Диск-электрофорез, состав гелей

В общем смысле под иммуноблоттингом понимают анализ смеси белков, перенесенных на твердую подложку-мембрану, с которой они связываются ковалентными связями, с последующей иммунодетекцией. Анализировать можно смесь белков, непосредственно нанесенную на подложку, — дот-блот анализ (от англ. dot — пятнышко) — либо после ее предварительного фракционирования методами электрофокусирования, диск-электрофореза или двумерного электрофореза — Вестерн-блот анализ (Western blotting). Такая методология применяется также для отбора клонов бактерий, фагов или вирусов, экспрессирующих продукты целевых клонированных генов. Перенос белков на мембрану осуществляется либо пассивно, либо с использованием аппаратуры для электропереноса. На эффективность переноса белков на мембрану влияет множество факторов, таких как молекулярная масса белков, пористость геля, время переноса и состав используемого буферного раствора (транс-буфера). В зависимости от задач и условий проведения эксперимента подбираются условия переноса, обеспечивающие наилучшие результаты. [c.57]

Исследуют изозимный состав лактатдегидрогеназы в гиалоплазме сердечной и скелетной мышц крысы методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле. [c.339]

Приготовление микрогеля. По мнению Нейхоффа [915], для получения хорошего разделения белков, необходимо соблюдать следующее правило чем меньше диаметр капилляра, тем выше должна быть концентрация аириламида. Растворы гелей имеют такой же или почти такой же состав, как и при обычном диск-электрофорезе. Однако в данном случае рекомендуется добавлять в растворы тритон Х-100 до конечной концентрации 1% [44, 914] и гидантоин до конечной концентрации 5 мг/мл [c.108]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология