Культуры микоплазм

Бактериологический метод. Выделение чистой культуры микоплазм является наиболее точным способом подтверждения диагноза. Микоплазмы относят к прихотливым бактериям. Для их культивирования используют питательные среды с добавлением лошадиной сыворотки (источник холестерина) и дрожжевого экстракта (источник компонентов для синтеза нуклеиновых кислот). [c.251]

Ингибирование таллием для получения культур микоплазм и энтерококков [10, 38] [c.298]

Ингибирование пенициллином для получения культур микоплазм [c.301]

В культурах микоплазм обнаружены формы с наименьшими из всех известных клеточных микроорганизмов размерами. Поэтому, вероятно, именно микоплазмы можно считать наиболее простыми самостоятельно воспроизводящимися системами. По проведенным подсчетам теоретически наименьшая структурная единица, способная к самостоятельному воспроизведению на искусственной среде, не может иметь размеры меньше, чем сферическое тело диаметром 0,15—0,20 мкм или нить длиной приблизительно 13 мкм и диаметром примерно 20 нм. Все эти структуры встречаются в культурах микоплазм и, вероятно, могут рассматриваться как жизнеспособные репродуцирующиеся формы. По объему генетической информации, содержащейся в геноме, микоплазмы занимают промежуточное положение между Е. соИ и Т-фагами. [c.170]

Миконлазменный диагностикум. Взвесь убитой культуры микоплазмы пневмонии. Применяется для РСК и РПГ А. [c.157]

Бактериологическое исследование. Проводится путем посева материала, взятого из уретры, петлей на твердую питательную среду в чашку Петри и уколом в пробирку с полужидкой средой того же состава. В качестве питательной среды используют триптический перевар бычьего сердца, пептон, хлорид натрия, к которому добавляют дрожжевой экстракт и пенициллин (1000 ЕД) для задержки роста бактериальной микрофлоры. Посевы инкубируют при 37°С в течение 48 ч. Микоплазма образует колонии в виде яичницы-глазуньи с врастающим в среду центром и полупрозрачной периферией. Идентификацию выделенной культуры микоплазмы проводят по ферментации углеводов, разложению аргинина и серологическим свойствам в реакции ингибиции роста культуры специфической сьшороткой и нейтрализации метаболизма аргинина той же сывороткой. М. hominis в отличие от других видов микоплазм не ферментирует углеводы и разлагает аргинин. [c.223]

В связи с тем что в культурах микоплазм описаны формы с наименьшими из всех известных клеточных микроорганизмов размерами,, вероятно, именно микоплазмы можно считать наиболее простыми самостоятельно воспроизводящимися системами. Однако экспериментальное доказательство того, какие из наименьших полиморфных структур, обнаруженных у микоплазм, способны к самостоятельному воспроизведению, до сих пор не получено. Размеры мелких структур микоплазм, как указывалось выше, находятся за пределами разрешающей способности светового микроскопа, поэтому визуально невозможно проследить за их размножением. Выделить однородную фракцию мелких частиц и показать их способность к размножению также пока не удалось. По проведенным подсчетам, теоретически наименьшая структурная единица, способная к самостоятельному воспроизведению на искусственной среде, не может иметь размеры меньше, чем сферическое тело диаметром 0,15—0,20 мкм или нить длиной приблизительно 13 мкм и диаметром примерно 20 нм. Все эти структуры встречаются в культурах микоплазм и, вероятно, могут рассматриваться как жиз-неспособные репродуцирующиеся формы. [c.157]

В отличие от других исследователей (Pawele et al., 1983), которые обнаруживали низкую стабильность и, как правило, быструю утрату функции у аллореактивных пролиферирующих клонов, мы с помощью описанной выше методики смогли культивировать некоторые Т-клеточные клоны в течение длительного периода (до 1 года) при полной сохранности их специфичности и функциональных свойств. Только время от времени мы наблюдали утрату хелперной функции и способности к аллоген-индуцируемой пролиферации, что, как правило, было обусловлено контаминацией культур микоплазмой. Микоплазма не только понижает ростовой потенциал и угнетает хелперную функцию Т-клеток, но и уменьшает также поглощение клетками Н-тимидина, поскольку способна к его метаболической деградации (Sinigaglia et al., 1985). В силу этого важно как можно чаще проверять клеточные линии на присутствие мико- [c.277]

О—90 % перевиваемых линий клеток контаминированы микоплазами. В первичных клеточных культурах микоплазмы наблюдаются начительно реже [17]. [c.105]

Для анализа препаратов требуется люминесцентный микроскоп. Обычно йспользуется 1000-кратное увеличение, объективы с масляной иммерсией. В контаминированных культурах микоплазмы обнаруживаются в виде мелких (0.1—0.3 мкм диаметром) гранул, расположенных вне клеток или на поверхности клеточной мембраны. Часто наблюдаются скопления гранул. По нашим данным н данным других исследователей [17, 50, 51], метод позволяет обнаруживать микоплазмы даже при сравнительно низкой множественности инфекции и его чувствительность может быть повышена при использовании индикаторных клеточных линий. Однако основными преимуществами метода окраски флюорохромами являются относительная простота и возможность получить ответ в течение часа. [c.114]

Отсутствие заметной гомологии между ДНК многих микоплазм было отмечено еще в работах конца 60-х годов [58—60]. По более точным количественным данным перекрестной гибридизации ДНК разных микоплазм в растворах было установлено, что гомология по ДНК у большинства видов не превышает 2 %, и только у нескольких пар сравниваемых микоплазм гомология составила от 4 до 21 % [61—63]. В нашей работе [64] по перекрестной блот-гибридизации ДНК ряда микоплазм показано, что при низком уровне гомологии ДНК исследованных видов эта гомология касается отдельных протя- женных фрагментов генома, а не коротких участков, распределенных по всей его длине. Более того, у некоторых микоплазм единственными гомологичными участками ДНК оказываются рибосомные гены., На основании этих результатов мы начали использовать в качестве гибридизационных зондов для обнаружения и идентификации микоплазм тотальные препараты ДНК, полученные из микоплазм, выращенных на специальных средах. Такие зонды оказались высокоэффективными и достаточно специфичными, но их нельзя рекомендовать к широкому применению, так как получение чистых культур микоплазм и их выращивание в препаративных количествах связаны со значительными техническими трудностями. В связи с этим мы предприняли клонирование случайных рестриктазных фрагментов ДНК микоплазм в бактериальной плазмиде pBR322 и проверку рекомбинантных Ь лазмиЯ на специфичность в опытах по блот- и дот-гибридизации с ДНК различных микоплазм и ДНК клеток эукариот. Был составлен комплект плазмид-зондов, содержащих фрагменты ДНК, видоспецифичные для каждой из взятых микоплазм. В дальнейшем этот комплект должен быть расширен. [c.118]

Плазмидйые зонды для выявления контаминации клеточных культур микоплазмами сконструированы уже несколькими исследовательскими группами [67—71]. Применение гибридизационного метода в описанной нами модификации ограничено теми лабораториями, где возможна работа с радиоактивными изотопами. Развитие этого метода и его более широкое распространение связывают с заменой радиоактивной метки на ферментную, т. е. с использованием щелочной фосфатазы или пероксидазы хрена, которые могут быть пришиты к плазмидным зондам с помощью биотин-авидиновых комплексов. [c.120]

Судя по имеющимся в настоящее время данным, организмы, обнарулш-ваемые во флоэме больных растений, скорее всего представляют собой мико-плазмы. Однако пока нельзя считать доказанным, что именно они являются возбудителями желтухи и подобных ей болезней. Так, вполне можно допустить, что болезнь вызывается вирусом, носителем которого являются микоплазмы. В ряде лабораторий ведутся исследования, имеющие целью получение чистых культур микоплазм in vitro, с тем чтобы попытаться воспроизвести обычное течение патогенного процесса с номощью таких чистых культур. [c.228]

Ми ко плаз мы — мелкие бактерии, окруженные цитоплазматической мембраной и не имеющие клеточной стенки. Они относятся к отделу тенерикутов, классу Molli utes ( мягкокожие ). Из-за отсутствия клеточной стенки микоплазмы осмотически чувствительны и имеют разнообразную форму кокковидную, нитевидную, колбовидную. Эти формы можно рассмотреть при фазово-контрастной микроскопии чистых культур микоплазм. На плотной питательной среде микоплазмы образуют колонии, напоминающие яичницу-глазунью непрозрачная центральная часть и погруженная в среду и просвечивающая периферия в виде круга. [c.32]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология