Методы фазового контраста

Метод фазового контраста [21—24] [c.269]

Применение метода фазового контраста ограничивается низкой разрешающей способностью и плохим контрастом для ряда ком- [c.575]

Метод фазового контраста основан на том, что показатели преломления отдельных участков структуры и окружающей среды различны, вследствие чего световая волна, прошедшая сквозь структуру препарата, претерпевает изменение по фазе и приобретает так называемый фазовый рельеф. Глаз человека и фотографическая пластинка воспринимают только изменения амплитуды и нечувствительны к изменениям фазы световой волны. Поэтому фазовые изменения световой волны, прошедшей через препарат, с помощью специального оптического устройства преобразуются в изменения амплитуд, что приводит к ослаблению или усилению интенсивности света, прошедшего через объект (т. е. фазовый рельеф волны заменяется амплитудным рельефом). В результате получается видимое фазово-контрастное изображение структуры препарата, в котором распределение яркостей соответствует фазовому релье- [c.36]

Метод фазового контраста применяют для наблюдения объектов или деталей, отличающихся от окружающей среды только показателем преломления. Фазы электромагнитных волн падающей и рассеянной на границе среды или неоднородности отличаются на л/2. Если добавить сдвиг фазы еще п/2, то незначительная разность фаз волн от объекта за счет перепада коэффициента преломления преобразуется в относительно большое приращение интенсивности вследствие интерференции падающего и рассеянного света. Необходимый дополнительный сдвиг фаз можно получить, помещая в задней фокальной плоскости объектива небольшую пластину, через которую будет проходить только прямой свет, а дифрагированным светом, прошедшим через нее, ввиду малости размеров можно пренебречь. [c.264]

Метод фазового контраста [28, 168—172] [c.113]

При помощи микроскопа изучалась диффузия электролитов в полиамидах и сферолитные структуры полигексаметиленадипинамида в проходящем и отраженном свете, а также методом фазового контраста Кроме того, исследовались изменения сферолитов, полученных в различных условиях кристаллизации [c.412]

Разница в высотах отдельных частей объекта составляет 10-50 А и в пространственных изображениях определяется методом фазового контраста. С его помощью обычно невидимые детали по поверхности улавливаются очень четко. [c.223]

Используется также метод оценки степени контактирования тел, основанный на наблюдении фазового контраста. Сущность его заключается в том, что при контактировании шероховатой поверхности с полированной пластиной, покрытой тончайшей серебряной пленкой, в местах контакта пленка и стекло незначительно деформируются. Пленку через стекло рассматривают в микроскоп и, применяя метод фазового контраста, фиксируют пятна и их размер. Недостатком этого метода является невозможность его применения к движущимся сопряженным поверхностям. [c.361]

Метод фазового контраста основан на разнице в показателях преломления отдельных участков препарата и окружающей среды. Световая волна, прошедшая сквозь структуру препарата, приобретает так называемый фазовый рельеф, затем с помощью специального оптического устройства фазовый рельеф преобразуется в амплитудный, который и воспринимается наблюдателем. [c.214]

Отметим, что большинство существующих оптических методов имеет различную разрешающую способность в вертикальном и горизонтальном (тангенциальном) направлениях. В методе фазового контраста [98] вертикальная разрешающая способность определяется рядом факторов самой структурой ступеней, отражательной способностью кристалла, рассеянием света на кристалле или на объективе, апертурой и др. По оценке Форти [99], при наблюдении в отраженном свете металлических [c.32]

Метод фазового контраста [c.273]

Допустим, что колебание 3 каким-то способом сдвинуто по фазе еще на я/2, тогда разность фаз колебаний 2 и 3 будет равна нулю или я и будет иметь место прямое сложение или вычитание амплитуд. Тогда /, = (а %) == а1 2а а. (член опускаем) — разница в освещенности объекта и среды становится заметной. В этом и заключена идея метода фазового контраста. Техническое осуществление метода требует применения специальных объективов и конденсоров, как будет сказано ниже. [c.274]

Метод фазового контраста имеет преимущества перед другими методами при анализе и количественных подсчетах в тонких порошках. В соответствующей жидкости одни компоненты смеси будут казаться темными, другие светлыми, а третьи окрашенными (в белом свете). [c.275]

Своеобразное развитие получил иммерсионный метод в микробиологии. Для измерения показателей преломления живых бактерий разработаны иммерсионные среды, препятствующие передвижению бактерий, но не нарушающие их жизнедеятельности. Используется метод фазового контраста или его разновидность— [c.282]

Ю. A. Черкасов, T. A. X p у л e в a. Сб. Новые методы в минералогии и петрографии и результаты их применения . Госгеолтехиздат, 1963 (применение метода фазового контраста к измерению минералов). [c.386]

В. Краузе. Иенское обозрение, 1965, 185—190 (применение метода фазового контраста для исследования минералов). [c.386]

Допустим, что колебание 3 каким-то способом сдвинуто по фазе еще на я/2, тогда разность фаз колебаний 2 и 3 будет равна нулю или л и будет иметь место прямое сложение или вычитание амплитуд. Тогда /1= ( 2+03) = 02 +20203 (член Оз опускаем), и разница в освещенности объекта и среды становится заметной. В этом и заключена идея метода фазового контраста. Техническое [c.269]

Сталлами. Однако это ограничение редко встречается в работе с полимерными материалами. Система двух диафрагм имеет одно существенное преимущество перед методом центрального освещения. Оно состоит в том, что в первом методе соответствие между образцом и иммерсионной жидкостью устанавливается при резкой наводке на образец, тогда как во втором случае для наблюдения линии Бекке микроскоп приходится выводить из фокуса. Это не только увеличивает чувствительность сравнения, но и позволяет проводить тонкие исследования локальных изменений показателя преломления в образце. Благодаря этому метод двойного диафрагмирования дает возможность различать отдельные детали образца на основании небольших изменений показателя преломления. В этом методе микроскоп работает по принципу фазово-контрастного микроскопа, который улучшает видимость частиц, немного отличающихся от окружающей их среды только показателем преломления или толщиной. Для некоторых исследований метод двойной диафрагмы может превосходить метод фазового контраста. Промышленные фазово-контрастные микроскопы дают чрезвычайно контрастные изображения с ярким ореолом вокруг частиц, отличающихся от окружающей их среды. Ореол и крайняя степень контрастности изображения уменьшают число наблюдаемых деталей, тогда как метод косого освещения с двойной диафрагмой дает более мягкое изображение с большим числом деталей. Последний метод особенно удобен для исследования волокон или стержневидных образцов, которые легко расположить под определенным углом к щели между диафрагмами. Метод двух диафрагм осуществляли как с петрографическим, так и со сложным светлопольным микроскопом. Точная юстировка диафрагм возможна почти для всех сложных микроскопов. [c.264]

Метод фазового контраста дает возможность получать контрастные изображения прозрачных и бесцветных объектов, почти невидимых при обычных методах микроскопии. Подробное олисание этого метода приводится ниже (см. стр 36). [c.19]

Конденсоры служат для освещения препарата, исследуемого под микроскопом, проходящим светом. В зависимости от требуемого метода наблюдения в микроскопах применяются конденсоры различных типов конденсор светлого поля, конденсор темного поля и специальный конденсор для наблюдения по методу фазового контраста. Конденсоры представляют собою двух- или трехлинзовую оптические системы с ирисовой апертурной диафрагмой. [c.15]

Объект можно сделать более контрастным, либо почти до предела закрывая диафрагму конденсора, либо окрашивая клетки, либо применяя фазово-контрастное устройство. Первое нежелательно, так как снижает апертуру конденсора и тем самым заметно уменьшает разрешающую способность микроскопа. Окрашивание препарата дает хорошие результаты, но в большинстве случаев оно осуществляется после фиксации микроорганизмов, что не всегда желательно. Основная ценность метода фазового контраста состоит в том, что он дает возможность наблюдать живые объекты, не прибегая к их фиксации и окрашиванию. Применение фазово-контрастного устройства не позволяет увеличить разрешающую способность микроскопа, но дает возможность увидеть прозрачные объекты более четко и даже выявить некоторые структуры и включения в клетках крупных бактерий. [c.91]

Водоросли в живом состоянии в зависимости от размеров и других особенностей изучают с помощью бинокулярной стереоскопической лупы (МБС-1) или световых микроскопов различных марок с использованием разных систем окуляров и объективов, в проходящем свете или методом фазового контраста, с соблюдением обычных правил микроскопирования. [c.20]

Для исследования тонких неконтрастных препаратов, кроме метода фазового контраста, применяют фазово-темнопольный метод, позволяющий различить меньшие разности оптических плотностей. Фазово-темнопольные объективы имеют более высокую разрешающую способность, чем фазовые. Для работы необходимо специальное устройство МФА-2, которое используется с биологическими микроскопами. [c.44]

Конденсор расположен под столиком микроскопа и состоит из двух или трех линз. Различают несколько типов конденсоров в зависимости от метода наблюдения конденсор светлого поля (рис. 2,Л), конденсор темного поля (рис. 2,Б), конденсор для наблюдения по методу фазового контраста, конденсор с апертурной диафрагмой для косого освещения и др. Современные микроскопы снабжены апланатическим конденсором ОИ-14 для прямого и косого освещения. Для темного поля выпускают конденсор ОИ-13. Во время работы конденсор приводят в соответствующее положение, поднимая и опуская его специальным винтом. Под конденсором микроскопа находится ирисовая диафрагма. [c.6]

Широкие возможности для разнообразной работы имеет универсальный исследовательский биологический микроскоп МБИ-15, который выпускается в четырех вариантах. Один из них с полным комплектом позволяет вести наблюдения на светлом и темном поле, методом фазового контраста и в поляризованном свете. Он снабжен ртутно-кварцевой лампой — для [c.16]

Метод фазового контраста и интерференционная микроскопия [c.41]

Для работы методом фазового контраста при изучении неокрашенных препаратов используют зеленые светофильтры, окрашенных объектов — светофильтр того же цвета, что и объект. [c.44]

К методу фазового контраста близок принцип действия интерференционного микроскопа, схему которого для прозрачных объектов составил в 1932 г. А. А. Лебедев. В этом микроскопе свет сначала делится на два пучка, а затем они воссоединяются. Каждый пучок света после разделения имеет свой путь. Один из них проходит через объект, а другой — мимо него. Луч, проходя через объект, испытывает фазовый сдвиг, который можно измерить. Так как величина фазового сдвига связана с плотностью структуры, то таким образом можно определить содержание сухого вещества в клеточных структурах. [c.44]

Метод фазового контраста использует различия по фазе и интенсивности, существующие между отклоненными и неотклоненными лучами, [c.113]

Непосредственное наблюдение морфологии закристаллизованного эластомера в световом микроскопе в неполя-ризованном свете практически невозможно из-за малой разности оптических плотностей закристаллизованной и аморфной частей. Такое наблюдение в ряде случаев осуществимо методом фазового контраста. Практически всегда успешным оказывается применение поляризованного света. [c.67]

Метод фазового контраста служит для получения контрастных изображений прозрачных и бесцветных объектов, невидимых при обычных методах микроскопии. Темные и светлые места в фазово-контрастном изобралсении соответствуют различию в показателе преломления или толщине. [c.61]

За последние несколько десятилетий получил развитие ряд важных микроскопических методов. К их числу относятся метод фазового контраста, цветного фазового контраста, методы интерференционной, рентгеновской, электронной и эмиссионной микроскопии. Толанский 1246] описал изящные методы многолучевой интерференционной микроскопии и их применение. Хотя эти методы нашли широкое применение в биологии и медицине, их использование для анализа полимерных материалов более ограниченно и специфично. Поэн [190] исследовал несколько полимерных материалов при помощи рентгеновского микроскопа, однако имеется мало данных об успешном приложении метода цветного фазового контраста и методов эмиссионной и многолучевой интерференционной микроскопии. Применение метода электроннолучевого зондирования все еще ограничено материалами, состоящими из тяжелых атомов. [c.247]

Беннет и сотр. [15] составили обзор, посвященный технологическому применению фазово-контрастного микроскопа к ряду материалов. Так, например, прозрачные пластики можно исследовать на неоднородность и на содержание примесей. В листовых материалах этим методом удается идентифицировать волокна и другие наполнители. Покрытия можно изучать в виде поперечных срезов или тонких пленок. Для исследования поверх-1Юстей применяют метод отпечатков некоторые поверхности, обладающие достаточно высокой отражательной способностью, можно изучать с помощью фазово-контрастного вертикального освещения. Метод фазового контраста позволяет определять характеристики бумажных волокон, отсутствие в них лигнина и других примесей. Реймут [200] указал ряд применений этого метода в текстильной промышленности. К их числу относятся наблюдения за бактериальным и ферментативным разложением шерсти, исследования деталей поперечных срезов шерсти, бактерий и плесени в волокнах, частиц, включенных в волокна, и изломов волокон, возникающих при стирке и глажении ткани. Ройер и Мареш [209] сообщили о результатах исследования поперечных срезов искусственного волокна и тонких пленок на тканях, целлюлозных волокнах и коже. Можно также изучать животные волокна со слабой пигментацией. С пигментированных волокон можно снять отпечатки [90, 264]. Фазово-контрастная оптика позволяет хорошо 5азличать структуру набухших волокон [49]. [c.247]

Среди других оптических методов исследования применяются, хотя и редко, визуальные микроскопические методы, например для изучения флоккуляции и адгезии коллоидных частиц [33]. Мономолекул яр ные слои можно наблюдать непосредственно методом фазового контраста [34] и при помощи электронного микроскопа. Результаты, полученные в последнем случае, показывают, что мыло адсорбируется на стекле в виде островков , состоящих из ориентированных моно- и полислоев [35]. Метод дифракции рентгеновских лучей был применен для установления фазовых различий между наружными и внутренними слоями полимолекулярных пленок стронциевого мыла, осажденных по методу Лэнгмюра. Установлено, что изменения в их кристаллической структуре возникают лишь после нанесения около 100 слоев [36]. Для измерения толщины адсорбционных слоев жирных кислот на слюде успешно применялись интерференционные методы [37], а для оценки толщины и структуры адсорбционных слоев и в других случаях—эллиптичность светового пучка, отраженного от покрытых ими поверхностей [38]. Поверхностные слои на порошкообразных подкладках изучались при помощи специальной методики инфракрасной спектроскопии, для чего исследуемый порошок смеши- [c.292]

Микоплазмы, вероятно, представляют собой самые маленькие бактерии, которые можно наблюдать в световой микроскоп и которые с трудом поддаются индивидуальному распознаванию из-за сильно выраженного плеоморфизма. Характерные колонии микоплазм, имеющие вид яичницы-глазуньи, наблюдают при прямой микроскопии чашек с агаром. Для анализа колоний полезен подход, разработанный Динесом и заключающийся в том, что препараты смотрят после того, как на место роста бактерий наносят каплю метиленового синего и накрывают ее покровным стеклом. В случае объектов, близких по размерам к пределам разрешения, оптические измерения при фазово-контрастной микроскопии затруднены по двум причинам. Первая — это ореольные артефакты и вторая — присущие фазовому контрасту особенности формирования изображения, благодаря которым круглые объекты выглядят меньше, чем они есть на самом деле. В морфологических исследованиях и при изучении подвижности микоплазм применяются влажные препараты. Что же касается типа микроскопирования, то рекомендуются методы фазового контраста и темнопольного освещения. Если нужны окрашенные препараты микоплазм, то предпочтительнее использовать несколько модифицированную методику окраски по Гь м-зе (см. ниже), которую следует применять к предварительно фиксированным организмам. Фиксировать микоплазмы лучше раствором Боуэна (разд. 2.2.1) непосредственно в слое агара, лежащем на покровном стекле. [c.84]

Помимо перечисленных характеристик, объективы отличаются разнообразием в зависимости от длины тубуса, среды между фронтальной линзой и препаратом, метода наблюдения и т. д. Так, они могут быть рассчитаны на длину тубуса 160 мм — для проходящего света, 190 мм — для отраженного, бесконечность — для проходящего или отраженного. Объективы бывают сухие и иммерсионные. Для наблюдений методом фазового контраста существуют фазово-контрастные объективы, а для изучения непрозрачных объектов в отраженном свете— эпиобъективы. Определенные объективы применяют только в тех условиях, для которых они предназначены. Если приходится работать с покровными стеклами, имеющими толщину больше или меньше 0,17 мм, то лучше пользоваться микроско- [c.11]

КОСОГО освещения. Голландский физик Цернике указал на возможность использования метода фазового контраста для наблюдения прозрачных объектов. Применяя этот метод, можно увидеть в живых клетках процесс митоза, хромосомы, митохондрии, мелкие включения, изучать действие на них физических и химических агентов и фиксаторов. [c.42]

Хороший объект для наблюдения митоза в прижизиеииом состоянии методом фазового контраста — волоски тычиночных нитей из молодых бутонов традесканции. Эпидермис луковиц репчатого лука можно использовать для наблюдения митохондрий (рис. 20). Растительные клетки, содержащие много зерен хлорофилла и других пигментов, дают неудовлетворительные изображения в фазовом контрасте. [c.43]

В 1970 г. И. Д. Романов наблюдал движение цитоплазмы, сочетая прижизненные наблюдения с методом фазового контраста. Таким образом он исследовал пыльцевые зерна пшеницы, ржи, овса от момента обособления пыльцевых зерен до образования крахмала, что совпадает с периодом спермибгенеза, используя в качестве среды 5%-ный раствор сахарозы. [c.54]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология