Свободные аминокислоты в биологическом материале

Мы пе будем здесь упоминать о нрименении этих реакций для аиализа белков способы гидролиза обсуждаются на стр. 405 и 466. Из большой области примепепия этих методов для аиализа свободных аминокислот биологического материала мы приведем лишь некоторые методические нодробпости, а также способы оиределения некоторых редких соединений, дающих положительную реакцию с нингидрином, с которыми может столкнуться читатель. Для животного мате])иала мы приведем некоторые нормальные показатели и обратим внимание на методы, имеющие значение для диагностики. [c.439]

Исследования по выяснению влияния на токсин частичного кислотного гидролиза проводились Бишопом с соавторами (Bishop et al., 1959) с экстрактами, полученными по первому вышеописанному методу и содержащими 1000 М. Е./мл. После их вьь паривания к сухому остатку добавлялась смесь ледяной уксусной кислоты с 10 н. соляной кислотой (1 1,2 мл/объем). Смеси выдерживались в темноте при 37°. Через 24, 48, 70 и 94 часа в них проводились биологические испытания и хроматографирование. Оказалось, что за 24 часа гидролиз снижал токсичность на 50%, через 48 час.— на 757о- Полная инактивация наблюдалась через 70 час. При хроматографировании же были обнаружены свободные аминокислоты во всех интервалах по времени. Хроматограммы с аналогичными аминокислотами были получены и из гидролизата исходного материала, гидролиз которого проводился в запаянных ампулах 10 и. соляной кислотой при 105°. [c.160]

При выборе метода выделения фенола, встречающегося в природе, необходимо учитывать не только свойства соединения, как упоминалось выше, но также и химический состав биологического источника. Растительный материал состоит в основном из нерастворимой целлюлозы и лигнина, а в свежем виде может содержать также большое количество (70—80%) воды. Кроме того, могут присутствовать хлорофилл, воски, жиры, терпены, сложные эфиры, растворимые в воде соли, гемицеллюлозы, сахара и аминокислоты. Из свежего или сухого материала, как правило, сначала выделяют с помощью неполярного органического растворителя (например, петролейного эфира, гексана, бензола, хлороформа или эфира) нефенольные, неполярные вещества. Фенольные соединения можно затем выделить путем экстракции ацетоном, этанолом, метанолом или водой, причем выбор растворителя определяется числом гидроксильных групп и остатков сахара в молекуле. В некоторых случаях растительные материалы подвергаются непосредственной экстракции щелочью, но это не всегда приводит к хорошим результатам. Фенолы из растительного материала затем очищаются путем ряда экстракций и осаждений. С этой целью сырой материал переносят в несмешивающийся растворитель, такой, как эфир, бутанол или этилацетат, и смесь последовательно экстрагируют разбавленными растворами оснований в порядке возрастания активности сначала ацетатом натрия (для удаления сильных кислот), а затем бикарбонатом натрия, карбонатом натрия и едким натром. Водные экстракты, содержащие искомые продукты, подкисляют и вновь экстрагируют бутанолом, эфиром или этилаце-татом. Процедуру повторяют до получения кристаллического продукта. Подобное фракционирование в настоящее время осуществляется путем автоматической подачи несмешивающихся растворителей по принципу противотока (Хёрхаммер и Вагнер [9]). Фенолы можно отделять от других продуктов, содержащихся в растениях, путем осаждения с помощью нейтрального или основного ацетата свинца. Этим методом до некоторой степени отделяются о-диоксисоединения (дают осадок) от монозамещенных соединений (не дают осадка). Соли свинца разлагают серной кислотой, сероводородом или катионообменными смолами и свободные с )енолы элюируют из неорганических солей спиртом. [c.36]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология