Масса молекулярная зависимость от удерживаемого

В упрощенном виде механизм эксклюзионной хроматографии может быть представлен следующим образом. Неподвижная фаза — пористый материал, причем средний размер пор сопоставим с размерами молекул разделяемых веществ. Молекулы смеси в колонке, заполненной таким материалом, будут вести себя по-разному, в зависимости от размеров. Наиболее крупные молекулы, не способные диффундировать внутрь пор неподвижной фазы, могут находиться только в пространстве между частицами и, следовательно, их удерживаемый объем будет равен объему колонки минус суммарный объем частиц неподвижной фазы (Ко). Молекулы, размеры которых меньше наиболее мелких пор сорбента, способны диффундировать внутрь частиц, поэтому удерживаются в колонке дольше, чем более крупные молекулы. Объем их элюирования равен полному объему растворителя в колонке, т. е. сумме объема пор и объема между частицами (К/). Молекулы промежуточных размеров, для которых доступна та или иная доля пор сорбента, будут выходить из колонки между объемами Уо и I//. Если ввести в колонку смесь веществ с известными и в достаточной степени различающимися молекулярными массами, из хроматограммы можно получить калибровочную кривую, подобную изображенной на рис. 111.40. Следовательно основная сфера применения эксклюзионной хроматографии — фракционирование смесей в соответствии с их молекулярными массами. Калибровочная кривая эксклюзионной хроматографии в своей средней части содержит линейный участок, в котором разделяющая способность колонки и точность измерений максимальны. Эта линейная часть обычно охватывает примерно два порядка молекулярных масс. Рабочий диапазон эксклюзионной колонки зависит от размера пор и смещается в область больших масс при увеличении среднего размера пор сорбента. Поэтому для работы в широком диапазоне масс обычно последовательно соединяют две или более колонок, различающихся по размеру пор. [c.333]

Каждый сорбент характеризуется объемом пор, следовательно, областью разделяемых молекулярных масс и фа-дуировочным фафиком. Градуировочный фафик в этом варианте тфомато-фафии имеет сложный вид, характеризующий зависимость удерживаемого объема от молекулярной массы или размера молекул. Связь между удерживаемым объемом и молекулярной массой разделяемых полистиролов показана на рис. 8.32. Молекулы с массой 2,6 10 —МО не удерживаются в порах сорбента и вымываются растворителем, объем которого равен свободному объему колонки У (участок на фа-фике обозначен У ). Молекулы с массой < мо проникают в поры неподвижной фазы и элюируются объемом растворителя, который соответствует его доле в порах сорбента У, (участок на кривой обозначен В). Все компоненты при 0 = 1 должны элюироваться в [c.325]

При проведении исследования этим способом предполагается, что сорбционные взаимодействия между носителем и макромолекулярными стандартами сведены к минимуму. Таким образом, удерживание на сорбентах с одинаковыми геометрическими характеристиками и плотностью прививки для одинаковых стандартных условий должно совпадать. Модифицирующее покрытие должно защитить внутреннюю поверхность от контакта с молекулами больше определенного размера, тогда они должны практически не удерживаться и выходить из колонки раньше, чем проникающие под защитный экран меньшие молекулы. В то же время фенильные радикалы в полистирольных молекулах способны к специфическому взаимодействию с поверхностью силикагеля, что дает определенный вклад в их удерживание. Чем больше доступная для молекул полистирола поверхность, тем выше должна быть величина удерживания. Зависимости времени удерживания полистирольных стандартов от логарифма их молекулярной массы для сорбентов всех изучаемых серий приведены на рис. 9.15. Из кривых следует что средний диаметр пор для исходного и модифицированного сорбента равны приблизительно 10 и 3,5 нм для 1 и 5, 6 и 3,5 нм для 1 и 4, 4 нм для обоих сорбентов из серии Карбокси и SS10 нм для обоих из серии ИДК. [c.559]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология