Альбумин сывороточный, спин-меченый

По спектрам ЭПР изучали влияние ряда ГНР на параметры вращательной диффузии спин-меченых макромолекул СА, гемоглобина и иммуноглобулина- G, в которых спиновая метка 7 ковалентно присоединялась к в-93 SH фуппе гемоглобина, SH группе цистеина сывороточного альбумина и остатка гистидина иммуноглобулина-G. [c.562]

Радикал АУ1 вводили в белковый раствор в виде раствора радикала в этиловом спирте. Содержание спирта в исследуемых белковых растворах не превышало 3%. Пример спектра для этой системы приведен на рис. 1У.18. При этом сывороточный альбумин был растворен в 0,1 М фосфатном буфере при pH 7 и концентрации 1—2-10 молъ1л (предварительные эксперименты, проведенные со спин-меченым сывороточным альбумином, показали, что при указанных условиях при комнатных температурах можно пренебречь межмолекулярным белковым взаимодействием). [c.187]

При анализе спектров ЭПР спин-меченого сывороточного альбумина было обнаружено, что большая часть свободных радикалов находится в таком же связанном состоянии, как и в случае поли- -лизина. Однако в спектре можно было наблюдать еще и компоненту сигнала ЭПР с другими параметрами, которые характерны для идшноксильных радикалов в твердых органических стеклах. [c.167]

Исходя из того, что одна молекула белка связывала от одного до двух свободных радикалов, авторы предположили, что в сывороточном альбумине имеется две различные аминогруппы, реагирующие с иминоксильными свободными радикалами. В случае присоединения парамагнитной метки к аминогруппе, расположенной на поверхности молекулы белка, получается спектр ЭПР со слабой иммобилизацией спин-метки. Другая аминогруппа, расположенная в глубине белковой глобулы, при связывании со спин-меткой дает спектр ЭПР сильно иммобилизованных свободных радикалов. В последнем случае свободный радикал, связанный ковалентной связью с молекулой белка, гидрофобно взаимодействует с близлежащим участком полипептидиой цепи. При кислотно-щелочной денатурации сывороточного альбумина, а также при переваривании спин-меченого белка пепсином широкие компоненты спектра ЭПР сильно иммобилизованных свободных радикалов исчезали, и сигнал ЭПР исследуемой системы приближался по своим параметрам к спектру ЭПР описанного (стр. 166) спин-меченого поли- -лизина. [c.167]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология