Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Окраска препаратов для микроскопирования

    Как было показано, описываемые ниже методы удовлетворительны для выявления характерных признаков бактерий, необходимых для их идентификации. Вместе с тем их можно улучшить или модифицировать литература изобилует описаниями незначительных изменений, которые, как выяснилось, были необходимы для получения оптимальных результатов в специфических условиях. В особой заботе при фиксации, окраске и микроскопировании нуждаются цитологические препараты. Меры предосторожности, которые необходимы при работе с ними, приводятся здесь, а также в гл. 1 и 2. Методы, которые описаны ниже, считаются рутинными, но это самые эффективные методы (особенно если дело касается цитоплазматических включений) применительно к химически фиксированным препаратам, при обработке которых на всех этапах избегают высушивания. [c.63]


    Микроскопирование при большом увеличении. Для просмотра состава микроорганизмов активного ила с целью обнаружения индикаторных микроорганизмов используют прижизненные препараты, фиксация и окраска микроорганизмов не допускается. Просмотр ведут при увеличении в 600 раз и более. Пользуясь данными, приведенными в табл. 21, которые характеризуют поведение индикаторных микроорганизмов в зависимости от условий среды, устанавливают причины неудовлетворительной работы активного ила. [c.304]

    Микоплазмы, вероятно, представляют собой самые маленькие бактерии, которые можно наблюдать в световой микроскоп и которые с трудом поддаются индивидуальному распознаванию из-за сильно выраженного плеоморфизма. Характерные колонии микоплазм, имеющие вид яичницы-глазуньи, наблюдают при прямой микроскопии чашек с агаром. Для анализа колоний полезен подход, разработанный Динесом и заключающийся в том, что препараты смотрят после того, как на место роста бактерий наносят каплю метиленового синего и накрывают ее покровным стеклом. В случае объектов, близких по размерам к пределам разрешения, оптические измерения при фазово-контрастной микроскопии затруднены по двум причинам. Первая — это ореольные артефакты и вторая — присущие фазовому контрасту особенности формирования изображения, благодаря которым круглые объекты выглядят меньше, чем они есть на самом деле. В морфологических исследованиях и при изучении подвижности микоплазм применяются влажные препараты. Что же касается типа микроскопирования, то рекомендуются методы фазового контраста и темнопольного освещения. Если нужны окрашенные препараты микоплазм, то предпочтительнее использовать несколько модифицированную методику окраски по Гь м-зе (см. ниже), которую следует применять к предварительно фиксированным организмам. Фиксировать микоплазмы лучше раствором Боуэна (разд. 2.2.1) непосредственно в слое агара, лежащем на покровном стекле. [c.84]

    Капсулы. Клетки многих микроорганизмов, особенно при росте их на средах, богатых углеводами, могут быть окружены рыхлым внешним слоем — капсулой или слизью. Эти структуры часто имеют консистенцию геля и плохо видны при микроскопировании ивых клеток. Химический состав капсул у разных бактерий неодинаков, поэтому их нельзя выявить каким-либо одним методом окраски. Кроме того, капсулы при окраске легко деформируются,, а вещество капсулы слабо связывает краситель, который легко отмывается в процессе обработки препарата. Чаще всего для выявления капсул применяют способ негативной окраски (негативного контрастирования) с помощью жидкой туши. Для этого небольшое количество клеток с плотной среды помещают в каплк> разбавленного фуксина, смешивают с каплей туши, закрывают покровным стеклом и просматривают с объективом 40Х- На общем темном фоне препарата хорошо видны бесцветные капсулы,, окружающие клетки микроорганизмов, окрашенные в розовый цвет. Кроме того, существуют специальные методы окраски капсул, один из них приведен ниже. [c.104]


    Липидные гранулы. У дрожжей и мицелиальных грибов запасные липиды представлены нейтральными жирами, которые легко обнаруживаются в живых клетках без специальных методов окраски в виде сильно преломляющих свет капель. Бактерии в качестве резервных липидов образуют поли-р-оксимасляную кислоту. Гранулы поли-р-оксибутирата хорошо заметны при микроскопировании живых бактериальных клеток с фазово-контрастным устройством, однако чаще для их выявления клетки окрашивают ли-пофильными красителями — Суданом III или Суданом черным. Готовят тонкий мазок клеток, высушивают его на воздухе и фиксируют в пламени горелки. Заливают поверхность мазка раствором Судана черного и оставляют краситель на 5—15 мин. Избыток красителя сливают, просушивают препарат фильтровальной бумагой, просветляют в ксилоле, погружая в него несколько раз предметное стекло. Время просветления препарата не должно превышать 1 мин. После этого клетки дополнительно окрашивают в течение 10 с 0,1%-ным водным раствором сафранина. Более длительная обработка сафранином нежелательна, так как маскируется основная окраска. Гранулы поли- -оксибутирата окрашиваются в темный цвет, остальная часть клетки — в розовый. [c.109]

    Из колоний с признаками, характерными для стрептококка, бактериальной петлей берут небольшое количество материала и готовят мазок для окраски по Граму. При микроскопировании в препарате, приготовленном из культуры с плотной питательной среды, стрептококки располагаются парами, короткими цепочками, образуют иногда скопления, напоминающие грозди стафилококка. Морфологические свойства стрептококков непостоянны наряду с мелкцми, шарообразными, слегка уплощенными кокками в материале обнаруживаются иногда крупные, грубые кокки, вытянутые в длину. В одной и той же цепочке кокки могут различаться по величине и форме. [c.177]

    Из культуры микробов со свернутой сыворотки готовят препараты для микроскопирования. Материал берут прерывистыми движениями петли из нескольких колоний, приготовляют мазок и окрашивают его 2—3 мин щелочным метиленовым синим Леффлера. При обнаружении в мазке единичных полиморфных палочек с утолщением и более интенсивной окраской на концах, характерной для зерен волютина, готовят второй мазок для окраски по способу Нейссера. [c.282]


Микробиологические основы молочного производства (1987) -- [ c.322 , c.323 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Окраска



© 2024 chem21.info Реклама на сайте