сорбентами), оказавшиеся, однако, непригодными для решения практических задач. Так колоночная хроматография не нашла применения, главным образом, из-за несовершенства имеющихся в то время сорбентов, в основном природного происхождения. Тем не менее благодаря тщательному подбору условий анализа В. Стейну и С. Муру, лауреатам Нобелевской премии за 1972 г., удалось добиться вполне удовлетворительного разделения смеси аминокислот [2]. Однако этот метод оказался слишком трудоемким и также не нашел широкого применения, поскольку требовалась тщательная стандартизация крахмала, хроматографические свойства которого зависят от источника выделения и метода получения. [c.305]

Основы метода. Сайндж [10] показал, что сырой картофельный крахмал может быть употреблен в качестве неподвижной водной фазы. Если подвижной фазой служит водонасыщенный н-бутиловый спирт, то аминокислоты и пептиды двигаются на такой крахмальной колонке в виде резко очерченных полос в порядке, определяемом нх коэфициентами распределения между водой и н-бутиловым спиртом. Разделение аминокислот и пептидов на фракции может быть прослежено, если пропускать 0,5 д эфирный раствор нингидрина через проявленную /т -бутило-вым спиртом колонку. Эта реакция, как указывает Сайндж, позволяет различать аминокислоты от пептидов, так как окрашиваются только аминокислоты пептиды не дают окраски до нагревания. Хроматограмма на крахмале оказалась пригодной для разделения частичных гидролизатов белка, что очень важно для решения вопросов о структуре белка. [c.389]

За последние годы синтез большого количества разнообразных иорнообменных смол, обладающих большой сорбционной способностью и заметной избирательностью при адсорбции ионов, позволило значительно расширить область применения хроматографии. Большая часть работ по разделению различных смесей и выделению фармацевтических препаратов аминокислот и др. связана с использованием ионнообменных смол. Помимо адсорбционной и ионнообменной хроматографии в настоящее время применяется ряд новых видоизменений метода и из них наиболее эффективным является метод распределительной хроматографии, созданный в 1941 г. В основе метода лежит обмен вещества между подвижным растворителем и другим неподвижным растворителем, который не смешивается с первым, и находится в порах материала, заполняющего колонку. Если неподвижной фазой является вода, то в качестве носителей ее в колонке служит крахмал, целлюлоза, силикагель. В 1944 г. был предложен новый метод хроматографии на бумаге, возникший в результате использования фильтровальной бумаги в качестве носителя неподвижной фазы. Широко применяемые на практике методы хроматографии основаны, следовательно, на трех физических процессах молекулярной адсорбции, ионном обмене и распределении между жидкими фазами. Основной особенностью всех методов хроматографии является [c.239]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология