Арбер

В.Арбер Впервые получены сведения о ферментах рестрикции ДНК [c.105]

Получение генов. Их возможно получать методом химического синтеза, выделением из геномов живых организмов, а также при помоши обратной транскриптазы, которая на соответствующей мРНК кодирует комплементарную ДНК (кДНК). Первый и второй методы имеют ограниченное применение. Химический синтез — достаточно длительная и дорогостоящая процедура. Вьщеление однородных фрагментов ДНК осуществляется при помощи ферментов-рестриктаз, которые узнают и расщепляют ДНК в строго фиксированных точках. Эти ферменты функционально связаны с модифицирующими метилазами следующим образом метилазы осуществляют метилирование в сайтах ДНК, которые атакуются рестриктазами. Метилирование защищает собственную ДНК клетки от неспецифической фрагментации, в то время как чужеродная ДНК немедленно разрушается. В месте разрыва полинуклеотидных цепей образуются, в частности, липкие концы, способные образовывать между собой комплементарные пары оснований. Открытие В. Арбером рестрикции и использование ее для получения генов было отмечено Нобелевской премией. В настоящее время идентифицировано более 500 рестриктаз, причем их название складывается из первой буквы рода микроорганизма и двух пер- [c.499]

Таким образом, появился метод специфических расщеплений молекул ДНК, который состааил основу современной методологии установления структуры нуклеиновых кислот и генной инженерии. Исследования рестрикционных эндонуклеаз были отмечены Нобелевской премией, присужденной X. Смиту, В. Арберу и Д. На-тансу. [c.297]

Подлинная революция в методологии определения последовательностн нуклеиновых кислот вообще и в особенности ДНК произошла после открытия ферментов рестрикции (X. Смит, В. Арбер, Д. Натане), позволяющих весьма специфично фрагментировать [c.308]

Какова природа блока, препятствующего размножению ограниченного фага Я- К на бактериях К12 (Р1) Арберу удалось показать, что фаг не только адсорбируется на невосприимчивых клетках К12(Р1), но даже инъецирует в них свою ДНК- Однако вскоре после заражения ДИК фага Х-К фрагментируется. Последующие исследования Арбера, Меселсона, а также некоторых других ученых показали, что процесс ограничения обусловлен действием определенной нуклеазы, закодированной в геноме профага Р1. Эта нуклеаза вызывает в ДИК фага а-К несколько двухцепочечных разрывов. Такие разрывы образуются в специфических участках генома фага Я, что отражает специфическое узнавание определенных нуклеотидных последовательностей ограничивающей нук-леазой. Были выделены мутанты фага Р1, которые потеряли способность образовывать эту нуклеазу. В результате этого фаги Я-К свободно развиваются на лизогенных бактериях, содержащих в качестве профага такой мутант фага Р1. [c.370]

Предположение, что за явление ограничения и модификации у фага fd отвечают два генетических участка, получило серьезное подтверждение, когда Арбер обнаружил, что ряд мутантов фага fd не ограничивается щтамом В даже в том случае, когда они выращены на штам.ме К12. Такие мутанты возникают в результате двух последовательных, независимых мутационных событий. Первое из них приводит к тому, что вместо 0,07% [c.372]

Швейцария США Арбер В. Натане Д., Смит X. Открытие естриктаз и их применение в молекулярной генетике [c.542]

Арбер (Arber) впервые получил данные о существовании ферментов рестрикции ДНК, впоследствии выделенных и [c.229]

Первые наблюдения. Заражая фагом X различные штаммы Е. соН, Арбер [296] обнаружил, что ДНК этого фага при пассаже через бактерию разрезается и теряет свою инфекционность. Оказалось, что ни классические рекомбинационные процессы, ни мутации в этом не участвуют. Более того такая судьба постигала не только фаговую но и любую чужеродную ДНК, попадаю щую в бактерию. Такое разрезание (реет рикцию) следует рассматривать как защит ный механизм клетки. Как было показано в дальнейшем, рестрикция чужеродной ДНК осуществляется ферментами, называемыми рестрикционными эндонуклеазами (рестриктазами). Встает вопрос, почему ре-стриктазы не разрезают ДНК собственной клетки. Ответ был найден Арбером и состоял в следующем. Эти ферменты вступа- [c.123]

Открытие рестриктаз уходит корнями в исследование молекулярных основ феномена хозяйской специфичности, обнаруженного в начале пятидесятых годов, в ходе изучения эффективности посева фагов при смене хозяина [76, 234, 235]. Последующие исследования этого явления, выполненные в основном Арбером с сотр. [60, 61, 62, 126, 232], привели к раскрытию состава и особенностей функционирования штаммоспецифической системы рестрикции и модификации ДНК. В эту систему входят два специфичных для определенного штамма фермента — ДНК модифицирующий (метилаза цитозиновых или адениновых остатков ДНК) и ДНК расщепляющий (эндодезок-сирибонуклеаза-рестриктаза). Эти ферменты узнают в ДНК идентичные короткие последовательности нуклеотидов. Метилаза, модифицируя определенные основания в пределах узнаваемого участка, защищает внутриклеточную ДНК от действия рестриктазы. Проникшая в микробную клетку, обладающую системой хозяйской специфичности, немодифицированная соответствующим образом ДНК подвергается расщеплению внутриклеточной специфической эндонуклеазой. В подавляющем большинстве случаев это приводит к инактивации этой ДНК. [c.6]

Арбер изучал систему рестрикции—модификации типа 1 на содержащем одноцепопечную ДНК фаге Г(1, поэтому он мог указать положение участка расщепления относительно участка узнавания так, как это сделано в тексте,- Прим. [c.178]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология