Измерение газа при изучении процессов дыхания

С этой целью может быть использован прием кратковременного прекращения контакта аэрирующего газа и культуральной жидкости при последующем измерении снижения в ней конц.ен,-трации растворенного кислорода, которое в данном случае будет обусловлено только процессом дыхания микроорганизмов. Однако хотя этот способ определения дыхательной активности и используется, он является нежелательным, так как при нем неизбежно нарущаются условия культивирования. Одним из наиболее распространенных способов определения дыхательной активности микробных клеток является манометрический метод Варбурга, описанный в работе [172]. Этот метод основан на измерении давления газа в замкнутой встряхиваемой ячейке, заполненной пробой культуры. При условии полного поглощения газов (например, СОг), выделяемых метаболизирующей. культурой, падение давления газа в замкнутой ячейке характеризует только потребление кислорода в процессе дыхания. Существенным недостатком метода Варбурга, значительно ограничивающим область его применения, является необходимость замены культуральной жидкости буферным раствором. Это неизбежно сопровождается изменением физиологического состояния клеток, поэтому метод Варбурга больще подходит для сравнительного изучения интенсивности дыхания, чем для определения абсолютных значений. [c.255]

Метод основан на измерении чувствительным манометром изменения давления в замкнутом сосудике при постоянной температуре. Поскольку при изучении фотосинтеза и дыхания исследователь имеет дело с процессами, в которых участвуют два газа, то концентрацию одного из них необходимо поддерживать на постоянном уровне, чтобы он не влиял на изменение давления в системе. [c.229]

Химические и биохимические методы трудно приспособить для непрерывного наблюдения за скоростью фотосинтеза, поэтому физикохимические методы давно привлекали внимание исследователей в этом отношении. В современных количественных исследованиях процессов метаболизма манометрические измерения приобрели преобладающее значение. Биохимики нашли, что почти каждая биохимическая реакция может проводиться таким образом, чтобы происходило поглощение или выделение газа, и это часто дает наилучший способ для измерения ее скорости. Реакции гемоглобина с кислородом и окисью углерода были первыми, для которых этот метод был разработан Холдейном и Баркрофтом затем он был применен для изучения дыхания и фотосинтеза. Со времен Сакса [3] получил известность и широкое распространение приближенный метод измерения объема выделенного кислорода путем подсчета пузырьков . В спокойном растворе с определенным поверхностным натяжением пузырьки газа, отделяющиеся от листьев, имеют приблизительно одинаковую величину, так что скорость образования газа может быть вычислена путем умножения числа пузырьков, образующихся в единицу времени, на объем одиночного пузырька. Этот метод прост и чувствителен, но явно чреват ошибками, вызываемыми различием в смачиваемости листовой поверхности, слиянием мелких пузырьков в крупные, влиянием конвекционных токов или размешивания на размер пузырьков и подобными осложнениями. Многие авторы [15, 21, 29, 35, 45] старались усовершенствовать этот метод и сделать подсчет пузырьков автоматическим. Обсуждение этих попыток можно найти в книге Спёра [40]. Важное возражение против этого метода было выдвинуто Гесснером [63] пузырьки постоянного размера могут образовываться только в спокойной воде, в которой фотосинтезирующее растение окружается вскоре слоем воды со щелочной реакцией, с малым содержанием углекислоты и пересыщенной кислородом, а каждый из этих трех факторов может сильно влиять на скорость фотосинтеза. [c.255]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология