Мутантные операторы

Рис. 14.4. Конститутивные мутации оператора (о ) являются 1 ис-доминантными. Верхний оперон содержит мутантный оператор, не способный связываться с репрессором. Поэтому прилегающие к нему структурные гены выражаются конститутивно. Нижний оперон содержит оператор дикого типа, способный связываться с репрессором и поэтому выражаемый только при индукции. Поведение каждого ряда структурных генов контролируется исключительно смежным оператором. Другой оператор не влияет на их свойства.

НЫМИ дальше от оператора, чем мутантный ген. Так, например, в приведенной ниже схеме [c.538]

В случае некоторых мутантных репрессоров имеет место определенный тип взаимодействия, названный негативной комплементацией. Она может наблюдаться при комбинировании генов lad w. lad . Мутация lad ведет к образованию репрессора, который не способен связываться с оператором и является поэтому представителем аллелей- конститутивного типа. Поскольку мутация типа lad инактивирует репрессор, она является рецессивной по отношению к дикому типу. Однако символ — d указывает, что этот вариант негативного типа проявляет доминантность в случае объединения с аллелем дикого типа. [c.184]

В свете этих данных становится понятно, почему мутации, уменьшающие сродство оператора к репрессору в 20-30 раз, приводят к конститутивному выражению генов оперона. В пределах генома мутантные сайты могут утратить преимущество в отношении случайных сайтов. Их специфическое сродство к репрессору по сравнению со случайными сайтами оказывается не настолько выраженным, чтобы они могли сохранять свой статус предпочтительных нуклеотидных последовательностей. [c.186]

Этот эксперимент показал, что метилирование G в положе-гши 4 оператора подавляет связывание репрессора и Сго дикого типа, но не оказывает никакого действия на связывание мутантных белков. Оба мутантных белка связываются слабее, [c.123]

Мутантные репрессоры рс нормально связываются с ДНК, но не могут активировать транскрипцию такие мутанты были выделены и в случае А,-репрессора, и в случае репрессора фага Р22. Во всех случаях мутации затрагивают аминокислотные остатки, которые, как предполагается на основании структурных исследований и других данных, расположены вблизи от полимеразы и, возможно, соприкасаются с ней. Таким образом, данные по этим мутантам служат дополнительным подтверждением справедливости наших представлений о комплексах репрессоров с операторами в тех двух случаях, о которых идет речь. [c.124]

В лизогенных клетках продукт гена с1 - репрессор - выключает все фаговые гены, кроме с1, в том числе гены, необходимые для литического роста фага. Гены сП и III участвуют в установлении лизогенного состояния на ранней стадии заражения, но не нужны для поддержания состояния лизогении. Как мы уже знаем, белок СИ при участии белка СИ1 включает транскрипцию гена с1. Фаг X vir содержит мутации в местах связывания репрессора, которые теперь называются операторами репрессор не может связаться с такими мутантными операторами, и потому X vir вызывает литическую инфекцию даже в присутствии репрессора. Чтобы фаг X стал вирулентным, в нем, как нам теперь известно, должны возникнуть мутации в двух операторах, Ol и 0 . [c.86]

Во многих точках последовательности операторного участка длиной 17 пар оснований можно произвести замену пар оснований, приводящую к уменьшению эффективности связывания репрессора с данным участком. Много мутантных операторов содержат ДНК фагов Xvir, которые способны расти в присутствии Х-репрессора. Первый из выделенных фагов Xvir содержал мутации в 0 , OrI и Or2. Если в дальнейшем использовать этот фаг для отбора мутантов, способных расти при более высоких концентрациях репрессора, чем в данном лизогене, то можно выделить новые мутанты, несущие допол- [c.105]

Клетки, несущие плазмиды, которые детерминировали синтез Сго под контролем /ас-репрессора, использовались для изучения влияния Сго в различных концентрациях на промоторы RM и Pr in vivo. Результаты одного такого эксперимента, аналогичного представленным на рис. 4.20, показали, что под действием Сго Pr выключается (в данном случае использовали Prm Up — 1), а при более высокой концентрации выключается также Pr (рис. 4.24). Используя мутантные операторы аналогично тому, как это было в случае с репрессором, удалось установить результат связывания Сго с каждым из операторных участков Or по отдельности (табл. 4.4). [c.116]

Наиболее убедительным доводом в патьзу предположения о специфическом контакте репрессора и РНК-полимеразы служит анализ. мутантных форм л-репрессора, которые сохранили способность связываться с оператором, но потеряли способность стимулировать транскрипцию с Ррм. Оказалось, что эти мутации затрагивают биспиральный ДНК-узнающий элемент репрессора. Измененные а.минокислотные остатки не участвуют в контактах с ДНК и, располагаясь на поверхности репрессора, могут контактировать с находящимся поблизости участком РНК-полимеразы (рис. 88). [c.146]

Какова природа вещества (апорепрессора), синтез которого контролируется геном I Недавние эксперименты показали, что Ьас-репрессор представляет собой белок, способный специфически взаимодействовать с Ьас-онераторным участком в ДНК. Функция репрессора заключается в блокировании транскрипции. Удаление ренрессора (обычно в результате взаимодействия с индуктором) инициирует транскрипцию. Участок, служащий началом координированного синтеза т-РНК, расположен рядом с операторным участком и носит название промотора (р) В результате мутации гена I образуются мутантные репрессоры различных типов I"-штаммы либо вообще не синтезируют ас-ренрессора, либо синтезируют дефектный репрессор, не способный блокировать транскрипцию ас-оперона 1 -штаммы синтезируют молекулы репрессора, не способные эффективно взаимодействовать с индуктором, вследствие чего в этих клетках Ьас-оперон выключен всегда — как в отсутствие индуктора, так и в его присутствии наконец, [ -штаммы синтезируют репрессор, которому для соединения с оператором необходим индуктор. У этих штаммов ферменты -оперона синтезируются в отсутствие индуктора, а введение индуктора в среду ингибирует их синтез. [c.537]

Если же образовывалась зигота Hfry+Zi"o i + X F y z+o i , то конститутивным оказывался синтез обоих ферментов — галактозидазы и пермеазы. Индекс z означает следующий интересный случай мутации. Цистрон z в соответствующем штамме давал начало не активному ферменту галактозидазе, а измененному белку без ферментативной активности. Белок можно было очистить и идентифицировать но иммунологической реакции. Иммунологическая специфичность мутантного белка совпадала oi специфичностью галактозидазы. В случае рассматриваемой выше зиготы под действием индуктора начинала действовать первая хромосома с аллелью z " и синтезировался измененный белок — мутант. Без индуктора же синтез белка не шел, так как цистрон Zi находился в положении trans к гену-оператору о=, позволявшему синтезировать ферменты без индукции. [c.493]

Все мутации I картируются на участке гена I, кодирующем N-koh-цевую область полипептида, т.е. ту область, которая непосредственно связывается с ДНК. С другой стороны, репрессор, продуцируемый мутантными клетками I , способен нормально связываться с индуктором. Это означает, что участок связывания с индуктором локализуется вне N-концевой области репрессора. Такое представление подтверждается при рассмотрении мутаций I другого типа 1 , которые проявляются в фенотипе суперрепрессии. В клетках репрессор связывается с оператором независимо от присутствия индуктора. Все мутации этого типа картируются в гене / вне области, кодирующей 50 N-концевых аминокислотных остатков репрессора. Таким образом, можно полагать, что /ас-репрессор содержит два функционально различных домена. [c.179]

Еще сильнее проявляется кооперативный эффект в том jiy4ae, когда эксперимент, проиллюстрированный на рис 4 20, проводят с оператором, у которого участок 0 1 несет мутацию, а 0 2 и Or3 являются участками дикого типа В этом эксперименте используют мутантный промотор, присоединенный к гену la Z, его обозначают P y Up — 1 Он эффективно работает в отсутствие репрессора С помощью этого мутанта легко оценить негативное и позитивное действие репрессора на активность Рис 4 22 иллюстрирует удивительный результат такого эксперимента при концентрации репрессора, лишь слегка превышающий ту, что приводит к активации Р в случае оператора дикого типа, происходит репрессия промотора в случае Or 1 [c.111]

Очень важно сохранение нуклеотидной последовательности домена te -оператора, связывающего репрессор. Об этом свидетельствуют результаты исследования эффективности репрессии in vivo у мутантов с модифицированными репрессорами или операторами (рис. 3.70). Интересные данные были получены и при изучении связывания очищенных репрессорных белков с операторами дикого типа и мутантными формами in vivo. Мутации, уменьшающие сродство репрессора к оператору, приводили к конститутивному синтезу ферментов, кодируемых /ас-опероном, т.е. к экспрессии гс-фер-ментов в отсутствие индуктора. Мутации, сопровождающиеся накоплением репрессора в клетках или увеличением сродства репрессора к оператору, делали /ас-оперон неиндуцибельным. [c.175]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология