Электрофорез без носителя

Рис. 5.5-1. Оборудование для электрофореза без носителя (л) н электрофореза на бумаге (б).

Классический электрофорез без носителя осуществляют в U-образной ячейке, в которой на буферный раствор, содержащий белок, наслаивается чистый буферный раствор. Выбором подходящего pH достигают одинакового знака заряда белков, ко- [c.350]

Высокое разрешение и высокая производительность достигаются в современном электрофорезе без носителя, в котором электрическое поле приложено к текущему между двумя охлаждаемыми пластинами буферному раствору. Под действием поля белки отклоняются от направления потока буфера на определенный угол. [c.351]

Электрофорез (электрофорез без носителя, электрофорез на носителе гель-электрофорез, диск-электрофорез, изоэлектрическое фокусирование, изотахоэлектрофорез, иммуноэлектрофорез ) Ионообменная хроматография Аффинная хроматография [c.347]

При электрофорезе заряженные частички под влиянием электрического поля движутся с различной, зависящей от отнотения заряда к массе скоростью к аноду или катоду н таким образом могут быть отделены друг от друга. Различают электрофорез без носителя, при котором белковые молекулы движутся непосредственно в потоке буфера, и электрофорез с носителем (зонный электрофорез), при котором в качестве носителя используют различные материалы. [c.350]

Рис. 3-6. Электрофоретическое разделение белков плгрмы человека пятью различными методами при pH 8. а — электрофорез без носителя б — электрофорез на бумаге в — электрофорез в крахмальном геле г — электрофорез в полиакриламидном геле д — иммуноэлектрофорез (полосы прештитации к поливалентной антисыворотке человека). Стрелки показывают положение отдельных белков плазмы.

Применение непрерывного электрофореза без носителя, т. е. в свободном растворе [150, 151], для разделения неорганических ионов, по-видимому, затруднительно из-за появления турбулентных, конвекционных и других потоков. По той же причине, вероятно, невозможно применение электроконвекции [152—154]. Однако для разделения разноименно заряженных ионов или нейтральных и заряженных частиц в крупном масштабе, очевидно, можно воспользоваться аппаратом Добри и Финна [155, 156]. В этом аппарате разделяемая смесь подается в виде широкой тонкой ленты в электролитный раствор, проходящий вверх в ламинарном потоке между вертикальными электродами. При наложении потенциала одна лента разделяется на несколько полос, соответствующих индивидуальным компонентам смеси, и при благоприятных условиях они достаточно хорошо разделяются и могут быть собраны в верхней части аппарата. Электроды отделяются пористыми стенками. Интересным является метод непрерывного электрофореза, описанный Колином [157], в котором конвекционные потоки исключаются благодаря электромагнитному вращению кольцевого горизонтального столбика электролита. Однако предложенный аппарат довольно сложен. [c.76]

Asp(NHi- y-Phe -Val -Ангиотензин II. Этот пептид (рис. 19) был синтезирован Шрёдером [1980]. Исходным веществом в этом синтезе служил защищенный дипептид (А 7—8), к которому после удаления N-защитной группы последовательно присоединяли блокированные по N-концу дипептиды с помощью азидного (С 5—8 и Е 3—8) и карбодиимидного (G 1—8) методов. грег-Бутильную группу полностью защищенного пептида (G 1—8) удаляли обработкой хлористым водородом в трифторуксусной кислоте в течение 3 час при 0°. Полученный после каталитического гидрогенолиза свободный октапептид (I 1—8) был, судя по его поведению при электрофорезе, практически чистым. Дальнейшую очистку осуществляли или путем хроматографии на карбоксиметилцеллюлозе (элюирование 0,001—0,27И аммонийноацетатным буферным раствором), или электрофорезом без носителя в пиридин-ацетатном буфере при pH 5. При испытаниях на изменение кровяного давления у крыс с удаленными почками активность октапептида составляла около 1 % активности Asp (NH2-P) -Уа15-ангиотензина II. [c.83]

Замена в положении 5. А1а -Брадикинин. Синтез А1а -брадикинина осуществлен Шрёдером [1963, 1969]. Конденсация СЬо-А1а-5ег-ЫНКН2 с H-Pr0-Phe-Aгg(N02)-0Me привела к защищенному пентапептиду, который подвергали декарбобензоксилированию обработкой бромистым водородом в трифторуксусной кислоте, а полученный эфир пентапептида Н-А1а-5ег-Pг0-Phe-Arg(N02)-0Me конденсировали с bo-Aгg(N02)-Рго-Рго-01у-ЫНЫН2. Удаление защитных групп у образовавшегося нонапептида осуществляли щелочным гидролизом и каталитическим гидрогенолизом. Свободный нонапептид был очищен с помощью электрофореза без носителя [а] —109,4° (с = 0,5 вода). Как и следовало ожидать, при инкубации А1а -брадикинина с химотрипсином происходит отщепление только С-концевого [c.130]

Огп -Калладин. Шрёдер и Гибиан [1973] синтезировали Огп -каллидин по схеме, которую использовали ранее для получения каллидина (рис. 41). Взаимодействие bo-Orn( bo)-Arg(N02)-Рго-ОН и H-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg(N02)-OMe в присутствии карбодиимида привело к полностью защищенному декапептиду, который омылением двукратным избытком едкого натра в диоксане (2,5 час) превращали в соответствующую свободную кислоту (выход 91%). N-Защитные группы удаляли каталитическим гидрогенолизом, а образовавшийся свободный декапептид был очищен препаративным электрофорезом без носителя при pH 5 [a]g —91,4° (с = 0,5 1 н. уксусная кислота) —86,0° (с = 0,5 вода). По сравнению с брадикинином Огп -кал-лидин обладал следующей активностью понижение кровяного давления у кролика — 1/5—1/10, сокращение подвздошной кишки морской свинки—1/3, сокращение матки крысы — 1/10. [c.154]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология