Типирование HLA

Область возможного применения моноклональных антител весьма обширна. Их используют в диагностике, например для быстрого и точного типирования тканей и органов, предназначенных для пересадки. Они находят применение при очистке белков и других биологических соединений методом иммуноад- [c.313]

Эффективность заражения культур клеток возрастает при использовании принудительной адсорбции. Для этого после нанесения исследуемого материала на монослой клеток культуры центрифугируют при 1000—1500 об/мин 20 — 30 мин. Кроме того, рекомендуется использование культур клеток, предварительно облученных или обработанных цитостатиками. После 24 — 48 ч культивирования монослои клеток для обнаружения и типирования возбудителя окрашивают по Романовскому—Гимзе и люминесцирующими антителами (РИФ). При микроскопии обнаруживают цитоплазматические включения возбудителя в виде образований округлой формы, дающие характерное свечение в ультрафиолете. [c.249]

Типирование подлежащих пересадке тканей [c.331]

Рис. 20.14. Типирование STR-локусов. А. ДНК, полученную от разных индивидов (п = 7), амплифицировали с помощью ПЦР, используя пару праймеров (X), фланкирующих (СА)-(ОТ)-повтор. Размер всех образовавшихся ПЦР-продуктов одинаков (дорожки 1-7), следовательно, одинакова и длина STR. Судя по полученным данным, STR-локус представлен только одним аллелем. БЛо же, что и на рис. А, но с использованием другой пары праймеров (Y) для другого STR-локуса. Образование двух разных ПЦР-продуктов означает, что данный локус представлен двумя аллелями. Дорожки 1-3 соответствуют амплифицированному фрагменту ДНК индивидов, гомозиготных по одному STR-аллелю, дорожки 4 и 5 - амплифицированному фрагменту ДНК гетерозиготных индивидов, несущих два разных STR-аллеля, дорожки 6 и 7 — амплифицированному фрагменту ДНК индивидов, гомозиготных по другому STR-аллелю.

Антигены HLA связаны также с некоторыми заболеваниями. Изучение частоты встречаемости их у населения позволило выявить, что некоторые болезни возникают чаще в группах с определенными специфическими гаплотипами HLA. Так, степень риска возникновения целиакии составляет около 73 для гаплотипа D3, а ревматоидного артрита — 4 для D4, т. е. эти заболевания встречаются соответственно в 73 или 4 раза чаще у лиц, обладающих этими антигенами, чем у тех, кто этих антигенов не имеет. Таким образом, HLA-типирование позволяет оценить вероятность возникновения определенного заболевания в конкретной популяции и способствует осуществлению мер по идентификации и предотвращению болезней (там, где такие меры предпринимаются). [c.332]

Культуральный метод обнаружения и типирования хламидий считается самым специфичным и наиболее чувствительным. Однако в силу продолжительности и трудоемкости он не получил широкого распространения в лабораторной практике. [c.246]

Основные этапы процедуры ДНК-типирования [c.18]

Выделение и типирование вируса [c.293]

Служба ДНК-типирования координирует свою деятельность с техническими и другими экспертными группами, организациями и местными органами управления, принимающими участие в решении проблемы идентификации погибших. Производится ориентировочное определение объема экспертных работ и комплектация рабочей группы с необходимым количеством личного состава и инструментарием, достаточным для решения поставленной задачи по сбору биологических образцов и информации с места происшествия. Одновременно должны быть проверены и подготовлены резервные мощности хранилища для приема биологических образцов. [c.20]

Отбор и подготовка образцов для хранения и экстракции ДНК — одна из наиболее важных процедур. В силу того, что ДНК-типирование на данный момент еще не является рутинной процедурой, многие лаборатории могут выполнять только часть полного ДНК-анализа, предоставляя выполнение более сложных методик специализированным центрам. Проведение ДНК- [c.20]

В виду того, что сбор биологических образцов — неотъемлемая часть процедуры ДНК-типирования, персонал, привлекаемый для сбора образцов, должен знать принципы ДНК-анализа и иметь соответствующее техническое оснащение для гарантии сохранности биологических образцов. Группу по сбору ДНК-проб необходимо укомплектовать медицинским инструментарием для забора проб, спецодеждой, термоизолированными контейнерами с сухим льдом в достаточном количестве и пластиковыми пакетами для сбора и хранения биологических образцов в сухом льду, транспортными средствами, контейнерами для отработанного инструментария, дезинфекционными средствами. [c.31]

Первичные и вторичные ёмкости для всех образцов должны быть помечены индексом образца, индексом места происшествия, порядковым номером поступления для каждого образца, нести информацию о дате сбора и инициалах сборщика с использованием несмываемого маркера. Вся сопроводительная информация к каждому образцу должна быть представлена в службу ДНК-типирования в двух экземплярах, включая любую другую документацию, имеющую отношение к данному происшествию. [c.35]

Основные требования, предъявляемые к биологическим образцам для ДНК-типирования [c.37]

Рисунок 10. Результаты типирования ДНК, —>ще-ленной из контаминированного костного фрагмента после предварительного декальцинирования костной стружки, по 5ТК-локусам системы

XX века групповые вещества крови привлекли внимание из-за необходимости типирования эритроцитов при переливании крови, что обусловлено наличием в крови человека антител против чужих групповых веществ крови. Так, у индивидуумов с группой крови А обнаруживаются антитела против В-детерминант и наоборот, а у людей с группой кроаи О — и против А-, и против В-детерминант. Работами многих ученых (У. Морган, В. Уоткинс, А. Кобата, С.-И. Хакомори и др.) было показано, что А ВО (Н)-антигены имеют углеводную природу и расположены на гликозидных цепях глико-конъюгвтов. Ниже приведены структуры антигенных детерминант системы АВО(Н). [c.503]

Типирование возбудителя проводят в РА на стекле с факторными (монорецепторными) диагностическими сыворотками. [c.135]

Для типирования по /Г-антигену в один ряд пробирок с разведениями диагностической ОА -сыворотки вносят суспензию живой (негретой) культуры, а для определения 0-антигена в другой ряд пробирок вносят гретую (кипяченьгую в течение 1 — 2 ч) взвесь бактерий. Кипячение или автокиавирование разрушает поверхностно расположенный А -антиген, который мешает определению 0-антигена. Через сутки инкубирования при 37 °С гомологичные сыворотке штаммы агглютинируются до титра или до половины титра. [c.144]

Для внутривидового типирования (с целью определения источника инфекции и путей передачи) проводят пробу с сальмо-неллезными фагами выделенную культуру засевают газоном на питательный агар в чашке Петри, куда затем наносят по 1 капле типовых фагов, подсушивают и инкубируют при 37 °С 18 — 20 ч. Наличие лизиса культуры ( стерильного пятна в газоне роста) позволяет определить принадлежность выделенного штамма к определенному фаговару. Совпадение фаговаров у штаммов данного вида свидетельствует об общности их происхождения. [c.147]

В РА по 0-Аг проводят типирование энтеробактеров, цитробактеров, эдвардсиелл, гафний, протеев. Кроме того, у гафний и протеев определяют структуру //-Аг. Для идентичности двух штаммов протеев по Я-Аг можно использовать феномен Динеса на МПА в чашке засевают бляшками испытуемые культуры, которые через сутки инкубирования при 37 °С дают характерное для протеев роение (культуры считаются идентичными по Я-Аг, если на границе зон роения не видна демаркационная линия). [c.163]

Окончательную идентификацию выделенных клостридий газовой гангрены проводят путем выявления и типирования их экзотоксинов. Для этого ставят реакцию нейтрализации с поливалентными и моновалентными сыворотками (к токсинам С. perfringens, С. septi um, С. novyi А vi В). Центрифугаты 3-дневных бульонных чистых культур, содержащие экзотоксины, смешивают с соответствующими сыворотками и после 30-минутной экспозиции при 37 С по 0,5 мл смеси внутрибрюшинно вводят лабораторными животным (мышам). Результат учитывают через 5 ч и окончательно — на 3 —4-е сут. В случае нейтрализации (положительный результат) животные выживают, в контроле и при отрицательном результате (несоответствие сыворотки типу токсина) — погибают (обычно через I—4 ч). [c.192]

Обнаружить в исследуемом материале вирусный антиген позволяет РОНГА с эритроцитарным антительньш диагностикумом. Эту реакцию используют для экспресс-диагностики крымской геморрагической лихорадки, лимфоцитарного хориоменингита. Обнаружение и типирование вирусспецифического антигена достигается также путем применения ИФА и РОНГА на твердой основе. Положительные результаты указывают на наличие соответствующих антигенов. [c.292]

ПЦР. Разработаны тест-системы для ПЦР, позволяющие выявлять до 40 видов грибов, включая все клинически важные виды. Например, тест-системы для выявления ДНК andida albi ans позволяют обнаружить 10—100 клеток возбудителя на 100 мкл биологического материала. С помощью геномной дактилоскопии ДНК в ПЦР проводят также типирование штаммов С. albi ans. [c.318]

Простой прибор для одномоментного нанесения нескольких тест-агентов на испытуемую культуру предложили Ю. И. Сидоровский и Э. Б. Бурашников (1973). Он состоит из нескольких шприцев и используется для фаго-типирования, колицинотинирования или определения чув-ствительности к антибиотикам. [c.195]

Farbduplikatmaterial п цветной (фото) материал для контратипирования Parbdnpproze т цветное контра-типирование, процесс контратипирования цветных фильмов [c.216]

Для оперативного и своевременного отбора быстропортящихся биологических образцов, служба ДНК-типирования должна быть как можно скорее уведомлена обо всех случаях, требующих применения методов ДНК-идентификации личности. Везде, где возможно, используется комплексный подход к отбору биологических образцов, предназначенных для проведения ДНК-экспертизы, с координацией с другими экспертными службами для получения информации в полном объёме. Все мероприятия по сбору биологических образцов и информации с места происшествия выполняются строго в соответствии с нормами регламента и обязательно сопровождаются письменным отчетом и фотодокументацией. Служба ДНК-типирования укомплектована персоналом и техническими средствами для оперативного сбора, хранения и [c.17]

Все первичные ёмкости должны быть помещены во вторичные ёмкости (11апример, полиэтиленовые пакеты) для лучшей изоляции друг от друга. Третий, большой полиэтиленовый мешок должен использоваться, для того чтобы сложить все образцы от одного потерпевшего вместе. Подробное описание образца и любые другие документы, имеющие к нему отношение, должны быть помещены в отдельный изолированный полиэтиленовый пакет. Ткани должны быть упакованы в изолированном контейнере с необходимым количеством твердой углекислоты (приблизительно три части веса углекислоты на одну часть веса образца в зависимости от температуры окружающей среды). Нельзя использовать для упаковки стеклянные или хрупкие ёмкости. При отсутствии твердой углекислоты, можно использовать для транспортировки обыкновенный лед. Цельная кровь должна быть охлаждена, но не должна быть заморожена. Крайне внимательно необходимо отнестись к упаковке образцов для ДНК-типирования в надежные специализированные емкости, помеченные должным образом, снабженные ярлыками и соответствующей документацией. [c.43]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология